Esame microscopico della bile. Calcoli di bilirubina nella cistifellea. Preparazione allo studio

Sine qua non analisi microscopica contenuto duodenale è il suo studio immediato quando la bile viene rilasciata. Se lo studio non può essere eseguito immediatamente, il materiale viene conservato per 1-2 ore aggiungendo ad esso formalina neutra (soluzione al 10% - 1/3 del volume), trasylol (1 ml, ovvero 1000 unità per 10-20 ml). Esaminare il sedimento (gocce di bile dal fondo della provetta) da diverse porzioni e il maggior numero possibile di scaglie di muco.

Leucociti si trova nei fiocchi di muco quando si osservano attentamente molti campi visivi. Non può essere dato valore diagnostico leucociti macchiati di bile, poiché gli elementi formati di qualsiasi origine, avendo perso la loro vitalità, si colorano rapidamente quando viene aggiunta loro la bile, mentre le cellule protette dal muco rimangono non colorate (uno stato di parabiosi). Il criterio principale per l'origine dei leucociti dall'uno o dall'altro segmento del sistema biliare sono le condizioni (da quale funzione del contenuto duodenale).

Epitelio colonnare si trova in filamenti di muco singolarmente ea strati. Con una certa abilità, è possibile distinguere tra l'epitelio dei dotti biliari, la vescica e duodeno e quindi effettuare la diagnosi topica del processo infiammatorio (accompagnato dalla desquamazione delle cellule epiteliali). Epitelio epatico dotti biliari - nuclei bassi prismatici, rotondi, situati vicino alla base, senza cuticola. Epitelio di base cistifellea- prismatico alto con un nucleo tondo (o ovale) relativamente grande situato vicino alla base e citoplasma spesso vacuolato.

Cristalli di colesterolo- hanno l'aspetto di sottili placche incolori di forma quadrangolare con un'estremità spezzata. Questa non è una prova diretta dell'esistenza calcoli biliari, ma indica tale possibilità, indicando una perdita di stabilità colloidale della bile.

bilirubinato di calcio- grumi (grumi) di pigmento marrone, giallo o marrone scuro, presenti solo occasionalmente nella pratica persone sane. Trovandoli dentro in gran numero(in scaglie di muco e gocce di bile), insieme ai cristalli di colesterolo, è anche un indicatore dei cambiamenti nelle proprietà colloidali della bile (e della possibile formazione di calcoli).



Acidi biliari visibile al microscopio sotto forma di piccoli granelli brunastri lucidi o giallo brillante, che spesso coprono l'intero campo visivo sotto forma di una massa amorfa. Rilevazione di un abbondante precipitato di acidi biliari in frazioni "pure" di bile duodenale con grande cura (per la difficoltà di eliminare completamente le impurità succo gastrico) può essere considerato un indicatore di discolia.

Acido grasso- cristalli sotto forma di delicati aghi lunghi o corti, spesso raggruppati in fasci. Può essere considerato un'indicazione di una diminuzione del pH della bile a causa di un processo infiammatorio (batteriocolia), nonché di una diminuzione della solubilità acidi grassi nella bile.

microliti(pietre microscopiche) - formazioni rotonde o sfaccettate scure, rifrangenti alla luce, nella loro compattezza significativamente diverse dagli accumuli di cristalli di colesterolo e più grandi della "sabbia" epatica. Sono costituiti da lime, muco e solo una piccola quantità di colesterolo. I microliti si trovano più comunemente nei fiocchi di muco e nelle gocce di bile (sedimenti) da una porzione AVANTI CRISTO(È necessario visualizzare un gran numero di preparazioni). Poiché i microliti sono associati al processo di formazione dei calcoli, trovarli ha un valore diagnostico.

Nel contenuto duodenale (in tutte le porzioni) si trovano spesso forme vegetative di lamblia. La Giardia è un protozoo che vive nel duodeno (e non nei dotti biliari), sono attratti da tutte le frazioni della bile per l'effetto irritante della sonda e del solfato di magnesio.

