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ISTITUTO EDUCATIVO DEL BILANCIO DELLO STATO FEDERALE
ISTRUZIONE PROFESSIONALE SUPERIORE
"ACCADEMIA AGRICOLA STATALE DI IZHEVSK"
FACOLTÀ DI MEDICINA VETERINARIA
Dipartimento di Chimica
Test
nella biochimica animale
Argomento: "Proteine totali del siero del sangue. Metodi di determinazione, significato clinico e diagnostico, caratteristiche specifiche"
Completato da: Kurochkina V.S.
Studente del 3 ° anno di FZO
Specialità: "Veterinario"
Verificato: k.b. PhD, professore associato
Berestov D.S.
Iževsk 2013
introduzione
Applicazione
introduzione
Nelle cellule viventi vengono sintetizzate molte molecole organiche, tra cui ruolo di primo piano gioco di macromolecole polimeriche - proteine, acidi nucleici, polisaccaridi. Le proteine svolgono un ruolo speciale nella vita degli organismi viventi. Le informazioni genetiche vengono trasmesse dai genitori ai figli struttura specifica e le funzioni di tutte le proteine dato organismo. Le proteine sintetizzate svolgono funzioni di trasporto, protettive, strutturali, partecipano alla trasmissione di segnali da una cellula all'altra e allo stesso modo implementano informazioni ereditarie.
Scoiattoli- composti contenenti azoto organico ad alto peso molecolare, costituiti da oltre 20 tipi di alfa-amminoacidi. Il confine condizionale tra grandi polipeptidi e proteine è il peso molecolare di 8000-10000. Le proteine plasmatiche sono sintetizzate principalmente nel fegato, nelle plasmacellule, linfonodi, milza e midollo osseo.
1. Proteine sieriche totali
Le proteine del siero sono un gruppo piuttosto ampio di proteine che differiscono per struttura, proprietà fisiche e chimiche e funzioni. La loro quantità totale viene determinata utilizzando un rifrattometro o un metodo biureto e i singoli componenti - mediante elettroforesi. A seconda del metodo di distribuzione, si possono ottenere da 5 a 100 frazioni proteiche. L'elettroforesi su carta nel siero del sangue determina 4-5 frazioni: albumine, alfa (a volte alfa-1 e alfa-2), beta e gamma globuline ed elettroforesi in gel di agar, amido e poliacrilammide - molto di più (fino a 30) .
La quantità di proteine totali e il rapporto tra le singole frazioni nel siero del sangue degli animali tipi diversi oscilla entro certi limiti.
Negli animali giovani, il contenuto proteico totale è inferiore rispetto agli adulti: nei vitelli di età compresa tra 1 e 10 giorni - 56-70 g / l, suinetti appena nati - 45-50, agnelli - 46-54 g / l, vedere Appendice (Tabella 1 ).
Il plasma sanguigno animale è un liquido con una densità di 1,02 - 1,06. Un aumento della densità del sangue si osserva quando il corpo è disidratato. Il residuo secco del plasma rappresenta meno del 10% e il resto è acqua. La maggior parte del residuo secco è costituita da proteine, la cui concentrazione totale nel plasma è di 60-80 g/l. La somma della concentrazione di albumina e globuline è la concentrazione di proteine totali nel plasma sanguigno.
proteine totaliè un polimero organico composto da amminoacidi. Varie proteine sono coinvolte in tutte le reazioni biochimiche del nostro corpo come catalizzatori, trasportano varie sostanze e droghe, partecipano protezione immunitaria eccetera.
La concentrazione totale di proteine nel siero del sangue è definita dal concetto di "proteine totali".
proteine totali- la componente più importante del metabolismo proteico nel corpo, è anche la concentrazione totale di albumina e globuline nel siero del sangue.
Nel corpo, una proteina comune svolge le seguenti funzioni:
Partecipa alla coagulazione del sangue;
Mantiene un pH del sangue costante;
(trasferimento di grassi, bilirubina, ormoni steroidei a tessuti e organi) funzione di trasporto;
Partecipa alle reazioni immunitarie e molte altre funzioni;
Sono una riserva di aminoacidi;
Svolgono una funzione regolatrice nel corpo, in quanto fanno parte di ormoni ed enzimi.
Con la disidratazione, aumenta la concentrazione di proteine totali nel plasma sanguigno. Una diminuzione della concentrazione di proteine totali nel plasma sanguigno può essere il risultato di un'ampia varietà di motivi: proteine basse nella dieta, malattie renali ed epatiche, in cui le proteine si perdono nelle urine, una violazione del processo di assorbimento nutrienti nel tubo digerente.
La funzione fisiologica delle proteine plasmatiche è di mantenere la pressione osmotica colloidale, la capacità tampone del plasma, in alcuni casi, di depositare (immagazzinare) molecole lipidiche, prodotti metabolici, ormoni, sostanze medicinali e micronutrienti. Alcune proteine plasmatiche svolgono una funzione enzimatica, le immunoglobuline svolgono l'immunità umorale. Componenti complementari e proteina C-reattiva importante per l'attuazione di resistenza non specifica, soprattutto nel caso di infezioni batteriche. L'equilibrio tra fattori della coagulazione e inibitori mantiene il sangue fluido nello stato normale e una rapida coagulazione in caso di lesione.
Classificazione:
Semplici (proteine) (contengono solo aminoacidi)
Complesso (proteine) (aminoacidi e componenti non aminoacidiche (eme, derivati vitaminici, lipidi o carboidrati)
Fibrillare (che costituisce molti tessuti densi)
Globulare (albumine (4-5%), globuline (2-3%), fibrinogeno (0,2-0,4%)
2. Metodi di determinazione, significato clinico e diagnostico, caratteristiche specifiche
Metodi per determinare la proteina totale nel siero del sangue:
1. Azotmetrico;
2. Determinazione del peso specifico del siero;
3. Peso (gravimetrico), quando le proteine del sangue vengono precipitate, essiccate a un peso costante e pesate su una bilancia analitica;
4. Rifrattometrico;
5. Colorimetrico;
6. Neflometrico;
7. Polarimetrico;
8. Spettrometrico;
1. Rifrattometro IRF - 454 B2M
è progettato per determinare la proteina nel siero del sangue, nel liquido cerebrospinale, controllare la concentrazione dei farmaci, misurare la densità dell'urina. proteina comune sangue animale
2. Cobas integra - Proteine Totali Gen.2
Principio del test: Il rame bivalente reagisce in soluzione alcalina con legami peptidici proteici formando il caratteristico complesso biureto di colore viola.
3. Determinazione delle frazioni proteiche del siero sanguigno mediante elettroforesi su film di acetato di cellulosa.
La soluzione tampone è destinata alla separazione elettroforetica delle proteine del siero del sangue su membrane di acetato di cellulosa con successiva determinazione densitometrica delle frazioni proteiche.
Principi del metodo
Il principio della separazione elettroforetica delle proteine si basa sulla diversa velocità di movimento delle molecole proteiche del siero del sangue in una costante campo elettrico una certa tensione. Le frazioni proteiche separate vengono colorate con un colorante. L'intensità del colore delle frazioni proteiche è proporzionale al loro numero.
