赤血球凝集による反応。 Vi 抗原による腸チフスの血液検査。血液吸着反応のウイルス学での使用

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凝集反応試薬（抗体）と細胞または異物の表面にある抗原との相互作用に基づいています。その結果、大きなサイズの凝集体が形成され、肉眼でも確認できるほど沈殿します。したがって、血液型は、ABO システム、その中の Rh 因子の存在などに従って決定されます。これは、沈殿物 (凝集物) の体積が沈殿物の体積を超えるため、沈殿反応と比較して感度の高い診断方法です。

直接的な赤血球凝集

直接赤血球凝集検査 (RPHA) は、微生物や赤血球の表面抗原、およびそれらに対する抗体を検出するために使用されます。
試験物質（血液）は、抗体を含む標準血清に添加されます。直接凝集反応の速度は、試験物質の量、血清の量と濃度、および周囲温度に関係します。

間接的な血球凝集

間接的赤血球凝集反応は、赤血球診断を使用して患者の血液中の抗体を検出するために実行されます。試薬は赤血球であり、その表面には抗原（微生物のタンパク質、毒素、アレルゲンなど）が存在します。
患者の血清は 0.9% 塩化ナトリウム溶液で希釈され、次に赤血球診断薬が添加され、結果が監視されます。この高感度な診断法は、低濃度でも抗原を検出します。

赤血球凝集反応 (RGA)。

研究室では、2 つの異なる赤血球凝集反応が使用されます。

最初の RGA は血清学を指します。この反応では、赤血球が対応する抗体 (ヘマグルチニン) と相互作用するときに凝集します。この反応は血液型を決定するために広く使用されています。

2 番目の RHA は血清学的ではありません。その中で赤血球の凝集は起こらない

抗体ではなく、ウイルスによって形成される特殊な物質です。たとえば、インフルエンザウイルスは鶏の赤血球を凝集させ、モルモット、ポリオウイルス - 羊の赤血球。この反応により、試験材料中の特定のウイルスの存在を判断することが可能になります。

反応は試験管またはウェル付きの特別なプレート上で行われます。ウイルスの存在を検査する物質は等張液で 1:10 ～ 1:1280 に希釈されます。各希釈液 0.5 ml を等量の 1 ～ 2% 赤血球懸濁液と混合します。対照では、0.5 mlの赤血球を0.5 mlの等張液と混合する。試験管をサーモスタットに 30 分間置き、プレートを室温で 45 分間放置します。

結果を考慮する。で肯定的な結果試験管またはウェルの底で反応が起こると、波形の縁（「傘」）を持つ赤血球の沈殿物が落ち、ウェルの底全体を覆います。で否定的な結果赤血球は滑らかなエッジを持つ高密度の沈殿物 (「ボタン」) を形成します。同じ沈殿物を制御する必要があります。反応の強さは「+」記号で表します。

赤血球凝集反応

ウイルスの力価は、凝集が起こる物質の最大希釈度です。

赤血球凝集阻害反応

これは、特定の抗ウイルス抗体がウイルス (抗原) と相互作用してウイルス (抗原) を中和し、赤血球を凝集させる能力を奪う、つまり赤血球凝集反応を阻害する血清学的反応です。この反応によりウイルスの種類や種類を判断することができます。

リアクション設定。 0.25 mlの抗ウイルス血清を等量のウイルスを含む物質と混合します。混合物を振盪し、サーモスタット内に３０分間置き、その後、０．５ｍｌの１〜２％赤血球懸濁液を添加する。

結果を考慮する。血清と赤血球の制御における実験を正しく設定すると、「ボタン」が形成されるはずです。赤血球を凝集させる因子はありません。抗原制御では、「傘」が形成され、ウイルスが赤血球の凝集を引き起こします。血清が研究対象のウイルスと相同である場合、「ボタン」が形成されます。つまり、血清がウイルスを中和したことになります。

間接的な赤血球凝集反応

間接的（受動的）赤血球凝集反応（RIHA）は、赤血球の表面に可溶性抗原が吸着されている場合、吸着された抗原に対する抗体と相互作用するときに赤血球が凝集する能力を獲得するという事実に基づいています。

リアクション設定。血清を56℃で30分間加熱し、1:10〜1:1280の比率で順次希釈し、0.25mlで試験管またはウェルに注ぎ、次に抗原が吸着した赤血球を2滴加えます。

コントロール:抗原が吸着した赤血球の懸濁液は明らかに免疫血清を使用し、抗原が吸着した赤血球の懸濁液は正常血清を使用します。正常な赤血球と試験した血清の懸濁液。最初のコントロールでは凝集が起こるはずですが、2 番目と 3 番目のコントロールでは凝集が起こらないはずです。

質問をコントロールします。

1. 赤血球とウイルスの存在について検査された物質との間で陽性の RGA 結果は何を示していますか?