MICROSCOPICO lo studio deve essere effettuato immediatamente dopo aver ricevuto la bile, perché. i leucociti e altre cellule vengono distrutti dagli enzimi già nei primi 5-10 minuti.

globuli rossi. Queste cellule non hanno valore diagnostico, poiché il loro aspetto può essere associato a traumi durante il sondaggio.

Leucociti. I leucociti possono essere non colorati e macchiati di bile. Si trae una conclusione sull'infiammazione, tenendo conto di un complesso di sintomi: la presenza di muco, torbidità e leucociti più di 10 nel campo visivo. La presenza nel campo visivo di cristalli di colesterolo (un quadrato con un angolo spezzato) o di bilirubinato di calcio (i raggi cristallini partono da un granello di sabbia) indica colelitiasi o una predisposizione ad essa. Al microscopio, puoi vedere giardia, uova di trematodi e gli stessi trematodi (trematodi cinesi e trematodi di gatto).

BATTERIOLOGICO ricerca - se si osserva asepsi, vengono seminate le porzioni B e C. Normalmente, la bile è sterile, con infiammazione, vengono seminati microbi, più spesso coli, tifo o bastoncini di paratifo, potrebbe esserci una forma coccale.

Ricerca chimica - nelle porzioni B e C viene determinato il contenuto di colesterolo, bilirubina e acidi biliari. Normalmente, oscilla in un intervallo abbastanza ampio.

La bile normale non contiene elementi cellulari; a volte c'è una piccola quantità di cristalli di colesterolo e bilirubinato di calcio.

Il muco sotto forma di piccoli brandelli indica catarro dei dotti biliari, duodenite.

Gli eritrociti non hanno valore diagnostico, poiché spesso compaiono a seguito di traumi durante il sondaggio.

Leucociti. I leucociti che si trovano in piccole scaglie di muco in combinazione con l'epitelio dei dotti biliari o della cistifellea hanno valore diagnostico. La presenza di leucociti solo nella porzione A si osserva con duodenite e con fenomeni infiammatori nei grandi dotti biliari. La rilevazione di leucociti principalmente nella porzione B, con un contenuto inferiore nelle porzioni A e C, indica la localizzazione del processo infiammatorio nella cistifellea. Nella colangite si nota la predominanza dei leucociti nella porzione C. Un numero significativo di leucociti in tutte le frazioni della bile si osserva in pazienti anziani debilitati con colangite settica e ascessi epatici. I leucociti eosinofili si trovano nella colecistite allergica, nella colangite e nelle invasioni da elminti.

Epitelio. L'epitelio ciliato prismatico alto è caratteristico della colecistite, delle piccole cellule prismatiche dei passaggi epatici o dell'epitelio prismatico alto del dotto biliare comune - per la colangite. Grandi cellule cilindriche con cuticola e villi indicano patologia nel duodeno.

Le cellule di neoplasie maligne possono essere rilevate nel contenuto del duodeno con neoplasie.

Cristalli HS. Il loro numero aumenta con i cambiamenti nella stabilità colloidale della bile ( colelitiasi). Di norma, si accumulano insieme al resto degli elementi cristallini della bile: microliti, sali di calcio (bilirubinato di calcio), cristalli di acidi grassi e biliari.

Normalmente, tutti gli elementi cristallini sono assenti, la loro presenza indica una violazione delle normali proprietà colloidali della bile, cioè processo patologico colelitiasi.

Aggiornato: 2019-07-09 21:43:14

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L'esame microscopico di molte (5-8) porzioni del contenuto duodenale ottenuto deve essere effettuato immediatamente dopo il ricevimento. Ciò è dovuto alle pronunciate proprietà litiche della bile: l'epitelio e i leucociti, avvolti nel muco sciolto, vengono distrutti dalla bile dopo 5-10 minuti, la stabilità colloidale della bile risultante è disturbata, gli acidi biliari e persino il colesterolo precipitano.

La bile da una provetta viene versata in una capsula di Petri ed esaminata su uno sfondo bianco e nero. Con una pipetta Pasteur con una pera, i fiocchi di muco vengono catturati, trasferiti su un vetrino, coperti con un vetrino ed esaminati al microscopio (oculare 10X, obiettivi 20X e 40X).

