Come si diffonde la peste suina africana e come affrontarla. Peste suina africana: tutto quello che c'è da sapere su una malattia pericolosa Cambiamenti patologici della peste suina africana

La peste suina africana (PSA) è una malattia infettiva molto pericolosa e incurabile. L'esito fatale è quasi al cento per cento, tutti gli animali sono colpiti, indipendentemente dall'età e dal metodo di penetrazione del virus nel corpo. È importante sapere quanto sia pericolosa la peste suina africana per l'uomo e i suoi sintomi al fine di prevenire la massiccia diffusione della malattia.

Le prime informazioni sul virus sono apparse relativamente di recente, nel primo decennio del secolo scorso. Poi il famoso ricercatore R. Montgomery era in Africa orientale, dove si è registrato pericoloso virus fatale, motivo per cui la malattia a volte prende il nome da lui. Nel tempo, la malattia si è diffusa in tutto il continente africano, è stata introdotta in Europa, poi in America, ed è apparsa successivamente nel territorio della Federazione Russa.

I portatori del virus possono essere sia animali malati che malati di recente (l'agente patogeno può vivere nel loro corpo per circa due anni), l'escrezione avviene con la saliva, durante la minzione, con sangue o feci.

Per capire quanto sia pericolosa la PSA, è necessario parlare delle possibili modalità di infezione. Ce ne sono diversi:

I sintomi e le manifestazioni rendono la peste suina africana quasi indistinguibile dalla peste suina classica. Un periodo di incubazione di almeno due giorni, ma non superiore a due settimane, dipende da una serie di sintomi. Ciò complica notevolmente la diagnosi corretta. La malattia può essere acuta, subacuta, iperacuta, cronica e asintomatica. Se la PSA è acuta, l'animale muore circa sette giorni dopo l'infezione, iperacuta - un giorno o tre, subacuta - dopo due o tre settimane. Se durante questo periodo la morte non si è verificata, molto probabilmente si sviluppa una forma cronica e l'animale morirà dopo il completo esaurimento del corpo.
È importante sapere che la peste africana può colpire non solo maiali o maialini adulti domestici ma anche selvatici, indipendentemente dall'età, dal sesso e dalla razza. La malattia si manifesta in diversi periodi dell'anno. Studi a lungo termine ci consentono di concludere che nel continente europeo la maggior parte dei focolai di infezione compare nei periodi invernale e primaverile.
La diagnosi finale si ottiene dopo il completamento di complessi studi di laboratorio.

I campioni di sangue sono ottenuti da animali infetti, parti di organi interni (milza) sono ottenute da maiali morti.

Il sangue viene prelevato da animali malati da molto tempo, nonché da quelli che sono stati a diretto contatto con animali malati di età diverse.
In molti casi, la peste africana è acuta. Durante questo periodo puoi vedere:

Il virus può mutare, i sintomi cambiano, quindi non tutti, ma solo alcuni dei presunti sintomi possono manifestarsi in un determinato territorio.

I sintomi della peste africana negli esseri umani

Non ci sono vaccini o farmaci che possono essere usati per curare gli animali. Quasi tutti i maiali malati muoiono.
Se parliamo del pericolo della peste suina africana per le persone, allora è assente. I prodotti a base di carne possono essere utilizzati e saranno completamente adatti al consumo, esiste un trattamento termico completo e di alta qualità a lungo termine (bollitura, frittura). È necessario tener conto del fatto che dopo aver fumato il virus non verrà distrutto. Quando una persona mangia la carne di un tale maiale, nulla minaccerà la sua vita, perché la malattia non viene trasmessa alle persone da animali malati. Ma il servizio veterinario, in ogni caso, dopo l'istituzione del virus della peste africana, introdurrà la quarantena in una zona di 20 chilometri e si occuperà della distruzione dell'intera popolazione suina in questo territorio al fine di prevenire la diffusione della PSA . Una persona può anche diventare un distributore di una malattia pericolosa. Facciamo un semplice esempio. Il proprietario ha macellato uno dei maiali che teneva senza nemmeno sapere che era infetto. Quando questa carne viene mangiata, il virus può diffondersi ad altri animali. È noto che il residuo inutilizzato dell'allevatore di maiali viene messo in un contenitore separato, quindi gettato da qualche parte, il più delle volte come mangime per gli animali rimanenti. Quindi la malattia si diffonderà e una persona dopo aver mangiato prodotti a base di carne diventerà un distributore del virus, senza saperlo.