Campioni analizzati
Siero esente da emolisi, lipemia e non itterico. Le frazioni proteiche del siero del sangue sono stabili in una provetta ben chiusa a 18-25 per 8 ore, a 2-8 per 3 giorni, a 20 per 1 mese.
Condurre un'analisi
1. Effettuazione dell'elettroforesi
1.1. posizionare accuratamente le membrane asciutte sulla superficie del tampone di elettroforesi, evitando la loro rapida immersione, e mantenerle fino a completa bagnatura. Tamponare delicatamente le membrane bagnate tra fogli di carta da filtro spessa, evitando che si secchino. Prima dell'applicazione dei campioni è opportuno effettuare la fase di preforesi. Per fare ciò, la membrana deve essere posizionata nella camera dell'elettroforesi e la corrente deve essere attivata nella modalità selezionata per 10 minuti. La fase di preforesi può essere sostituita da un'immersione prolungata della membrana in una soluzione tampone (diverse ore).
1.2. mediante l'applicatore, applicare i campioni di siero sanguigno analizzati ad una distanza di 2-3 cm dal bordo catodico della membrana. Posizionare la membrana in una camera elettroforetica e collegare la corrente.
2. Elaborazione dell'elettroferogramma
2.1. tingere Crimson S.
Dopo aver spento la corrente, trasferire con cura la membrana nella soluzione colorante per 3-5 minuti, quindi due volte per 3 minuti in una soluzione al 5-7% acido acetico(prima di sbiancare lo sfondo).
1.2. elaborare l'elettroforegramma utilizzando uno scanner e un programma per computer.
4. Test del timolo
Principio del metodo
Le beta-globuline sieriche, le gamma-globuline e le lipoproteine vengono precipitate a pH 7,55 con il reagente timolo. A seconda della quantità e del rapporto reciproco delle frazioni proteiche, durante la reazione si verifica torbidità, la cui intensità viene misurata turbidimetricamente.
Valore clinico e diagnostico:
Il test del timolo è più adatto per uno studio funzionale del fegato rispetto ai campioni resistenti ai colloidi. Si ritiene che sia positivo nel 90-100% dei casi di malattia di Botkin (già allo stadio preitterico e in forma anitterica) e nelle epatiti tossiche. La reazione è positiva nelle postepatiti e postnecrotiche, specialmente nella cirrosi itterica (a differenza di altre forme di cirrosi), nelle malattie del collagene, nella malaria e nelle infezioni virali. Con ittero ostruttivo, (nel 75% dei casi) è negativo, che ha un valore diagnostico differenziale.
Con l'ittero ostruttivo, il test diventa positivo solo se il processo è complicato dall'epatite parenchimale. Per differenziare l'ittero ostruttivo dal parenchimale Grande importanza prevede l'utilizzo di un test del timolo con un test di Burstein (per beta- e pre-betalipoproteine).
Con ittero parenchimale, entrambi i test sono positivi, con ittero ostruttivo, il test del timolo è negativo e il test di Burshtein è nettamente positivo.
Per determinare la proteina totale nel siero del sangue di un animale, prendi sangue venoso in una provetta speciale con un attivatore della coagulazione, vedere Appendice (Tabella 2). Prima di donare il sangue, l'animale viene tenuto a dieta da fame per 8 ore. Donare il sangue prima di assumere farmaci che potrebbero influenzare il risultato dello studio. La composizione qualitativa delle proteine del plasma sanguigno è molto varia. La proteina totale è divisa in frazioni separate mediante elettroforesi, basata sulla separazione di miscele proteiche sulla base di diversi valori di massa e una carica specifica di una proteina. Durante la separazione elettroforetica, a seconda del vettore, il numero di frazioni proteiche della proteina totale non è lo stesso. Un numero minore di frazioni si ottiene durante l'elettroforesi su carta 5 frazioni, mentre durante l'elettroforesi su gel di agar, gel di poliacrilammide, il numero di frazioni proteiche può essere notevolmente superiore fino a 20 frazioni. Le fazioni principali sono albumine e globuline.
Albumine sono sintetizzati nel fegato e sono proteine semplici contenenti fino a 6 residui di aminoacidi. Sono altamente solubili in acqua. Il valore normalizzato è 56,5 - 66,8 (l'albumina nel siero del sangue rappresenta circa il 60% delle proteine totali. Le albumine sono sintetizzate nel fegato (circa 15 g / giorno), la loro emivita è di circa 17 giorni. La pressione oncotica plasmatica è 65 -80% dovuto all'albumina Le albumine svolgono un'importante funzione di trasporto biologico di molte sostanze attive soprattutto ormoni. Sono in grado di legarsi al colesterolo, alla bilirubina. Gran parte del calcio nel sangue è anche associato all'albumina. Le albumine sono in grado di combinarsi con vari farmaci.
Funzione delle albumine:
Mantenimento della pressione osmotica colloidale del plasma:
La costanza della concentrazione di ioni idrogeno;
Trasporto di varie sostanze (bilirubina, acido grasso, composti minerali e droghe).
Le albumine plasmatiche possono essere considerate anche come una certa riserva di aminoacidi per la sintesi di proteine specifiche vitali in condizioni di carenza proteica nella dieta. Le albumine trattengono l'acqua nel flusso sanguigno. Con la nefrite, le albumine, come le proteine a più basso peso molecolare, penetrano prima di tutto nell'urina dal plasma sanguigno (il peso molecolare delle albumine è di circa 60.000 - 66.000). Normalmente, l'albumina rappresenta il 35-55% della quantità totale di proteine del plasma sanguigno.
Globuline plasmatiche- è un set varie proteine. Durante l'elettroforesi, si muovono dopo l'albumina. Il rapporto con i lipidi fornisce un complesso di globuline con uno stato solubile e trasporto a vari tessuti. Sulla base della mobilità elettroforetica, le globuline sono suddivise in b2-, b1-, c- e g-globuline. (b- e c-globuline sono sintetizzate nel fegato e sono portatori attivi di varie sostanze del sangue). Durante il periodo di crescita intensiva dell'animale nel sangue, vi è una relativa diminuzione del livello di albumina e un corrispondente aumento del livello di b- e g-globuline. Le B-globuline interagiscono attivamente con i lipidi del sangue Le g-globuline, la frazione meno mobile e più pesante di tutte le globuline, sono sintetizzate dai linfociti B originati da parte delle cellule staminali del midollo osseo o da plasmacellule formate da esse. Svolgono una funzione protettiva, essendo anticorpi protettivi (immunoglobuline). Negli uccelli sono state studiate tre classi di immunoglobuline: IgG, IgM, IgA, nei mammiferi ce ne sono cinque: IgG, IgM, IgE, IgD. IgA. In termini quantitativi prevalgono le IgG nel sangue (80%). Utilizzando il metodo dell'immunoelettroforesi, nel siero del sangue vengono isolate fino a 30 frazioni proteiche. Tutte le immunoglobuline sono costituite da due catene polipeptidiche pesanti (M. m. 53.000-75.000) e due catene leggere (M. M. 22.500) collegate da tre ponti disolfuro. Ogni tipo di immunoglobulina è in grado di interagire specificamente con un solo antigene specifico.