Il materiale per l'esame microscopico può essere conservato per 1-2 ore aggiungendo alla bile ottenuta 1/3 del volume di formalina neutra al 10%. La conservazione è più efficace se aggiunti a 10-20 ml della bile ottenuta 2 ml di EDTA al 10% o 1 ml (1000 UI) di contrical (tzalol, o trasilol,).

La bile, ottenuta anche attraverso una sonda a spirale a due canali, è un sistema complesso ed eterogeneo costituito dal succo gastrico, dal contenuto duodenale e dalla bile stessa. Le scaglie di muco presenti nella bile possono provenire dalla bocca, dalla faringe nasale, dai polmoni, dallo stomaco e dall'esofago. Sotto l'influenza degli enzimi, gli elementi cellulari della bile vengono rapidamente deformati e distrutti. Sotto l'influenza dell'acido cloridrico, la secrezione pancreatica, batteri, formazioni cristalline (acidi biliari, acidi grassi, colesterolo) possono fuoriuscire dalla bile sul fondo della provetta, rendendo difficile l'interpretazione delle proprietà lipolitiche (lipogeniche) del studiato la bile.

Leucociti.

Cellule leucocitarie degli escrementi ingeriti vie respiratorie hanno una granularità più pronunciata, accanto a loro ci sono macrofagi alveolari e muco compatto. I leucociti della cavità orale si trovano solitamente sullo sfondo dell'epitelio squamoso stratificato non cheratinizzato. I leucociti di origine gastrica possono essere combinati con l'epitelio ghiandolare. Il succo gastrico in un tale paziente di solito non contiene acido cloridrico. Leucociti I. l'epitelio ghiandolare che è entrato nella bile da uno stomaco acido è rappresentato da nuclei nudi che giacciono su muco fibroso molle.

È possibile che i leucociti delle cellule colpite entrino nella bile processo infiammatorio dotti pancreatici (pancreatite canalicolare). Con la pancreatite canalicolare, i dotti pancreatici sono pieni di essudato e leucociti. Tenendo conto di tutto quadro clinico quando i leucociti e l'epitelio colonnare si trovano in scaglie di muco nel contenuto duodenale, si può presumere che siano entrati nella bile dai dotti pancreatici.

I leucociti presenti nella porzione A (bile duodenale), così come dopo la somministrazione di solfato di magnesio in combinazione con epitelio cuticolare alto cilindrico, indicano la presenza di duodenite.

Epitelio.

L'epitelio cilindrico (prismatico), che riveste l'intera superficie del duodeno, ha una cuticola (pelle) piuttosto spessa nell'area rivolta verso la cavità intestinale, che è chiaramente visibile nella preparazione nativa. La cuticola è costituita da una rete di sottili traverse, tra le quali ci sono tubuli stretti che causano l'assorbimento. I nuclei dell'epitelio del duodeno sono grandi, ovali, che comprimono la parte inferiore della cellula.

L'elemento iniziale del sistema biliare sono i capillari biliari, le cui pareti formano le membrane delle cellule epatiche. I capillari biliari nel punto della loro connessione con le placche epatiche (dotti biliari dei campi portali) sono chiamati colangioli. Sono rivestiti da cellule di un epitelio cubico alto 10-12 micron con grandi nuclei rotondi.

I dotti biliari interlobulari sono rivestiti da cellule epiteliali cilindriche alte 15-18 µm con nuclei rotondi situati vicino alla base. Tali cellule epiteliali di varie dimensioni si trovano spesso in combinazione con i leucociti nella bile duodenale (A) ed epatica (C) nei pazienti con colangite.

In esame citologico, la bile cistica qualche volta è possibile rilevare gabbie di un epitelio cilindrico con un'altezza di 20-50 micron. Nelle preparazioni native, i grandi nuclei rotondi o ovali, situati vicino alla base delle cellule, sono generalmente ben distinti; il citoplasma è spesso vacuolizzato, alla base delle cellule termina con una forte escrescenza simile a una coda: l'epitelio della cistifellea.

Le cellule delle ghiandole mucose della cistifellea (calice) sono molto rare, ma possono essere trovate nella bile ottenuta durante un intervento chirurgico da una cistifellea infiammata. Queste cellule sono particolarmente rapidamente degradate.