2. ウイルスとそれに対応する血清を加えると赤血球凝集反応が起こりますか? この現象を明らかにする反応の名前は何ですか?

実践的な仕事№12。

補体結合反応。

補体結合反応 (RCT) は、特定の抗原抗体複合体が常にそれ自体に補体を吸着 (結合) するという事実に基づいています。

この反応は、抗原の同定や感染症、特にスピロヘータ (ワッサーマン反応)、リケッチア、ウイルスによって引き起こされる病気の血清診断に広く使用されています。

PCS は複雑な血清学的反応です。これには、補体と 2 つの抗原抗体システムが関与します。本質的に、これらは 2 つの血清学的反応です。

右の基本システムは、抗原と抗体 (1 つは既知で、もう 1 つは不明) で構成されます。一定量の補体がそれに加えられます。このシステムの抗原と抗体が一致すると、補体が結合してリンクされます。得られた複合体は細かく分散しており、目に見えません。

この複合体の形成は、第 2 の溶血システムまたは指示薬システムの助けを借りて知られています。これには、羊の赤血球 (抗原) とそれに対応する溶血血清 (抗体) が含まれます。既製の免疫複合体。この系では、赤血球溶解は補体の存在下でのみ起こります。補体が最初のシステムによって結合されている場合、2 番目のシステムでは溶血は起こりません。無料の補完はありません。溶血がないこと（チューブの内容物が濁っている、またはチューブの底に赤血球の沈殿物がある）は、RSK の陽性結果として記録されます。

最初のシステムで抗原が抗体に対応しない場合、免疫複合体は形成されず、補体は遊離したままになります。自由なままであると、補体は2番目のシステムに参加し、溶血を引き起こし、RSKの結果は陰性になります（チューブの内容物は透明です-「漆の血」）。

成分、補体結合反応:

1. 抗原 - 通常、溶解物、抽出物、ハプテン、

まれに微生物の懸濁液が含まれることもあります。

2. 抗体 - 患者の血清。

3. 補体 - モルモット血清。

4. 抗原 - 羊の赤血球。

5. 抗体 - 羊赤血球に対する溶血素。

6.等張液。

RSC が参加していることを考慮してたくさんの複雑なコンポーネント、

それらは事前に滴定し、正確な量と等容積で反応に取り込む必要があります: 0.5 または 0.25 ml、まれに 0.2、1.25 または 1.0 ml (容積が大きいほど、より正確な結果が得られます)。反応成分の滴定は、実験と同じ体積で実行され、不足している成分を等張溶液で置き換えます。

赤血球凝集反応 (RHA)

研究中の微生物が血清によって力価または力価の半分まで凝集した場合、その微生物はアンプルのラベルに名前が示されている種に属すると考えることができます。

多価凝集血清と一価（モノレセプター）凝集血清の違いは何ですか。ある種の微生物でウサギを免疫すると、なぜ複数の抗原に対する抗体を含む血清が生成されるのでしょうか?

モノレセプター血清 - 1 つの抗原のみに対する抗体を含む血清、および共通の抗原を持つ 2 つまたは 3 つの関連細菌との凝集反応を引き起こす多価血清。凝集血清は、凝集反応における微生物を同定するために使用されます。このような血清の欠点は、集団凝集反応を引き起こす可能性があることです。それらには、共通の抗原を持つ細菌に対する抗体が含まれています。

赤血球凝集反応。説明と用途

これは、抗原があらかじめ吸着されている赤血球が、相同な血清（抗体）の存在下で凝集する能力を獲得するという事実に基づいています。

この場合、赤血球は特定の決定基を持つキャリアの役割を果たし、その凝集は抗原と抗体の反応の結果として起こります。

表面に抗原がしっかりと付着した赤血球は、赤血球抗原診断、または抗原に感作された赤血球と呼ばれます。

別の種類の RNHA - 抗体は赤血球の表面に吸着され、相同抗原の存在下で凝集が起こります。この場合、そのような赤血球は、赤血球抗体診断、または抗体に感作された赤血球と呼ばれます。