Il siero del sangue di vitelli appena nati, agnelli, capretti, maialini, puledri praticamente non contiene anticorpi. Gli animali appena nati non sono in grado di sintetizzare anticorpi nei primi giorni di vita. Appaiono solo dopo che il colostro è entrato nel tratto gastrointestinale. La sintesi indipendente di queste proteine protettive nel midollo osseo, nella milza e nei linfonodi è nota dall'età di 3 o 4 settimane dell'animale. Pertanto, è importante dare da bere al neonato il colostro, che contiene 10-20 volte più immunoglobuline rispetto al latte normale. Le immunoglobuline del colostro sono in grado di penetrare senza scissione attraverso la pinocitosi nella parete intestinale ed entrare nel flusso sanguigno, creando protezione del corpo (immunità colostrale o colostrale).
I linfociti T cooperano con i linfociti B nella sintesi delle immunoglobuline, inibiscono le reazioni immunologiche e lisano varie cellule. Nel sangue, i linfociti T costituiscono il 70%, i linfociti B - circa il 30%. Per la sintesi delle immunoglobuline è necessaria anche una terza popolazione di cellule: i macrofagi. Agiscono come fattori primari di protezione non specifica, grazie alla capacità di catturare e digerire microrganismi, antigeni, complessi immunitari e trasmettere informazioni su di essi ai linfociti T e B. I macrofagi fungono da intermediari tra tutti i partecipanti al processo con l'aiuto di linfochine e monochine prodotte dalle cellule.
I linfociti B formano anticorpi solo in risposta a determinati antigeni (batteri, virus) che sono entrati nel corpo. Per questo, la struttura dell'antigene e del recettore della globulina sulla superficie del linfocita devono combaciare, come la chiave di una serratura.
La concentrazione di g-globuline aumenta nel siero del sangue in cronico malattie infettive, a vaccinazioni, gravidanza di animali.
Un certo numero di proteine del plasma sanguigno svolgono funzioni specifiche. Tra questi, dovrebbero essere distinte proteine \u200b\u200bcome transferrina, aptoglobina, ceruloplasmina, propedin, sistema del complemento, lisozima, interferone.
Le transferrine sono β-globuline sintetizzate nel fegato. Legando due atomi di ferro per molecola proteica, trasportano questo elemento in vari tessuti, ne regolano la concentrazione e lo mantengono nel corpo. Secondo l'entità della carica della molecola proteica, la composizione dell'amminoacido, si distinguono 19 tipi di transferrine, che sono associate all'ereditarietà. Le transferrine possono anche avere un effetto batteriologico diretto. La concentrazione di transferrine nel siero del sangue è di circa 2,9 g/L. Bassi livelli di transferrine nel siero del sangue possono essere causati da una mancanza di proteine nella dieta dell'animale.
L'aptoglobina è una parte della b2-globulina sintetizzata nel fegato e contiene rame (0,3%). Legando il rame, la ceruloplasmina garantisce il corretto livello di questo microelemento nei tessuti. La quota di ceruloplasmina rappresenta il 3% della quantità totale di rame nel corpo dell'animale. Agisce come enzima e come ossidante. La ceruloplasmina è un'ossidasi dell'adrenalina, acido ascorbico. Una caratteristica importante la ceruloplasmina è la sua capacità di ossidare il ferro nei tessuti a Fe3+, depositandolo in questa forma.
Il sistema del complemento è un complesso di proteine del siero di natura globulinica, considerato come un sistema di proenzimi, la cui attivazione porta alla citolisi, la distruzione dell'antigene. La sintesi del sistema del complemento, che conta fino a 25 diverse proteine, viene effettuata principalmente da fagociti mononucleati e istiociti. Si tratta di un complesso sistema effettore delle proteine sieriche, che svolge un ruolo importante nella regolazione della risposta immunitaria e nel mantenimento dell'omeostasi; in termini di filogenesi e ontogenesi, è sorto prima del sistema immunitario. Come parte del sistema del complemento, 11 componenti sono stati studiati in dettaglio. La cascata di reazioni enzimatiche innescate dal complesso antigene-anticorpo e che porta all'attivazione sequenziale di tutti i componenti del componente, a partire dal primo, è chiamata via di attivazione classica. Il bypass, che è caratterizzato dall'attivazione dei successivi componenti del complemento, a partire da C3, è chiamato l'alternativa. La distruzione della cellula microbica avviene solo dopo l'attivazione del componente C4. Le proteine terminali del sistema del complemento, reagendo in sequenza tra loro, vengono introdotte nel doppio strato lipidico, danneggiando membrana cellulare con la formazione di canali di membrana, che porta a disturbi osmotici, la penetrazione di anticorpi e complemento nella cellula, seguita dalla lisi delle membrane intracellulari. È generalmente accettato che il contenuto di complemento nel siero del sangue sia uno degli indicatori più oggettivi dello stato delle difese aspecifiche dell'organismo.
Properdin è una glicoproteina del tipo g-globulina con un peso molecolare di circa 184.000 e costituisce lo 0,3% della quantità totale di proteine del siero del sangue. Possedendo un'elevata labilità termica, la proprietà viene distrutta in 30 minuti a 56°C. Il luogo di sintesi dipropriadin non è stato finalmente chiarito. È probabile che il tessuto linfoide prenda parte alla sua sintesi. Properdin si presenta per primo azione battericida contro i microbi gram-negativi. La presenza obbligatoria dei primi quattro componenti del complemento e degli ioni di magnesio, corrispondenti al sistema di proprietà, è richiesta per la manifestazione dell'attività di proprietà. È stata rivelata la relazione tra il livello del sistema di proprietà e il grado di resistenza dell'organismo animale.
L'interferone è una proteina a basso peso molecolare (M. m. 24.000-36.000), che viene sintetizzata ed escreta dalle cellule dei tessuti in risposta alla penetrazione di virus in esse. Dalle cellule, l'interferone penetra facilmente nel flusso sanguigno e si distribuisce a tutti gli organi e tessuti. Dopo che il virus è entrato nella cellula, l'RNA a filamento singolo viene rilasciato e l'RNA a doppio filamento viene sintetizzato sulla sua base. L'RNA si ottiene in questo modo e induce la sintesi dell'interferone. L'interferone si lega alla membrana plasmatica di altre cellule del corpo e stimola la loro capacità di resistere infezione virale. L'effetto antivirale dell'interferone è associato alla sua capacità di attivare la sintesi di inibitori ed enzimi nelle cellule che bloccano la traduzione dell'IRNA virale e, di conseguenza, la riproduzione del virus. L'interferone ha anche proprietà immunoregolatrici. Esistono tre tipi di interferoni: a-interferone (leucocita), che ha effetti antivirali e antiproliferativi, antitumorali; β-interferone (fibroblasto), che ha principalmente effetti antitumorali e antivirali; g-interferone (linfocitario o immunitario), che ha prevalentemente proprietà immunomodulatorie.
I ruoli fisiologici delle proteine del sangue sono numerosi, i principali sono i seguenti:
Mantenere la pressione colloido-oncotica, mantenendo il volume del sangue, legando l'acqua e trattenendola, impedendole di uscire dal flusso sanguigno;
Partecipa ai processi di coagulazione del sangue;
Mantenere la costanza del pH del sangue, formando uno dei sistemi tampone del sangue;
Collegandosi con una serie di sostanze (ChS, bilirubina, ecc.), Oltre che con i farmaci, le consegnano ai tessuti.