Il dotto biliare comune è rivestito da un epitelio colonnare alto, le cui cellule differiscono nettamente da altre cellule epiteliali simili. Si tratta di cellule piuttosto lunghe (fino a 37 micron), molto strette con nuclei compressi e allungati ("cellule match"). La presenza di queste cellule nella bile duodenale in forma libera e in combinazione con i leucociti indica un'infiammazione del dotto biliare comune (coledochite).

Leucocitoidi

Leucocitoidi: grandi cellule rotonde, 1/3 di leucociti in più. Sono cellule dell'epitelio cilindrico del duodeno, arrotondate a causa della distrofia. I leucocitoidi compaiono con una maggiore secrezione di bile della cistifellea nel duodeno. Un gran numero di leucociti può essere trovato in contenuti duodenali incolori quando ittero ostruttivo. Un gran numero di leucocitoidi è notato nei giovani con maggiore irritabilità neuroumorale. In combinazione con l'epitelio cilindrico del duodeno, i leucocitoidi possono essere osservati con duodenite o ulcera peptica. Tipicamente, questi pazienti sono caratterizzati da un'elevata acidità del contenuto gastrico.

elementi sedimentari

Il rilevamento di formazioni biliari sedimentarie cristalline e amorfe nel contenuto duodenale indica che ha perso la sua stabilità colloidale. La causa del loro aspetto può essere un processo infiammatorio nelle vie biliari, una violazione della stabilità colloidale a causa della prolungata posizione in piedi o dell'ingestione di contenuto gastrico nella bile.

Di valore diagnostico sono le seguenti formazioni cristalline presenti nella bile: microliti, cristalli di colesterolo, bile e acidi grassi, bilirubinato di calcio e film marroni della cistifellea.

microliti

I microliti sono formazioni compatte scure, arrotondate o sfaccettate, talvolta con striature concentriche; sono costituiti da lime, muco e una piccola quantità di colesterolo. Per rilevare i microliti nella bile, viene utilizzata la reazione di Salkovsky.

Metodologia. Una goccia di acido solforico concentrato viene portata sul vetro di copertura, sotto il quale si trovano i cristalli o microliti in studio, e abbassata in modo tale da toccare il vetro di copertura. La carta da filtro viene applicata sull'altro lato del vetrino coprioggetto. In questo caso, l'acido raggiunge i cristalli in esame. In presenza di colesterolo nella composizione dei microliti, quando sciolti danno un colore rosa o rossastro. Il colesterolo puro, che si scioglie sotto l'azione dell'acido solforico, diventa rosso vivo. I microliti si trovano più spesso nell'ultima porzione della bile (B) e in porzioni della contrazione residua della cistifellea (BC).

Colesterolo.

Sottili placche quadrangolari incolori, talvolta con angolo “spezzato”, che sovrapponendosi sembrano formare gradini (Fig. 87). Il loro rilevamento nella bile è solitamente associato a una violazione della sua stabilità colloidale a causa di ricerche prematura. Normalmente, i cristalli di colesterolo si trovano in quantità scarse. Nella patologia delle vie biliari, la percentuale di rilevamento dei cristalli di colesterolo è molto più alta e il loro numero è maggiore.

bilirubinato di calcio

Il bilirubinato di calcio è grani amorfi di pigmento marrone, nero, marrone o giallo dorato. Si trova spesso in combinazione con cristalli di colesterolo nella porzione della bile A, con la sua ritenzione nel dotto biliare comune - e nella porzione del sole. I cristalli di bilirubinato di calcio non vengono rilevati nelle persone sane, si trovano solo nella bile delle persone anziane che soffrono di un ristagno prolungato e incompleto della bile e della sua infezione.

cristalli di acidi grassi.

Delicati aghi sottili e incolori, che si trasformano in gocce quando la preparazione nativa viene riscaldata nella fiamma di una lampada ad alcool, hanno valore diagnostico solo se il contenuto gastrico non entra nella bile. Indicano una diminuzione del pH della bile a causa del processo infiammatorio, batteriocolia, diskrinia e una diminuzione della solubilità degli acidi grassi. Si trovano nelle stesse porzioni di bile e nella stessa patologia delle vie biliari dei cristalli di colesterolo e del bilirubinato di calcio.