Il relativamente recente virus della peste suina africana è pericoloso a causa della sua capacità di diffondersi rapidamente. La malattia rappresenta una minaccia per gli animali, distruggendo in massa il bestiame. Spesso, per prevenire la diffusione dell'infezione, è necessario eliminare sia gli individui malati che quelli sani, il che è dannoso per lo sviluppo della produzione di suini.

Cos'è la peste suina africana

Esistono diversi nomi per la peste suina africana. Questa è sia la febbre dell'Africa orientale che il virus Montgomery. In latino, l'infezione si chiama Pestis Africana suum e l'abbreviazione è ASF.

L'infezione africana è pericolosa per gli animali, con un decorso acuto e grave della malattia, l'esito è sempre fatale.

La malattia si verifica per colpa di un virus che si moltiplica nelle cellule del sangue (nel citoplasma). L'infezione colpisce la sintesi delle proteine ​​e del DNA. Anche se un suino ha sofferto di PSA, rimane una fonte di pericolo per i suini sani. Ciò è dovuto al fatto che l'animale dopo la malattia non acquisisce l'immunità a questa infezione. Inoltre il virus è in grado di accumularsi nel sangue, entrando nell'ambiente esterno, non muore nemmeno sotto l'influenza delle alte temperature, con un cambiamento della percentuale di umidità o del pH.

Storia dell'apparenza

Un'infezione è sorta nel continente africano, da cui il nome di questa malattia. Inizialmente, l'infezione ha colpito i cinghiali. L'organismo degli animali si è gradualmente adattato al virus, cercando di combatterlo. Di conseguenza, gli individui hanno acquisito l'immunità alla PSA, ma sono rimasti portatori e distributori del virus della peste suina africana.

Dopo l'apparizione dei coloni europei in Africa, che portarono bestiame dalla loro terra natale, iniziò a verificarsi un'infezione generale. Si è scoperto che gli animali appena arrivati ​​non erano immuni alla PSA.

All'inizio del 20° secolo, il Sudafrica ha subito un massiccio declino bestiame. Fu allora che la PSA fu descritta per la prima volta. Allo stesso tempo, tutta la colpa è stata attribuita ai cinghiali, che erano portatori di virus.

Nonostante il fatto che la malattia sia già migrata in Europa, l'infezione africana non è ancora del tutto chiara.

Vie di distribuzione

La PSA è arrivata nel continente europeo nella prima metà del XX secolo. All'inizio, i maiali spagnoli e portoghesi divennero vittime. Dopo la fine della seconda guerra mondiale, la peste suina africana si è diffusa in America Latina. Entro la fine del secolo scorso, l'infezione è arrivata in Asia, poi nei paesi dell'Europa orientale. In Russia, nel 2007 si è verificata un'epidemia del virus africano. Poi ha distrutto più di 1.000.000 di maiali.

Modi di diffusione dell'infezione:

• Il virus, che si moltiplica nel sangue degli animali, si trasmette attraverso le punture di insetti ematofagi (zanzare e zecche).
• L'infezione avviene attraverso il contatto tra portatori di virus e bestiame sano.
• Spesso la fonte della PSA è il cibo, o meglio gli additivi contenuti nella sua composizione.
• Anche i maiali malati che rilasciano microbi nell'ambiente contribuiscono alla diffusione di una malattia mortale.

Sintomi della peste suina africana

La malattia è abbastanza difficile da riconoscere. Spesso pericolosa infezione si manifesta allo stesso modo della classica peste. Quadro clinico dipende dal decorso della malattia.

La forma più rara e pericolosa è il decorso iperacuto della malattia. È caratterizzato dai seguenti sintomi:

• alta temperatura corporea (fino a 42 ℃);
• uno stato di febbre;
• depressione generale.

La malattia si sviluppa molto rapidamente. Pertanto, questa opzione è anche chiamata fulminea. Termina con la morte dell'animale in 2-3 giorni.

Anche la forma acuta di PSA termina con la morte, in media dopo 5-9 giorni. Segni generali:

• la comparsa di congiuntivite;
• arrossamento pelle, soprattutto nella zona intorno agli occhi;
• aumento della temperatura (42℃);
• aumento della frequenza cardiaca e della respirazione;
• secrezione sanguinolenta dal naso (in una fase avanzata).

La forma subacuta è caratterizzata dagli stessi sintomi. Tuttavia, con questa forma, il decorso della malattia non è così grave. Succede che il maiale si riprenda, ma rimane portatore dell'infezione.

I principali segni della malattia in un decorso cronico:

• pelle blu e gonfia;
• a volte si manifesta uno stato febbrile;
• possibile gonfiore sotto la pelle.