Mantenere un livello normale di cationi nel sangue formando con essi composti non dializzabili (ad esempio, il 40-50% del calcio sierico è associato a proteine; una parte significativa di ferro, rame, magnesio e altri oligoelementi è anche associata a proteine);
Svolgono un ruolo importante nei processi immunitari;
Servire come riserva di aminoacidi;
Svolgono una funzione regolatrice (ormoni, enzimi e altre sostanze proteiche biologicamente attive).
Valore clinico e diagnostico:
1) Normoproteinemia - contenuto normale di proteine totali;
2) Ipoproteinemia - basso contenuto di proteine totali;
3) Iperproteinemia - contenuti aumentati scoiattolo;
La variazione delle proteine ematiche totali può essere relativa e assoluta.
Iperproteinemia:
1. Grave disidratazione.
2. Con ispessimento del sangue dovuto a una leggera perdita di liquido, che si verifica quando diarrea abbondante, aumento della sudorazione, vomito indomabile, diabete insipido, con colera, ostruzione intestinale, peritonite generalizzata, gravi ustioni, privazione di acqua.
3. Nella poliartrite cronica e in alcuni processi infiammatori cronici.
4. L'iperproteinemia persistente fino al 12% e oltre si osserva nel mieloma multiplo (plasmocitoma), nella macroglobulinemia di Vandelstrom, in cui compaiono focolai aggiuntivi nelle ossa piatte del cranio e nella formazione di proteine \u200b\u200b"anormali" - paraproteine.
L'ipoproteinemia è quasi sempre associata a ipoalbuminemia e l'iperproteinemia a iperglobulinemia.
Il corpo compensa l'ipoalbuminemia con l'iperglobulinemia (anche se non c'è irritazione del sistema reticoloendoteliale) per mantenere il livello di pressione osmotica colloidale. Al contrario, l'aumento delle globuline è compensato dall'ipoalbuminemia.
Un importante valore diagnostico è la delucidazione delle relazioni quantitative tra le singole frazioni di siero sanguigno. Il loro studio consente di differenziare le malattie anche quando il contenuto di proteine totali nel siero è invariato.
Iperproteinemia relativa- associato a una diminuzione del volume del sangue circolante a causa della disidratazione.
Iperproteinemia assoluta- osservato con eccessiva sintesi di proteine patologiche, aumento della formazione di immunoglobuline, aumento della sintesi proteica fase acuta infiammazione.
Oltre al contenuto di proteine totali, la determinazione delle frazioni proteiche è importante per la diagnosi di vari processi patologici. La violazione del rapporto ottimale tra loro è chiamata disproteinemia. Le disproteinemie più pronunciate si verificano quando gli organi sono danneggiati, dove vengono sintetizzate le proteine. Soprattutto spesso diminuisce la quantità di albumine (ipoalbuminemia), che svolgono importanti funzioni nel mantenimento della pressione colloido-osmotica del sangue, regolando lo scambio idrico tra il sangue e lo spazio interstiziale, legando e trasportando carboidrati, lipidi, ormoni, vitamine, minerali.
Un aumento della quantità di albumina è raro, principalmente con la disidratazione. Con i cambiamenti nella quantità di albumine, il loro rapporto con le globuline viene disturbato (il coefficiente albumina-globulina cambia), che negli animali sani varia da 0,7 a 1,0 (nei cani 1,2).
La quantità di alfa-globuline aumenta nei processi infiammatori acuti (reumatismi, polmonite, glomerulonefrite, artrite) e durante l'esacerbazione di malattie con decorso cronico(tubercolosi, epatite), poiché questo gruppo include proteine della "fase acuta" (proteina C-reattiva, ceruloplasmina, aptoglobina, alfa-1-antitripsina, alfa-2-macroglobulina, alfa-1-glicoproteina acida). Il loro livello diminuisce raramente, il più delle volte in gravi processi distrofici nel fegato, dove l'alfa-globulina è parzialmente sintetizzata.
Un aumento del numero di beta-globuline si osserva più spesso nelle infezioni con decorso cronico, malattie renali (nefrosi, glomerulonefrite), cirrosi epatica. La composizione delle frazioni di beta-globulina comprende il fibrinogeno, un aumento del cui contenuto si verifica con polmonite cronica, broncopolmonite, leucemia, endocardite settica e una diminuzione - nelle malattie del fegato, dove viene sintetizzato.
Le frazioni di gammaglobuline contengono la maggior parte degli anticorpi (immunoglobuline) che forniscono protezione umorale del corpo, quindi la loro quantità nel siero del sangue dipende dalla maturità morfologica e dall'utilità funzionale del tessuto immunoreattivo.
Un basso livello di gamma globuline si verifica nei neonati, soprattutto nel primo giorno di vita, poiché non attraversano la barriera placentare, ma entrano nell'organismo solo con il colostro (immunodeficienza fisiologica), quindi, nel mantenere il loro livello, la qualità di il latte, la tempestività del suo consumo sono di grande importanza, le condizioni della mucosa intestino tenue. La sintesi delle proprie immunoglobuline inizia dal 5-7° giorno di vita e raggiunge il livello ottimale solo all'età di 6 mesi, quindi i giovani sono suscettibili a molte malattie (salmonellosi, streptococcosi, pasteurellosi, vie respiratorie virali, polmonite). Si osserva anche una diminuzione del contenuto di gammaglobuline varie malattie, che sono accompagnati da lesioni del sistema immunitario (mieloma, leucemia linfocitica, malattia di Gumboro), perdita di immunoglobuline nella nefrosi, enterite, sanguinamento cronico, dovuto alla soppressione della funzione del sistema immunitario da parte di varie tossine, medicinali(immunosoppressori).
Ipoproteinemia:
Assunzione insufficiente di proteine alimentari, solitamente osservata con malnutrizione, fame, tumori, restringimento dell'esofago, disfunzione del tratto gastrointestinale (a causa del deterioramento della digestione e dell'assorbimento dei componenti proteici degli alimenti), ad esempio, con processi infiammatori intestinali prolungati .
Secondo AA Pokrovsky, anche una composizione sbilanciata di aminoacidi nel cibo a volte può portare a ipoproteinemia.
Per garantire i normali processi vitali, il corpo utilizza la frazione di albumina delle proteine del plasma sanguigno. Con l'aumento del consumo di albumina (che causa principalmente la pressione sanguigna oncotica), si sviluppa il cosiddetto edema oncotico o affamato. Qualsiasi diminuzione del contenuto proteico nel plasma sanguigno al di sotto del 5% è spesso accompagnata da edema tissutale ipoproteinemico.
2. Riduzione dei processi di biosintesi proteica (epatite parenchimale cronica, malattie acute e croniche, processi prolungati di suppurazione, neoplasie maligne, grave tireotossicosi, ecc.).
3. Perdita di proteine \u200b\u200bda parte dell'organismo durante sanguinamento acuto e cronico, con una permeabilità nettamente aumentata delle pareti dei capillari (con il loro danno tossico, quando le proteine del sangue vengono rilasciate nei tessuti), con emorragie, formazione di essudati estesi, versamenti in sieroso cavità ed edema.