Acidi biliari.

Piccoli granelli lucidi giallo-brunastri o grigi. Molto spesso precipitano in grandi quantità quando il contenuto gastrico acido entra nella bile. Granelli di acidi biliari si trovano talvolta nella bile della cistifellea raccolta prima della colecistectomia. I sali biliari possono far parte dei calcoli biliari. Il rilevamento in porzioni pulite della bile duodenale di cristalli di acido biliare sotto forma di sedimento o nel muco indica diskrinia.

Film marroni.

Sono depositi di muco e bile all'interno della cistifellea. Al microscopio sembrano piccoli frammenti di un vaso di porcellana rotto. Si trovano nella bile della cistifellea in pazienti con patologia della cistifellea.

Manufatti.

Gli artefatti trovati nella bile includono particelle di una sonda duodenale, cristalli di solfato di magnesia, frammenti di vetrini coprioggetto.

Protozoi, elminti, funghi.

Nello studio della bile, si possono rilevare uova del trematode epatico, felino, lanceolato, cinese, nonché individui di strongilidi e tricostrongilidi, la forma vegetativa di Giardia e funghi del genere Candida. Il valore diagnostico delle forme mobili e immobili di elminti e protozoi è lo stesso.

Guida per formazione pratica secondo clinico diagnostica di laboratorio/ Ed. prof. MA Bazarnova, prof. V.T. Morozova.- K.: Scuola Vyscha, 1988.- 318 p., 212 ill.

Lo studio della bile include l'esecuzione del suono duodenale frazionato, in cui di solito si distinguono le seguenti 5 fasi:

  1. Secrezione basale della bile (10-15 minuti). Viene valutata la secrezione totale del duodeno e del dotto biliare comune.
  2. Fase dello sfintere chiuso di Oddi (3-5 minuti).
  3. Isolamento della porzione A (3-5 minuti). Inizia con l'apertura dello sfintere di Oddi e termina con l'apertura dello sfintere di Lutkens. Durante questo periodo, vengono solitamente secreti 3-5 ml di bile marrone chiaro a una velocità di 1-2 ml al minuto.
  4. Isolamento della porzione B (fase di escrezione della bile della cistifellea). Inizia con l'apertura dello sfintere di Lutkens e lo svuotamento della cistifellea (bile di oliva scura) e termina con il rilascio della porzione C di bile (giallo-ambra). Ci vogliono 20-30 minuti di tempo.
  5. Isolamento della porzione C (bile epatica). La fase inizia dal momento in cui cessa la secrezione della bile di oliva scura e dura 10-20 minuti. In questo caso vengono rilasciati 10-30 ml di bile.

Lo studio della bile: la norma degli indicatori

I normali indicatori di secrezione e composizione della bile sono i seguenti:

La bile basale è trasparente, leggermente alcalina, ha una densità di 1007-1015 e un colore paglierino chiaro. La bile cistica ha un'acidità di 6,5-7,5 pH, densità 1016-1035, trasparente, colore oliva scuro. La bile epatica è dorata trasparente, ha un'acidità di 7,5-8,2 pH, densità 1007-1011.

Sulla base dei risultati di uno studio frazionario, si può giudicare la presenza o meno di disturbi funzionali del sistema biliare (ipertensione o ipotensione della colecisti, del dotto cistico, dello sfintere di Oddi, discinesia della colecisti di tipo ipocinetico e ipercinetico). L'accelerazione del rilascio di una porzione di bile e un aumento del volume indicano ipercinesia, una diminuzione indica ipocinesia. Un aumento del tempo di chiusura dello sfintere, un flusso intermittente e lento della bile indicano ipertensione.

Studio batterico della bile

La presenza di bile raccolta durante lo studio consente anche analisi biochimiche, microscopiche, esame istologico bile di ciascuna delle porzioni indicate, uno studio sulla microflora e sulla sensibilità agli antibiotici.