これら 2 つの基本的な方法論的アプローチに基づいて、RNGA の多くの修正が開発され、使用されています。したがって、ラテックスの小さな標準粒子がキャリアとして使用されます。この場合、この反応はラテックス凝集反応 (RLA) と呼ばれるか、黄色ブドウ球菌- 凝集反応など通常、赤血球診断薬は生物産業の企業で調製され、RNGA の主な経験はすでに診断研究所に導入されています。

赤血球診断薬の調製には次の手順が含まれます。

ホルムアルデヒド、グルタル酸、またはアクリルアルデヒドによる赤血球の固定。このように処理された赤血球は長期間保存されます。より多くの場合、羊、人間、鶏などの赤血球がこの目的に使用されます。
タンニン溶液による固定赤血球の処理。その結果、赤血球はその表面にタンパク質（ウイルスや抗体）を不可逆的に吸着する特性を獲得します。
ウイルスまたは抗体による黄化赤血球の感作。

赤血球診断薬の調製方法は、ウイルス感染症違う。

抗体力価を検出および決定するために RNHA を設定する手法は次のとおりです。

血清の連続 2 倍希釈液に等量の抗原感作赤血球を加えます。
混合物を室温で 2 ～ 3 時間、または 4 °C で 16 ～ 18 時間放置します。
結果を考慮に入れてください。血清に赤血球が感作されたウイルスに対する抗体が含まれている場合、赤血球凝集が観察され、これを十字で評価します。

血清抗体力価は、少なくとも 2 回の交雑によって依然として赤血球凝集が得られる血清の最高希釈度とみなされます。

RNGA には、関連するすべてのコントロールが付属しています。通常、反応はマイクロ法で行われます。

RNHA を使用すると、次の診断タスクを解決できます。

既知の赤血球抗原診断を使用して、血清中の抗体を検出し、その力価を決定します。
既知の赤血球抗体診断を使用して未知のウイルスを検出および識別します。

RNGA の利点: 高感度、設定技術の容易さ、および素早い応答。ただし、安定した赤血球診断薬の調製には大きな困難があることに注意することが重要です（使用する成分の純度に大きく依存し、ウイルスの種類ごとに赤血球の固定、変色、および感作のモードを選択する必要があります）。。

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赤血球凝集阻害反応 (HAIT)

RGA は、特定の抗原が赤血球に吸着されたときに赤血球がくっつく能力に基づいています。尿膜腔、羊水、ニワトリ胚の絨毛膜尿膜の懸濁液、ウイルスに感染した動物の培養物または器官からの懸濁液および抽出物、天然の感染物質が血球凝集反応の試験材料として使用されます。 RGA は免疫血清の関与なしで行われるため、血清学的ではありません。また、RTGA を設定するための抗原の有効希釈を選択するために、または試験材料 (インフルエンザなど) 中の抗原 (ウイルス) の存在を選択するために使用されます。反応には動物、鳥類、人間のI(0)血液型の赤血球が使用されます。

おおよその RGA を設定するには、赤血球の 5% 懸濁液を 1 滴と試験物質を 1 滴、スライドガラスに塗布し、完全に混合します。陽性結果が得られた場合は、1 ～ 2 分後に赤血球の凝集の出現を肉眼で観察します。

ポリスチレンプレートのウェル内の拡張された列にＲＨＡを設置するために、０．５ｍｌの体積の生理学的溶液中の試験物質の２倍に増加する希釈物を調製する。すべてのチューブに、0.5 ml の 0.25 ～ 1% 赤血球懸濁液を加えます。結果は、対照 (赤血球 + 生理食塩水) での赤血球の完全な沈降後に考慮されます。反応は赤血球沈降物の性質によって考慮されます。陽性の場合、凝集の程度はプラスでマークされます。 4 つのプラスは、試験管 (傘) の底を覆う接着した赤血球の薄膜の形をした反応を評価します。フィルムに隙間がある反応は 3 つのプラスでマークされ、波形のレースのエッジを持つフィルムの存在を示します。接着した赤血球の量は 2 つのプラスで示され、凝集した赤血球の塊のゾーンに囲まれた赤血球の綿状の沈殿物は 1 つのプラスに対応します。明確に定義された赤血球沈降物は、対照と区別できず、凝集がないことを示しています。力価は、2回のプラスによって赤血球の凝集を引き起こした試験物質の限界希釈度とみなされます。