Il rilascio di proteine (principalmente albumine) dal flusso sanguigno si verifica quando il filtro renale viene disturbato a causa di malattie organiche reni (soprattutto nefrosi e amiloidosi), in cui la proteina si trova quasi sempre nelle urine, così come le ustioni.
4. Defectoproteinemia (albuminemia) - assenza congenita o contenuto insufficiente di ceruloplasmina nel plasma sanguigno nella malattia di Wilson.
5. Nelle donne durante l'allattamento e gli ultimi mesi di gravidanza.
6. Sindrome nefrosica
7. Kwashiorkor (carenza proteica acuta)
8. Sindrome da ritenzione salina
Ipoproteinemia relativa- associato ad un aumento del volume del sangue circolante dovuto all'acqua (con anuria, scompenso cardiaco, aumento della sintesi dell'ormone antidiuretico dell'ipotalamo).
Ipoproteinemia assoluta- osservato con assunzione insufficiente di proteine nel corpo a causa della fame, sintesi proteica insufficiente nei processi infiammatori cronici del fegato, disturbi congeniti nella sintesi delle singole proteine del sangue, aumento della disgregazione proteica nel corpo e formazione di un significativo quantità di essudato.
Bibliografia
1. Babenko O. O., Savchenko T. G., Reznichenko L. V. Prevenzione dell'ipovitaminosi A nell'allevamento di suini. / T. G. Savchenko. / Veterinario. - N. 12. - 2008. - S. 38 - 39.
2. Zaitsev S. Yu., Biochimica degli animali / Yu.V. Konopatov - San Pietroburgo: "Lan", 2004., 384 p.
3. Severina E. S., Biochimica 2a edizione / E. S. Severina - M.: "Med" 2004., 184 p.
Applicazione
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Tipo di animale |
Proteine totali, g/l |
Frazioni di proteine, in percentuale |
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Albumine |
Globuline |
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Bestiame |
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Scheda. 2. Parametri biochimici di siero di sangue in vari tipi animali
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Fosfatasi alcalina |
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Creatinina chinasi |
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Bicarbonati |
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Bilirubina totale |
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Cloruri (Cl-) |
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Colesterolo |
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Creatinina |
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Proteina Albumina Globulina |
55-75 26-40 21-37 |
57-80 24-38 24-47 |
62-82 28-39 29-49 |
57-79 25-38 24-46 |
58-83 23-40 39-60 |
59-78 27-37 32-50 |
61-75 23-36 27-44 |
54-83 24-46 15-28 |
55-70 35-44 17-35 |
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Sodio (Na+) |
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Urea |
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Glicoproteine hanno preso il nome dalla parola "glucos" - dolce, perché si è scoperto che contengono carboidrati. Il gruppo protesico è rappresentato da vari carboidrati e loro derivati, il suo legame con la proteina è covalente, carboidrato-peptide.
È ormai accertato che quasi tutte le proteine (ad eccezione delle albumine del sangue) contengono una piccola quantità di carboidrati, e quindi solo quelle proteine con una concentrazione di carboidrati superiore al 4% appartengono alle glicoproteine.
Tutte le glicoproteine hanno un peso molecolare elevato (fino a diversi milioni di D), proprietà acide, solubili in acqua, soluzioni deboli di sali neutri e alcali, precipitate da acidi e hanno un'elevata viscosità. Sono termostabili, perché i carboidrati che li compongono aumentano notevolmente la resistenza delle molecole a vari prodotti chimici e al calore, le proteggono dall'azione delle proteasi, determinando così ruolo biologico glicoproteine. I carboidrati conferiscono alle proteine una maggiore specificità; grazie a questi gruppi, le macromolecole glicoproteiche possono riconoscere altre strutture.
Le glicoproteine si trovano in grandi quantità nella sostanza intercellulare tessuto connettivo, plasma sanguigno, saliva e altri segreti, come parte delle membrane citoplasmatiche e varie intracellulari, nel citosol. Il ruolo delle glicoproteine è vario. Trasportano sostanze idrofobiche e ioni metallici; essendo parte dei recettori di membrana, forniscono specificità dei contatti cellulari, influenzano la differenziazione dei tessuti, partecipano reazioni immunologiche, svolgono un ruolo protettivo, coprendo le mucose.
Si dividono in vere glicoproteine e proteoglicani. Questa divisione si basa su un diverso rapporto % della parte proteica e del gruppo protesico, nonché sulla struttura del gruppo protesico.
1. Vere glicoproteine, struttura, rappresentanti: mucine; immunoglobuline; proteine che determinano il gruppo sanguigno; ormoni; proteine di trasporto; enzimi; recettori, loro significato, distribuzione.
Come parte delle vere glicoproteine la parte proteica rappresenta circa l'80% e la quota del gruppo protesico è di circa il 20%. Nelle vere glicoproteine il gruppo prostetico è rappresentato da polisaccaridi che non hanno una struttura regolare. Il gruppo prostetico delle vere glicoproteine comprende vari monosaccaridi e i loro derivati amminici, gli acidi neuraminici o sialici in varie combinazioni e rapporti, ad es. la parte protesica delle vere glicoproteine non ha una struttura regolare. Le vere glicoproteine sono ampiamente distribuite nel corpo e svolgono una varietà di funzioni.
Le vere glicoproteine includono: mucine, proteine che determinano il gruppo sanguigno; recettori, enzimi, ormoni, proteine di trasporto.
Mucine- queste sono proteine del muco, situate nella cavità orale, coprono tutte le mucose. Sono costituiti da una proteina semplice e il gruppo prostetico comprende monosaccaridi, esosammine, acidi sialici e neuraminici in varie quantità e in varie combinazioni. Dei monosaccaridi nella composizione delle mucine ci sono: glucosio, galattosio, fucosio, ecc. La viscosità delle mucine dipende dalla quantità di acidi sialici. Il valore delle mucine: protettivo - coprendo le mucose del tratto gastrointestinale, respiratorio, urinario - proteggendole dall'essiccamento e dall'esposizione a fattori fisici e chimici.
Proteine che determinano il gruppo sanguigno.
Le proteine che determinano la specificità di gruppo del sangue, secondo la struttura del gruppo protesico, appartengono a vere glicoproteine, ma differiscono da esse per l'alto contenuto di carboidrati (fino all'85%), la presenza del gruppo protesico acetilglucosamina nella molecola , e una costruzione molto particolare della parte proteica, che, a quanto pare, è coinvolta nel mantenimento di una certa conformazione delle catene di carboidrati. La particolarità della parte proteica sta nel fatto che i 2/3 di tutti gli aminoacidi sono 4 aminoacidi: tre, pro, ser, ala, cioè la composizione quantitativa delle proteine, indipendentemente dalla loro specificità, è molto simile. L'attività antigenica di queste proteine è determinata dalla seguente sequenza di carboidrati alle estremità della catena glucidica: D-galattosio-N-acetilglucosamina-D-galattosio-N-acetilglucosamina. Il gruppo sanguigno dipende da quale carboidrato è attaccato a questo frammento. Per la sostanza H si tratta di fucosio, per la sostanza A si tratta di fucosio e N-acetilgalattosamina, che determina la specificità A, per la sostanza B, fucosio e galattosio terminale, che determina la specificità B. Pertanto, le differenze nella specificità delle catene di carboidrati possono essere ottenute attaccando fucosio, N-acetilgalattosamina o galattosio al frammento terminale e la sostanza H può essere considerata un precursore delle sostanze specifiche del gruppo A e B. Reattività sierologica completa del gruppo -sostanze specifiche è possibile solo se viene preservata l'integrità dell'intera molecola di questi composti.