Per fare ciò, la bile ottenuta durante il sondaggio duodenale frazionato viene immediatamente inviata al laboratorio. Altrimenti, gli enzimi attivi nella bile avranno il tempo di sciogliere le cellule in essa contenute. Inoltre, le provette con porzioni singole sono poste in un termostato a bassa temperatura. Tranne quando è necessario condurre uno studio sulla presenza di Giardia nella bile: le provette vengono poste in acqua calda o termostato. Dal momento che a basse temperature la lamblia di solito perde attività.

Cosa dice lo studio dei contenuti duodenali?

Una diminuzione della trasparenza di una delle porzioni di bile, in assenza di miscelazione di succo gastrico, indica un processo infiammatorio. Uno studio adeguatamente condotto sui contenuti duodenali può raccontarne molti malattie interne. Spesso, l'analisi della bile consente per la prima volta di identificare l'ipertensione in un paziente.

Normalmente, non ci sono elementi cellulari nella bile o eritrociti e i leucociti si trovano in una singola quantità. Grande numero i leucociti nelle porzioni di bile B e C di solito indicano la presenza di un processo infiammatorio in cistifellea e dotti biliari, o la presenza di una miscela di succo pancreatico o gastrico.

Una grande quantità di epitelio (cellule rotonde) nelle porzioni di bile B e C può indicare malattie del duodeno o l'influenza dell'assunzione medicinali. La presenza di cellule cilindriche è molto probabile con l'infiammazione delle vie biliari. L'analisi della bile in questo caso è integrata da altri metodi di esame.

In presenza di colelitiasi e stasi biliare si possono rilevare un eccesso di colesterolo e cristalli di calcio, ma non in tutti i casi.

Durante la semina della bile per la microflora, durante lo studio, le sue porzioni vengono raccolte in provette sterili separate. La bile con una miscela di succo gastrico, come indicato dal suo aspetto torbido, fiocchi, reazione acida, non è adatta per la ricerca microbiologica.

Esame microscopico della bile effettuato immediatamente dopo la sua ricezione, poiché gli elementi cellulari nella bile vengono rapidamente distrutti dall'azione degli acidi biliari e dei saponi.

Per l'esame microscopico, la bile viene assunta senza miscelazione di succhi gastrici e intestinali (di solito vengono esaminate le porzioni B e C). La bile viene versata su piastre di Petri, risucchi di muco vengono aspirati e posti su un vetrino, preparando da essi diverse preparazioni. Il resto della bile viene centrifugato e dal sedimento vengono preparate anche preparazioni autoctone. Il numero totale di farmaci dovrebbe essere almeno dieci.

Di maggior valore diagnostico è l'identificazione cellule epiteliali , ma solo nei casi in cui l'epitelio sia sufficientemente conservato per poterne identificare l'origine: la colecistite è caratterizzata dalla rilevazione di cellule ciliate prismatiche alte, per la colangite - piccole cellule prismatiche dei passaggi epatici o cellule epiteliali alte prismatiche della bile comune condotto, per processi patologici nel duodeno - grandi cellule cilindriche con cuticola e villi.

Cristalli di colesterolo può essere trovato nella bile delle persone sane. Sembrano sottili lastre quadrangolari incolori con un angolo rotto. Un aumento dei cristalli di colesterolo indica un cambiamento nella stabilità colloidale della bile.

microliti - formazioni scure, grandi o sfaccettate, costituite da sali di calcio, muco e una piccola quantità di colesterolo. Normalmente, i microliti non si verificano; il loro rilevamento nella bile, di regola, indica una violazione della stabilità colloidale della bile. Spesso, in questo processo patologico, si trovano granelli ancora più piccoli (microscopici) di varie dimensioni e colori, che vengono comunemente chiamati "sabbia".

Bilirubinato di calcio rappresenta piccoli grani amorfi di colore giallo dorato o brunastro. Spesso si trovano nella bile in combinazione con un gran numero di cristalli di colesterolo. I cristalli di acido grasso sembrano aghi sottili. Il loro aspetto indica una diminuzione della solubilità degli acidi grassi dovuta al processo infiammatorio e una violazione della stabilità colloidale della bile.

parassiti . Nel contenuto duodenale si possono trovare come forme vegetative di alcuni parassiti (il più delle volte