Nella forma cronica, il maiale è malato in media da 2 a 10 mesi. Spesso l'animale muore a causa di un processo infiammatorio o per esaurimento.

Inoltre, viene isolata una forma di PSA, che passa senza sintomi visibili. Questa specie è più comune nei cinghiali, ma colpisce anche i maiali domestici. In questo caso, l'individuo è considerato una fonte di minaccia per le controparti sane.

In che modo la PSA minaccia le persone?

Studi di laboratorio sulla peste africana hanno dimostrato che il virus mortale per gli animali domestici non rappresenta un pericolo per l'uomo, non minaccia la sua salute e la sua vita. La carne ottenuta da un individuo che si è ripreso dalla PSA è sicura e adatta al consumo umano. Allo stesso tempo, un prerequisito è il trattamento termico ad alta temperatura (da 80 ℃). I maiali ei suinetti a rischio di infezione vengono generalmente macellati per i prodotti a base di carne.

Nonostante la sicurezza della malattia per l'uomo, i veterinari continuano a lanciare l'allarme. Dopotutto, il virus africano è in continua mutazione e cambiamento. Gli scienziati ritengono che non sia esclusa l'emergere di un nuovo tipo sconosciuto di PSA, che può rappresentare un pericolo per la salute e la vita umana.

C'è una cura

La malattia è pericolosa per la vita degli animali. I segni della peste suina africana non appaiono chiaramente, quindi è difficile fare una diagnosi. Inoltre, accade che un animale venga infettato da una forma fulminea, che procede nel più breve tempo possibile e finisce sempre con la morte.

La peste africana non è ancora del tutto compresa. Di conseguenza, non definito modo adatto sbarazzarsi di questo flagello che danneggia l'economia e lo sviluppo della zootecnia. Non sono stati trovati farmaci efficaci per il trattamento malattia mortale.

Anche in caso di esito favorevole, gli animali guariti restano una fonte di minaccia per la salute dei loro simili. Un maiale che si è sbarazzato della malattia rimane un portatore di virus per sempre.

Eradicazione dei focolai e prevenzione della diffusione

Prima di tutto, è necessario tenere conto dell'intero pericolo di infezione. Un altro fattore importante è la mancanza di un trattamento efficace. Dati questi aspetti, la via d'uscita dalla situazione diventa ovvia.

Con la manifestazione dei segni della peste africana nei maiali, l'unica via d'uscita è distruggere il bestiame. Naturalmente, questo modo di affrontare il problema che si è presentato provoca danni significativi all'economia del Paese e danneggia lo sviluppo dell'agricoltura. Inoltre, vengono distrutti sia gli animali malati che gli individui non infetti tenuti nello stesso allevamento. Tuttavia, questa è attualmente l'unica via d'uscita possibile.

Le misure adottate per combattere l'infezione sono sotto il controllo del servizio veterinario. Tutto azioni preventive sono eseguiti secondo gli standard di Rosselkhoznadzor.

Prevenzione

Nonostante l'infezione sia incurabile e minacci la vita del maiale, la situazione non è senza speranza. È necessario conoscere le misure preventive che prevengono l'infezione del bestiame e aiutano a evitare la morte di massa degli animali domestici.

L'importante è monitorare la disponibilità di certificati veterinari al momento dell'acquisto sia di maschi o femmine adulti che di giovani suinetti.

Quando si gestisce un'azienda agricola e si allevano maiali, si raccomanda di osservare una serie di condizioni:

• Garantire che il bestiame sia allevato secondo le regole stabilite dal servizio veterinario.
• Non inquinare l'ambiente con i rifiuti del bestiame.
• Attuare le misure di quarantena in modo tempestivo.
• Isolare immediatamente gli animali malati.
• Non pascolare i maiali nelle aree vicine alla zona di infezione.

Quarantena

Una delle misure necessarie per fermare la diffusione di una malattia mortale. La quarantena viene eseguita dopo aver identificato la fonte di infezione che minaccia la vita dei suini.

Gli animali a rischio di malattia, così come gli individui infetti, vengono distrutti con un metodo senza sangue. Anche attrezzature, mangimi, tramezzi, vecchi locali fatiscenti, recinzioni, alimentatori sono soggetti a liquidazione. Di norma, tutto è bruciato. Se ciò non è possibile, i cadaveri di maiali, inventario, pavimenti in legno, ecc. Vengono sepolti nel terreno ad una profondità di almeno 2 metri.

Nella zona, la cui copertura è di 5 km, sono registrati tutti gli animali domestici (sia maialini che adulti).

Vietato:

• rimuovere i maiali dalla zona di quarantena;
• vendere bestiame e pollame di qualsiasi genere;
• commercio di carne, latte, ecc.