Recettori situato sulla superficie esterna delle membrane, il citoplasma nelle membrane degli organelli. Alcuni enzimi e alcuni ormoni contengono carboidrati e anche proteine come trancortina, aptoglobina, immunoglobuline appartengono alle glicoproteine.
2. Proteoglicani, struttura, rappresentanti, significato.
In una molecola proteoglicana, al contrario, la quota di proteine va dal 2-2,3% al 10% e la parte di carboidrati è del 90-98%. I proteoglicani sono carboidrati normali.
Proteoglicani – proteine complesse, si trovano nella sostanza fondamentale del tessuto connettivo. Perché contengono una grande quantità di acidi sotto forma di gruppo protesico, sono polianioni e partecipano alla distribuzione e diffusione dell'acqua e dei cationi. In quanto membrana basale, i proteoglicani sono coinvolti nella distribuzione dei nutrienti. Collegandosi con le proteine \u200b\u200bstrutturali, formano un "setaccio molecolare" e formano anche spazi partizionati (domini) in cui si trova l'acqua, a causa di queste partizioni, l'acqua non si muove. Il volume delle cellule e dei tessuti dipende dai proteoglicani. Il gruppo prostetico di queste proteine è chiamato glicosaminoglicani (GAG). Sono divisi in tre tipi: ialuronico, condroitin acido solforico, eparina.
4. Il gruppo protesico di proteoglicani - glicosaminoglicani - (GAG) condroitin solforico, acido ialuronico, eparina. Il concetto di struttura, significato.
I proteoglicani contengono una piccola parte proteica (2-5%) e un gruppo prostetico rappresentato dai glicosaminoglicani (GAG). Questi ultimi hanno una struttura regolare, cioè sono costituiti da disaccaridi alternati, che includono acidi uronici e acetilesosammine (Fig. 7). Esistono 6 tipi di GAG: acido ialuronico, condroitin solfati A, B, C, cheratan solfati ed eparina, che differiscono l'uno dall'altro per la natura degli acidi uronici, le esosammine, il grado di solfatazione, il tipo di legame chimico che collega i monomeri, peso molecolare, proprietà. La tabella mostra i principali glicosaminoglicani dei tessuti umani.
Tavolo Composizione chimica glicosaminoglicani
GLICOPROTEIDI (glicoproteine) sono biopolimeri costituiti da componenti peptidici (proteine) e carboidrati legati in modo covalente. Nei casi in cui la parte carboidrata della molecola G. è costituita da uno o più residui di glucosio, i G. sono chiamati glucoproteine. G. trovato nel corpo di animali, batteri e piante e costituisce la classe più ampia e ben studiata di composti contenenti carboidrati. G. fanno parte della membrana cellulare, circolano nel flusso sanguigno come molecole di trasporto, ad esempio transferrina, ceruloplasmina (vedi Sangue). Le glicoproteine includono alcuni ormoni, enzimi e immunoglobuline. Uno dei primi suggerimenti sul perché le proteine abbiano bisogno di una componente di carboidrati è stato fatto da Eylar (E. H. Eylar, 1965). Considerando un numero abbastanza elevato di G., ha scoperto che sono tutti fuori dalla cellula, nel flusso sanguigno, nella saliva, nel latte e in altri segreti. Sulla base di questo fatto, ha suggerito un'ipotesi, secondo la quale la componente glucidica è una sorta di passaggio, dopo aver ricevuto to-rogo la molecola proteica deve necessariamente lasciare la cellula. Successivamente, tuttavia, sono stati ottenuti dati che indicano che molte proteine intracellulari sono G. e fanno parte di varie membrane intracellulari e della membrana citoplasmatica. Inoltre, proteine non glicosilate (albumina, a-lattoalbumina, chimotripsinogeno, ecc.) Sono state trovate in vari segreti e siero del sangue. Pertanto, l'ipotesi di Eilar non può pretendere di essere una soluzione universale alla questione del ruolo del componente carboidrato. In ulteriori studi, è stato scoperto che se l'acido sialico viene scisso enzimaticamente dalla parte dei carboidrati di un certo numero di G. siero (ceruloplasmina, aptoglobina, fetuina, orosomucoid), allora l'emivita di queste asialo-glicoproteine sarà ridotta da diversi decine di ore a diversi minuti. In questo caso, tutte queste asialo-glicoproteine si legano alle membrane delle cellule epatiche parenchimali.
Un certo numero di glicoproteine - ormoni (ad esempio, ormoni gonadotropici e follicolo-stimolanti) dopo la rimozione del sialico a - t scompaiono molto rapidamente dal flusso sanguigno e, come il siero G., si trova nelle cellule del fegato. Di conseguenza, l'ormone non si lega alle cellule bersaglio e al suo biolo, l'azione è nettamente ridotta.
Metodi biochimici per la determinazione delle glicoproteine
In biol, liquidi, sangue e urina c'è una miscela di vari G. Per l'assegnazione di ciascuno di essi in forma pura è richiesta la tecnica difficile, a lungo, il che ne rende difficile l'utilizzo per studi seriali. Pertanto, in una pratica a cuneo, la più comune è la definizione totale di G. da parte di uno dei componenti della parte di carboidrati in essi inclusa: esosi, esosammine, fucosio, sialico to-tam o dalla capacità di dare una reazione di iodio a - quello - il reagente di Schiff (vedi il reagente di Schiff).
I metodi più utilizzati per determinare G. possono essere suddivisi in due gruppi principali: chimico ed elettroforetico. Per studi speciali vengono utilizzati metodi cromatografici, polarografici e radioimmunologici.
La maggior parte delle chim. metodi si basa sulla determinazione della parte di carboidrati della molecola G. utilizzando varie reazioni di colore basate sull'interazione di un monosaccaride con acido solforico per formare un derivato furfurale (ad esempio, reazioni con orcina, antrone, triptofano, carbazolo, difenilammina, resorcinolo, alfa-naftolo). Tali reazioni danno un prodotto colorato con uno dei composti elencati o una base azotata aromatica. La quantità di prodotto colorato formatosi viene determinata mediante fotoelettrocolorimetria. Il più accurato è il metodo per determinare gli esosi, utilizzando una reazione cromatica con orcina o resorcina; il più sensibile è il metodo che utilizza l'alfa-naftolo, che però è più spesso utilizzato per studi indicativi.
Quasi tutti i metodi utilizzati per la determinazione degli aminosaccaridi si basano sul metodo classico di Elson-Morgan (1933). Il principio del metodo è che lo zucchero amminico reagisce con l'acetil acetone in una soluzione calda leggermente alcalina. Contemporaneamente si forma una miscela di pirroli che danno una colorazione rossa con il reagente para-dimetilamminobenzaldeide, la cui intensità è determinata fotometricamente a 530 nm. La glucosamina dà quasi lo stesso colore della galattosamina; con la mannosamina, la colorazione è un po' più debole. La glucosamina cloridrato viene utilizzata principalmente per costruire una curva di calibrazione.