RGA の結果が陽性であったため、研究は続行され、タイプ特異的な血清を用いた血球凝集阻害試験を使用して、分離されたウイルスのタイプを決定します。

RTGA は、特定の抗体によって中和されたウイルスは赤血球を凝集させる能力を失うため、ウイルスの赤血球凝集を抑制する抗血清の特性に基づいています。ウイルスのおおよそのタイピングには、ガラス上に滴下する方法が使用されます。分離されたウイルスの型の最終決定と血清中の抗体の力価測定のために、増殖した RTHA が試験管またはウェルに入れられます。この目的のために、生理食塩水で血清の 2 倍希釈液を調製し、0.25 ml に注ぎます。ウイルスを含む物質 1 滴と 1% 赤血球懸濁液 1 滴を血清希釈液に加えます。

RTGA を使用してウイルスの種類を決定する場合、型特異的な血清が使用され、これを等量の抗原の使用希釈液に加えます。分離されたウイルスのタイプの所属は、このウイルスに対して最も高い抗体価を示した特定の免疫血清によって決定されます。

RGA と RTGA はウイルス感染症の診断に広く使用されています ( ダニ媒介脳炎、インフルエンザなど）特定の抗体を検出し、抗原によって多くのウイルスを識別するために使用されます。

免疫蛍光反応 (RIF)

RIFは、細菌、リケッチア、ウイルスの抗原と、反応性基（スルホクロリド、イソチオシアナイトなど）を有する蛍光色素（フルオレセインイソチオシアネート、ローダミン、B-イソチオシアナイト、リサチンローダミンB-200、スルホクロリドなど）で標識された特異的抗体との組み合わせに基づいています。。）。これらの基は抗体分子の遊離アミノ基と結合し、蛍光色素で処理しても対応する抗原に対する特異的親和性を失いません。得られたAG-AT複合体は、蛍光顕微鏡下ではっきりと見える、明るく発光する構造になります(図48)。 RIF は、少量の細菌抗原およびウイルス抗原を検出できます。 RIF 方式は、直接方式と間接方式の 2 つのバージョンで使用されます。

直接法は、抗原と標識抗体の直接的な会合に基づいています。間接法– 蛍光色素を使用した AG-AT 複合体の段階的な検出について。第 1 段階では、特定の抗原と特定の抗体との免疫複合体の形成が行われます。第 2 段階では、標識抗ガンマグロブリンで処理してこの複合体を同定します。

RIF の利点は、シンプルさ、高感度、結果の取得速度です。 RIF は、インフルエンザ、赤痢、マラリア、ペスト、野兎病、梅毒などの早期迅速診断の方法として使用されます。このような研究を行うには発光顕微鏡が使用されます。

ラジオイムノアッセイ (RIA)

RIA は、免疫診断の中で最も感度の高い方法の 1 つです。患者のB型肝炎ウイルスの抗原を検出するために使用されます。ウイルス性肝炎。これを行うために、参照血清 (B 型肝炎ウイルスに対する抗体を含む血清) が試験血清に追加されます。混合物を４０℃の温度で１～２日間インキュベートし、次いで参照抗原（１２５Ｊ同位体で標識された抗原）を添加し、インキュベーションをさらに２４時間継続する。参照血清タンパク質に対する沈殿抗免疫グロブリンを、得られた抗原抗体複合体に添加すると、沈殿が形成されます (図 49)。結果は、カウンターによって記録された沈殿物中のパルスの存在と数によって考慮されます。検査血清中に特定の抗体に結合した抗原が存在する場合、後者は標識抗原に結合しないため、沈殿では検出されません。したがって、RIAは、決定された抗原および既知量の標識抗原と抗体の活性中心との競合的相互作用の原理に基づいています。