Rimozione della quarantena

Quando il numero di suini malati e in via di estinzione viene distrutto, vengono eliminati gli articoli per la cura del bestiame, vengono prese misure per decontaminare il territorio. Successivamente, è necessario ottenere una conclusione dal controllo veterinario, confermando la pulizia e la sicurezza del luogo.

La quarantena viene revocata solo dopo l'attuazione delle misure stabilite dalla legge. Il periodo standard è di 1 mese.

Entro 6 mesi è impossibile vendere suini situati nel territorio in cui si è verificata l'epidemia. È vietata la vendita di carne, così come l'esportazione di animali al di fuori della zona.

È consentito acquisire nuovi suini solo dopo che è trascorso un anno dall'epidemia.

Il virus della PSA è una minaccia mortale per gli animali domestici. Inoltre, la malattia danneggia lo sviluppo e il funzionamento dell'economia. Nonostante la mancanza di salvezza da questo disastro, è in potere di ogni agricoltore adottare misure preventive. Questo è l'unico modo per prevenire la diffusione del contagio e salvare la vita dei reparti.

La peste suina africana (PSA, malattia di Montgomery) è una malattia contagiosa che si manifesta in modo acuto, subacuto, cronico, asintomatico ed è caratterizzata da febbre, diatesi emorragica, alterazioni infiammatorie e necrodistrofiche degli organi parenchimali. La malattia è stata segnalata in Africa, Spagna, Portogallo, Francia, Brasile e Cuba. I maiali di tutte le età e razze si ammalano in qualsiasi periodo dell'anno. Il virus fu descritto da Montgomery nel 1921 e collocato in una famiglia separata.

Segni clinici e alterazioni patologiche. Sono simili a quelli in CSF. La PSA si è manifestata come intensa setticemia emorragica, una malattia altamente contagiosa e in rapida progressione che ha causato la morte di tutti gli animali contaminati. In condizioni naturali, il periodo di incubazione dura 5-7 giorni, nell'esperimento il suo periodo variava a seconda del ceppo e della dose del virus. Ci sono decorso iperacuto, acuto, subacuto, cronico e latente della malattia. Il decorso superaffilato e affilato è più spesso osservato.

A superisola Nel corso della temperatura corporea in un animale malato sale a 40,5-42 ° C, la depressione e la mancanza di respiro sono fortemente espresse. L'animale giace di più e dopo 24-72 ore muore. A Ostrom(il più caratteristico) decorso della malattia, la temperatura sale a 40,5-42 ° C e diminuisce un giorno prima della morte dell'animale. Contemporaneamente all'aumento della temperatura compaiono i primi sintomi della malattia: uno stato depresso, paresi degli arti posteriori. Sulla pelle delle orecchie, del muso, del ventre, del perineo e della parte inferiore del collo compaiono macchie rosso-violacee. Parallelamente compaiono segni di polmonite: la respirazione diventa breve, frequente, intermittente, a volte accompagnata da tosse. I sintomi di indigestione sono lievi: di solito si osserva stitichezza prolungata, le feci sono dure, ricoperte di muco. In alcuni casi, c'è diarrea con sangue. Nella fase atonale della malattia, gli animali sono in coma che dura 24-48 ore, la temperatura corporea scende al di sotto del normale e dopo 4-10 giorni dal momento in cui la temperatura aumenta, l'animale muore.

Subacuto Il decorso della sintomatologia è simile a quello acuto, ma i segni della malattia si sviluppano meno intensamente. La malattia dura 15-20 giorni, i maiali di solito muoiono. Nei singoli individui sopravvissuti si sviluppa un decorso cronico della malattia, caratterizzato da febbre intermittente, esaurimento, arresto della crescita, lieve edema indolore nelle articolazioni del polso, metatarso, falangi, tessuti sottocutanei del muso e della mascella inferiore, necrosi cutanea, cheratite. Gli animali si ammalano per 2-15 mesi, la morte, di norma, si verifica dopo il coinvolgimento nel processo infettivo dei polmoni. Clinicamente, la maggior parte degli animali recuperati si trasforma in portatori sani del patogeno, cioè sviluppano un decorso latente di PSA. La patogenesi del decorso cronico della PSA ha alcune somiglianze con malattie come INAN, malattia del visone Aleutian, ecc. Questa somiglianza è espressa nella persistenza del virus, debole, se non completamente assente, attività di neutralizzazione del virus dei sieri e ipergammaglobulinemia . Quest'ultimo, a quanto pare, è dovuto alla costante stimolazione antigenica da parte di un virus persistente, poiché viene rilasciato dagli organi della maggior parte degli animali con infezione cronica e il suo titolo è correlato ad un aumento del livello di gammaglobuline e AT.