Per determinare il fucosio viene utilizzata una reazione in cui la cisteina cloridrica viene aggiunta al prodotto dell'interazione di G. con l'acido solforico.
Questa reazione è alla base di quasi tutti i metodi utilizzati per determinare il metilpentosio (vedi metodo Dische).
Sono offerti numerosi metodi per il rilevamento e la definizione quantitativa di sialic to - t: un metodo ortsinovy con il reagente di Bial, un metodo resorcinolo, un metodo con tiobarbiturico a - quello, reazione difenilammina e metodo di Hess (vedi. Reazione di Hess). Il più sensibile e specifico è il metodo con acido tiobarbiturico. L'elettroforesi di G. fu introdotta per la prima volta da Keiv e Gronwall (E. Koiw, A. Gronwall) nel 1952. Sono descritte numerose modifiche di questo metodo; uno svantaggio comune alla maggior parte di essi è la relativa complessità del metodo o la significativa colorazione dello sfondo sugli elettroforegrammi. Il principio del metodo e della tecnica per eseguire l'elettroforesi G sono gli stessi della separazione elettroforetica delle frazioni proteiche del siero del sangue su carta (vedi Elettroforesi).
Sono stati proposti numerosi metodi per il rilevamento delle frazioni glicoproteiche; colorazione con blu di toluidina, ferro colloidale, blu ancyano, ecc. Tuttavia, il metodo più comune per colorare le glicoproteine con il reagente di Schiff, basato sulla reazione (iodio a - fucsina-sulfurea a - quella), originariamente proposto da Hotchkiss (R. D. Hotchkiss) e Mac Manus (J. F. A. McManus) per la colorazione di G. in gistol, sezioni. Il principio di questo metodo è che i componenti dei carboidrati di G. vengono ossidati mediante soluzione di iodio in aldeidi e le aldeidi vengono alla luce con l'aiuto del reagente di Schiff. Per la determinazione quantitativa, le frazioni colorate vengono eluite dagli elettroforegrammi, seguite dalla fotometria degli eluati o determinate mediante densitometria (vedi).
A persona sana, secondo vari autori, il contenuto relativo delle frazioni di G. (in%) è il seguente: albumina - 10,4-16,6; alfa 1 -globulina - 14,2-18,3; alfa 2 -globulina - 24,8-31,8; beta-globulina - 21,7-25,0; uglobulina - 16,0-19,2.
La più alta percentuale di contenuto di carboidrati si nota nelle frazioni globuliniche, in particolare nelle alfa2 e beta globuline (vedi Globuline).
Promettente è il metodo di immunoelettroforesi (vedi), così come il metodo di elettroforesi in gel di poliacrilammide (PAGINA), la cui risoluzione può essere 10 volte superiore alla risoluzione dell'elettroforesi su carta.
I risultati della determinazione delle glicoproteine hanno un importante valore diagnostico differenziale nelle malattie del tessuto connettivo, del sistema cardiovascolare, zhel.-kish. tratto, fegato, reni, polmoni. Allo stesso tempo, lo studio dei cambiamenti nella conservazione di queste sostanze nel siero del sangue e in altri bioli, liquidi oltre a un cuneo, i dati sono di grande importanza per una stima dell'attuale patol, processo, efficienza del trattamento e per la previsione. Nei processi infiammatori reumatismo acuto, tubercolosi, polmonite, pleurite, vi è un aumento del contenuto di tutte le frazioni di G. nel siero del sangue, in particolare alfa 1 e alfa 2 globuline. Valore più alto ha la definizione di mantenimento assoluto e relativo di G. in siero di sangue a reumatismi. La concentrazione di G. nel siero del sangue aumenta anche con glomerulonefrite, tumori, necrosi e spesso con diabete.
Metodi istochimici per la determinazione delle glicoproteine nei tessuti
Gistokhim, i metodi di scoperta di G. sono basati sull'identificazione dei loro gruppi reattivi, come gruppi 1,2-glicole, e anche gruppi carbossilici di sialic a - t. Per la fissazione di G. è possibile utilizzare una soluzione al 10% di formalina a t° da 0 a 4° entro 24-48 ore. Esistono metodi di fissazione con l'aggiunta di alcuni sali alla formalina, nonché vari detergenti cationici (vedi), che contribuiscono a una migliore conservazione dei polisaccaridi e alla loro successiva differenziazione istochimica. La preferenza dovrebbe essere data al metodo di liofilizzazione delle sezioni seguito dall'inclusione in paraffina. Esiste un numero significativo di metodi istochimici e loro modifiche per il rilevamento dei polisaccaridi, ma non tutti sono sufficientemente affidabili e disponibili in termini pratici. Il più affidabile con l'uso obbligatorio di reazioni di controllo e giustificato dal punto di vista della chimica è il metodo McManus-Hotchkiss-Shabadash. Nei laboratori del nostro paese viene spesso utilizzata la modifica di Shabadash. Il metodo si basa sull'ossidazione di gruppi 1,2-glicolici di polisaccaridi con sale iodato, seguita dall'identificazione di aldeidi ottenute per reazione di fucsina-solforosa a-quella (reattivo di Schiff). Nelle aree di localizzazione delle muco e delle glicoproteine si sviluppa una colorazione rosso porpora di varia intensità. Oltre a questi composti, la reazione rivela anche glicogeno, glicolipidi e aldeidi libere. Le aldeidi non specifiche possono anche apparire come risultato dell'ossidazione di composti con legami insaturi durante la fissazione del materiale con formalina. Pertanto, per ottenere risultati attendibili, è necessario un attento controllo istochimico: occorre innanzitutto escludere la presenza di aldeidi libere e non specifiche e, se presenti, effettuare una reazione di blocco. Utilizzando la diastasi del malto (in casi estremi, l'amilasi salivare), si può escludere la presenza di glicogeno.
Reagenti necessari: fucsina basica cristallina (o la cosiddetta fucsina basica per fucsina-solforosa), 1 N. HCl, metabisolfito di potassio o di sodio (K 2 S 2 O 5 o Na 2 S 2 O 5), un periodo o meglio sale di potassio (KIO 4), diastasi di malto altamente purificata, cloridrato di idrossilammina. Per la reazione di acetilazione: piridina anidra e anidride acetica, 0,1 N. potassio caustico (KOH), farmaco neuraminidasi. I lipidi vengono rimossi mediante trattamento con vari solventi (p. es., una miscela calda di cloroformio e alcol metilico).
Progresso della definizione. Le sezioni seriali, sperimentali e di controllo, vengono trattate con soluzione di periodato di potassio, lavate rapidamente in acqua distillata e poste nel reattivo di Schiff, quindi lavate in soluzione di bisolfito appena preparata (10 ml di soluzione al 10% di metabisolfito di potassio, 10 ml di 1 N HCl e 200 ml di acqua distillata). Le sezioni vengono accuratamente lavate in un grande volume di acqua, disidratate in alcoli, purificate in xilene e montate in balsamo canadese neutro.
La reazione di acetilazione dei gruppi glicolici e l'uso della neuraminidasi confermano l'attendibilità dei risultati ottenuti.