ELISA法（ELISA）

この方法は、標識酵素 (西洋わさびペルオキシダーゼ、β-ガラクトース、またはアルカリホスファターゼ) と結合した対応する抗体を使用して抗原を検出するために使用されます。抗原を酵素標識免疫血清と混合した後、基質と色原体を混合物に加えます。 . 基質は酵素によって切断され、その分解生成物によって色原体の化学修飾が引き起こされます。この場合、色原体は色を変えます。色の強度は、結合した抗原および抗体分子の数に正比例します (図 50)。

最も一般的なのは固相 ELISA で、免疫応答の成分 (抗原または抗体) の 1 つが固体担体に吸着されます。ポリスチレンマイクロパネルが固体担体として使用されます。抗体を測定する場合、患者の血清、酵素で標識された抗グロブリン血清、および酵素の基質と色原体の混合溶液が、抗原が吸着されたウェルに順次添加されます。次の成分を添加するたびに、結合していない試薬が徹底的に洗浄されてウェルから除去されます。結果が陽性の場合、色原体溶液の色が変わります。

固相担体は抗原だけでなく抗体も感作することができる。次に、抗体が吸着したウェルに目的の抗原を導入し、酵素で標識した抗原に対する免疫血清を加え、さらに酵素と色原体の基質溶液の混合物を加えます。

ELISA は、ウイルスや細菌の病原体によって引き起こされる病気を診断するために使用されます。

セクション VII. ウイルス学の基礎

RGA および RTGA は、特定の抗体を検出し、抗原によって多くのウイルスを識別するために、ウイルス感染症 (ダニ媒介性脳炎、インフルエンザなど) の診断に広く使用されています。

赤血球凝集反応 (RHA)

RGA は、ある種の細菌やウイルスが赤血球の表面に吸着する能力を持っているという事実に基づいています。他の種類動物（および鳥）がくっついて凝集物を形成する (直接 RGA)。

赤血球表面への抗原（細菌、ウイルス）の吸着は、目に見える沈殿物の形成によって常に現れるわけではありません。さらに、同じ動物種の赤血球が異なる抗原を吸着する可能性があるため、RGA は非特異的です。

受動的（間接的）赤血球凝集（RPHA）の反応は特異的です。その設定のために、赤血球診断薬（抗原が吸着された赤血球）が予め調製される。この目的のために、雄羊（または雄鶏）の血液を無菌的に採取し、脱繊維化し、リン酸緩衝液（pH 7.2）中で 3 ～ 5 倍の遠心分離を使用して数回洗浄します。上清を除去し、赤血球の濃度を2.5%(1:40)に調整する。赤血球の2.5％懸濁液に、研究対象の微生物種の細菌の懸濁液を等量（1mlまたは0.5ml）、1mlあたり50～100億個の細胞の濃度で添加する。赤血球は多糖類の性質を持つ抗原を容易に吸着します。タンパク質性の抗原を吸着するために、赤血球を 1:20,000 に希釈したタンニンで前処理し、添加した抗原と組み合わせた赤血球を恒温槽 (37 °C) で 2 時間放置して感作 (吸着) させます。その後、リン酸緩衝液を用いて 3 ～ 4,000 rpm/min で 5 分間再度遠心分離しました (図 9.13)。

得られた赤血球診断結果を試験管 (またはプレキシガラス板のウェル) に入れ、標準免疫血清をそれに加えます。

陽性の場合、RGAが発生します-試験管の底の表面全体に分布する特徴的な薄片状または顆粒状の沈殿物の形での赤血球の損失（赤血球凝集）。これは、研究対象の微生物 (抗原) の種類が免疫血清抗体に特異的であることを意味します。陰性の場合、接着されていない赤血球は小さな均等な円の形で底に沈殿します。

RPGA の結果の信頼性を高めるために、 反応を遅らせる（制動） 赤血球凝集現象(RZGA) またはその修正版 - 抗体中和反応(RIA)。

米。 9.13。 受動的赤血球凝集反応 (スキーム): Er - 赤血球: AG - 抗原: AT - 抗体

RZGAの本質凝集反応は、特定の診断用血清と試験抗原（研究対象の種類の微生物が抗原として使用されます）で設定されるという事実にあります。この混合物を 37℃で 1 ～ 2 時間保持し、その後赤血球を加えます。試験抗原が診断用血清抗体と相同である場合、それらは相互作用し、追加された赤血球は凝集せず、反応の結果は陽性となります。試験抗原が血清抗体と相同でない場合、または試験抗原が材料に含まれていない場合、添加された赤血球が抗原を吸着し、RHA が発生します。RHA の結果は陰性であり、試験対象の微生物 (抗原) の種類は確立されません。

PH Aの設定方法等量を採取し、診断用免疫血清をさまざまな希釈の試験物質（目的の抗原）と混合し、1～2時間接触させた後、血清に特異的な特定の（既知の）抗原で感作された赤血球を加えます。抗体（赤血球診断）。目的の抗原が血清抗体と反応すると、それらは中和され、追加された赤血球は凝集せず、RHA は発生しません。PHA の結果は陽性です。試験材料に使用する血清の抗体に特異的な抗原が含まれていない場合、抗体の中和は行われません。そのため、赤血球診断薬を加えると赤血球の凝集（赤血球凝集）が現れ、RHAの結果は陰性となります。抗体中和試験は、生きている (または死んだ) 細菌の懸濁液だけでなく、粉砕組織の懸濁液からも抗原を検出できる高感度の方法です。いろいろな体、病気の生物の自然で加熱された秘密と排泄物。

ビダル反応。病気の2週目から、感染病原体に対する抗体が患者の血液中に蓄積します。それらを特定するために、患者の血清の凝集反応が検査されます。死滅したサルモネラ菌の培養物 (診断菌) が抗原として使用されます。

Vidal 反応を設定するには、患者の血清、診断キット一式、および等張塩化ナトリウム溶液が使用されます。

指の歯髄または肘静脈からの血液 (2 ～ 3 ml) が滅菌チューブに収集され、研究室に送られます。研究室では、試験管をサーモスタットに 20 ～ 30 分間置き、血餅を形成させます。その後、血餅をパスツールピペットで囲んで試験管の壁から分離し、冷蔵室に 30 分間置きます。 40分。分離された血清は吸引され、サルモネラチフスおよびパラチフスからの診断菌との凝集反応を開始するために使用されます。血清を得るには、血液を遠心分離します。

感染過程（腸チフスまたはパラチフス）が発生すると、同じ名前の病原体抗原に対するO抗体およびH抗体が体内で生成されます。

O 抗体は最初に出現し、すぐに消えます。 H 抗体は長期間持続します。予防接種でも同じことが起こりますので、陽性反応 O 抗原と H 抗原を伴うビダルは病気の存在を示し、H 抗原のみの反応は病気になったことのある人 (既往反応) とワクチン接種を受けた人 (ワクチン接種) の両方で発生する可能性があります。これに基づいて、ビダル反応は O 抗原および H 抗原 (diagnosticum) と別々に配置されます。

臨床的には腸チフスパラチフスAとBは類似しているため、病気の性質を特定するために、患者の血清が腸チフス菌とパラチフスAとBの診断薬と同時に検査されます。

ビダル反応は簡単で特別な条件を必要としないため、広く使用されています。

反応を設定するには、ドロップとボリュームの 2 つの方法があります (第 12 章を参照)。実際には、容積測定法がより頻繁に使用されます。線形凝集反応を設定する場合、行の数は抗原 (診断) の数に対応する必要があります。この病気の原因物質は微生物であると考えられており、その診断物質は患者の血清によって凝集されました。腸チフスとパラチフスの原因物質は共通の集団抗原を持っているため、集団凝集が観察されることがあります。この場合、血清のより大きな希釈で凝集が認められる一連の反応の結果は陽性とみなされる(表36)。

表 36. 凝集反応の考えられる結果

注記。実際には、ビダル反応は 4 つの診断名に分類されます。腸チフス「O」および「H」、パラチフス A および B - 診断名「OH」です。

凝集が血清の少量の希釈（1:100、1:200）でのみ発生する場合、病気の場合の反応をワクチン接種または既往症と区別するために、5〜7日後に凝集反応を再ステージングすることに頼ります。患者では抗体価が上昇しますが、ワクチン接種または回復した患者では抗体価は変化しません。したがって、血清中の抗体の力価の増加は、病気の指標として機能します。

Vi 抗原を保有する腸チフス病原体の体内への導入に反応して、Vi 凝集素が患者の血液中に出現します。これらは発病の 2 週目から決定されますが、通常、その力価は 1:10 を超えません。 Vi 抗体の検出は体内の腸チフス病原体の存在と関連しているため、これらの抗体の測定は、細菌の保菌者の同定を可能にするため、疫学的に非常に重要です。