Bibliografia Anasashvili A. Ts. Glycoproteins di siero di sangue e urina, M., 1968, bibliogr.; Widershine G. Ya Composti contenenti carboidrati, loro biosintesi e ruolo nella cellula animale, Molek. biol., t.10, n.5, p. 957, 1976, bibliogr.; Glicoproteine, ed. A. Gottschalk, trad. dall'inglese, vol.1 - 2, M., 1969; D ere-vitskaya V. A. Chimica delle glicoproteine, Usp. biol. chim. ed. BN Stepanenko, volume 8, pag. 168, Mosca, 1967; Linee guida sull'uso della clinica unificata metodi di laboratorio Ricerca, ed. VV Menshikov, Mosca, 1973. Pierce E. Istochimica, trad. dall'inglese, pag. 741 e altri, M., 1962; Principi e metodi dell'analisi istocitochimica in patologia, ed. A. P. Avtsyna e altri, p. 7, L., 1971; Spiro R. G. Glicoproteine, Advanc. Protein Chem., v. 27, p. 349, 1973, bibliogr.
G. Ya Wiederschein; A. Ts. Anasashvili (ricerca metanfetamina), R. A. Simakova (essenza).
- Un aumento del sangue (siero) [enzima] è chiamato (iper/enzima/emia). Se questo enzima si trova normalmente all'interno delle cellule, allora l'iper/enzima/emia è più frequente un segno di distruzione cellule. Disponibilità enzima nel sangue determinato da la velocità della reazione chimica catalizzata da questo enzima - quando il substrato di questo enzima viene aggiunto al siero del test ("in vitro"). In altre parole, l'[enzima] nel siero viene giudicato per attività enzima.
| № | Enzima (enzima) | Malattia |
| 1. | Amilasi nelle urine (entra nelle urine dal sangue) | Pancreatite Pancreatite |
| 2. | Lipasi | |
| 3. | Amilasi nel sangue | Pancreatite (insieme a lipasi urinaria e amilasi) o parotite |
| 4. | Creatina chinasi (CK) | Infarto o patologia del muscolo scheletrico |
| 5. | LHD 1 | Infarto (con angina pectoris non c'è aumento di LDH) |
| 6. | LHD 5 | Patologia del fegato (ittero epatico) o del muscolo scheletrico |
| 7. | ALT è maggiore di AST | Patologia epatica (epatite, ecc.; ittero epatico) |
| 8. | AST più di ALAT | Attacco cardiaco (o grave distruzione degli epatociti: con distruzione dei loro mitocondri) |
| 9. | Fosfatasi alcalina (AP) | Rachitismo o altra malattia ossea (se senza HGT) o ittero ostruttivo(se insieme a GGT) |
| Gamma-glutamil/transferasi (GGT) | Alcolismo (se senza ALP) o ittero ostruttivo (se con ALP) |
In alcuni casi, per fare una diagnosi, è necessario determinare l'attività non di un enzima, ma di due.
15. Glucosuria, sue cause e valore diagnostico.
Bene glucosio molto poco nelle urine< 0,5 г/сутки, или < 0,16 г/л), что не определяется обычными методами. Глюкозурией считают наличие в моче glucosio, che viene rilevato da un test specifico standard. Glicosuria si sviluppa quando il contenuto glucosio nel plasma sangue e, quindi, nel filtrato glomerulare supera significativamente la capacità di riassorbimento dei tubuli renali.
Questo accade con qualsiasi aumento. glucosio nel sangue soprattutto a causa del rapido assorbimento glucosio nell'intestino (sindrome da dumping post-gastroectomia, gravidanza normale); A malattie endocrine(DM, tireotossicosi, gigantismo, acromegalia, sindrome di Cushing, iperplasia della corteccia surrenale); A grande ferita, paralisi, infarto del miocardio, corticosteroidi orali, ustioni, infezioni, feocromocitoma.
La glicosuria renale si osserva con danno e aumento della permeabilità dei tubuli renali, tubulopatie (malattia di Fanconi), che è accompagnata da un aumento di urati urinari, proteine, aminoacidi, bicarbonati, fosfati, calcio, potassio. La glicosuria è presente nel diabete renale (mutazione del trasportatore dei monosaccaridi e ridotto riassorbimento), nella glicosuria renale secondaria, con malattie croniche reni. Nei pazienti diabete concentrazione glucosio nelle urine può variare dallo 0,5 al 12%. La scomparsa della glicosuria nei pazienti con diabete mellito a lungo termine è una conseguenza dell'insufficienza renale associata.
La glicosuria può simulare la lattosuria nelle donne che allattano, la fruttosuria e la galattosuria nelle malattie ereditarie metabolismo dei carboidrati. La glicosuria si verifica quando si avvelena con morfina, stricnina, cloroformio, fosforo.
16. Significato della determinazione di Ca 2+ e fosfato nel siero del sangue.
Tasso di calcio sangue 2,1 -2,6 mmoli/l. Un livello superiore a 3,5-3,75 è pericoloso per la vita crisi, arresto improvviso cuori.
Tasso di fosfato 0,8- 1 0,4 mmol/l.
- Valore di definizione C A L T I A E PHO S P H A T A nel siero del sangue.
Cambiamenti in [calcio] e [fosfato] nel siero del sangue: in primo luogo, lo sono conseguenza determinate violazioni e quindi indicare la presenza di tali violazioni. In secondo luogo, possono causare determinati disturbi e quindi indicare il rischio di sviluppare tali disturbi.
Cause dei cambiamenti nelle concentrazioni di calcio e fosfato: 1) malnutrizione (assunzione eccessiva o insufficiente di calcio e fosfato e cibo), 2) disregolazione e [fosfato], causato da disturbi nella produzione di ormoni che regolano e [fosfato].
Con un'assunzione insufficiente di calcio e fosfato dal cibo e [fosfato] nel plasma, può diminuire, ma non in modo significativo, poiché calcio e fosfato entrano nel plasma dalle ossa (se anche [fosfato] diminuisce nel plasma - ma ciò accade sotto l'azione degli ormoni calcitriolo e paratirina ed è proprio la loro carenza che può portare ad una diminuzione
17. diagnosi biochimica di pancreatite.
Analisi biochimiche sangue - rilevamento livello avanzato enzimi amilasi, Spiegazioni: l'amilasi è prodotta dal PZhZh e dalle ghiandole salivari, da cui entra nei dotti nel tratto digestivo per la digestione (per la digestione dell'amido alimentare: scissione dell'amido in maltosio)) - L'amilasi PZhZh entra nel duodeno e l'amilasi ghiandole salivari va a cavità orale. Non dovrebbe esserci amilasi nel sangue e la presenza di amilasi nel sangue è il risultato di un danno all'SF o al PG. Solo l'amilasi PZhZh (se è nel sangue) può entrare nelle urine e l'amilasi SJ non può entrare nelle urine. La lipasi è prodotta nel pancreas, ma non nella SF. L'uomo sta parlando α -amilasi. Una persona non ha β-amilasi, poiché è un'amilasi che consentirebbe a una persona di mangiare la carta allo stesso modo del pane: questa amilasi scinde i legami β-glicosidici nella cellulosa. L'α-amilasi catalizza la scissione del maltosio dall'amido o dal glicogeno alimentare
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