Vi-赤血球凝集反応。これは抗体を検出するための最も感度の高い反応です。

反応の原理は、ヒト (グループ I) またはヒツジの赤血球が特別な処理を施した後、その表面に Vi 抗原を吸着し、対応する Vi 抗体と凝集する能力を獲得するというものです。

表面に抗原が吸着した赤血球は赤血球診断薬と呼ばれます。

Vi-赤血球凝集反応をセットアップするには、次の手順を実行します。

1) 患者の血清 (1-2 ml)。 2) 赤血球サルモネラ Vi 診断; H) Vi-血清。 4) O-血清。 5) 等張塩化ナトリウム溶液。

反応物を凝集試験管またはウェル付きのプラスチックプレートに入れます。

血液はビダル反応の場合と同じ方法で患者から採取されます。血清を入手してください。血清から 2 倍段階希釈物を調製します (1:10 から 1:160 まで)。

各希釈液０．５ｍｌをウェルに加え、０．２５ｍｌの赤血球診断液を加える。反応物を０．７５ｍｌの容量に入れる。

コントロールは次のとおりです。1) 標準凝集性モノレセプター血清 + 診断薬 - 反応は血清力価まで陽性でなければなりません。 2) 等張塩化ナトリウム溶液での診断 (対照) - 反応は陰性であるはずです。

ウェルの内容物を完全に混合し、サーモスタット内に 2 時間置き、翌日まで (18 ～ 24 時間) 室温で放置します。

会計は管理から始まります。反応は診断上の凝集の程度に応じて評価されます。

結果は 4 クロスシステムに従って考慮されます。

赤血球は完全に凝集し、穴の底に「傘」の形で沈殿します。

+++ 「傘」は小さく、すべての赤血球が凝集したわけではありません。

++ 「傘」は小さく、穴の底には凝集していない赤血球の沈殿物があります。

反応は否定的です。赤血球は凝集せず、ボタンの形でウェルの底に沈みました。

コントロールの質問

1. ビダル反応は病気のどの時期に診断されますか?

2. Vidal 反応を実行するにはどのような成分が必要ですか?

3. ビダルの反応にはどのような診断薬が使用されますか?

4. 腸チフスおよびパラチフス感染症の診断において最も感度が高い血清学的反応はどれですか?

5. Vi-赤血球凝集反応の定式化にはどのような診断薬が使用されますか?

6. 研究対象の培養物中の Vi 抗原の存在を確認するためにどの血清が使用されますか?

7. Vi-phage タイプの定義の重要性は何ですか?

先生から腸チフスサルモネラ菌、パラチフスA、パラチフスBのO-診断書とH-診断書、そして患者の血清を受け取ります。ビダルの反応を載せておきます。

栄養培地

環境 EMS、プロスキレフ、亜硫酸ビスマス寒天は、乾燥粉末の形で医療業界によって製造されています。それらはラベルの指示に従って準備されます。一定量の粉末を秤量し、適量の水を注ぎ、沸騰させ、滅菌ペトリ皿に注ぎます。

水曜日のラッセル。 950 mlの蒸留水に40 gの乾燥栄養培地を加え、5 gの栄養寒天を加えます。加熱して沸騰させ、粉末を溶かします。 1g×を50mlの蒸留水に溶解します。時間分のグルコースを調製した混合物に加えた。培地を５〜７ｍｌの滅菌試験管に注ぎ、流蒸気で滅菌し（２日間、２分間）、カラムが残るように面取りする。マンニトールとスクロースを含むラッセル培地も同様の方法で調製します。

乾燥寒天からのオルケニツキー培地。 2.5 gの乾燥栄養寒天を100 mlの蒸留水に溶かします。レシピ（ラベル）に示されているすべての材料を、50℃に冷却した寒天に加えます。試験管に注がれた培地は、流蒸気滅菌（20分間で3日間）され、その後面取りされます。完成したメディアは淡いピンク色になるはずです。

赤血球凝集による反応。 Vi 抗原による腸チフスの血液検査。 血液吸着反応のウイルス学での使用

直接的な赤血球凝集

間接的な血球凝集

赤血球凝集反応 (RGA)。

赤血球凝集反応

赤血球凝集反応 (RHA)

赤血球凝集反応。 説明と用途

赤血球凝集反応 (RHA)

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