Negli ultimi 20 anni in Portogallo, Spagna, Angola e altri paesi, c'è stato un cambiamento nella forma di manifestazione della PSA: la mortalità è notevolmente diminuita, il numero di casi di infezione inapparente e portatori latenti è aumentato.

flusso latenteÈ tipico dei portatori naturali del virus: facoceri, maiali delle foreste e dei boschi in Africa e maiali domestici in Spagna e Portogallo. Clinicamente, questa forma non è espressa e si manifesta solo con viremia intermittente. Quando sono stressati, secernono il virus e infettano i maiali sani. Almeno 3 specie di suini selvatici trovati in Africa possono portare il virus della PSA senza segni clinici visibili della malattia. Tuttavia, se questo virus viene introdotto nei suini domestici, causerà una malattia febbrile iperacuta altamente contagiosa con esito fatale. I singoli individui che sopravvivono a questa forma della malattia sono generalmente resistenti a una dose massiccia di un ceppo omologo altamente patogeno. Sebbene nei sieri di questi suini convalescenti si possano rilevare titoli elevati di anticorpi specifici (CS, PA), il loro significato immunologico rimane poco chiaro. Tali animali sono quasi sempre cronicamente infetti, portando sia AT che virus nel sangue.

Nei suini morti per una forma acuta o subacuta della malattia, il grasso è conservato, il rigor mortis è pronunciato, la pelle della giogaia, la parte ventrale delle pareti addominali, la superficie interna delle cosce, lo scroto è arrossato o viola porpora. La cavità nasale e la trachea sono piene di un liquido schiumoso rosato. I linfonodi della carcassa e degli organi interni sono ingranditi, le superfici delle incisioni sono marmoree. Spesso sono di colore rosso scuro, quasi nero e assomigliano a un coagulo di sangue. La milza è ingrossata, di colore ciliegia o rosso scuro, di consistenza morbida, i suoi bordi sono arrotondati, la polpa è succosa, facilmente raschiata dalla superficie dell'incisione. I polmoni sono pletorici, ingrossati, di colore rosso-grigiastro. Il tessuto connettivo interlobulare è fortemente impregnato di essudato sieroso-fibrinoso e appare sotto forma di ampi filamenti che delimitano chiaramente i lobuli e i lobi polmonari. Spesso si trovano emorragie a fuoco piccolo sotto la pleura e focolai di polmonite catarrale. I reni sono spesso ingrossati, di colore rosso scuro, con emorragie chiazzate. La pelvi renale è edematosa, punteggiata di emorragie maculate. A volte le emorragie si trovano sullo sfondo dell'anemia dei reni. Il fegato è ingrossato, pletorico, dipinto in modo irregolare in un colore grigio-argilla. La mucosa della cistifellea è tumefatta, crivellata di emorragie petecchiali, queste ultime localizzate anche nella membrana sierosa. La mucosa del tratto gastrointestinale è arrossata, gonfia, in punti (soprattutto lungo le pieghe) con emorragie. In alcuni casi, le emorragie sono localizzate nella membrana sierosa dell'intestino crasso. I vasi del cervello sono pieni di sangue, midollo edematoso, con emorragie.

Nel decorso cronico della malattia, i cambiamenti patomorfologici si manifestano con un forte aumento dei linfonodi bronchiali e danno polmonare bilaterale. Il decorso asintomatico è caratterizzato dalla colorazione marmorea dei linfonodi portali o bronchiali e da lesioni polmonari focali. alterazioni istologiche. Nel decorso acuto e subacuto della malattia, l'emodinamica nei linfonodi e nella milza è bruscamente sconvolta a causa del gonfiore mucoso e della necrosi fibrinoide delle pareti dei vasi sanguigni; devastazione del tessuto linfoide e disgregazione cellulare per tipo di carioressi. Nel sistema nervoso centrale e negli organi parenchimali si notano alterazioni infiammatorie-distrofiche di varia gravità. Il virus IF e il suo AG si trovano nei macrofagi, nelle cellule reticolari, nei linfociti e nelle cellule di Kupffer, nei megacariociti e negli emocitoblasti degli strisci-impronte della milza, dei linfonodi, del midollo osseo, del fegato e dei polmoni di animali malati. Sono visibili inclusioni perinucleari.

In un decorso cronico, il processo patologico è localizzato principalmente nei linfonodi bronchiali e nei polmoni. Allo stesso tempo, vengono registrati i cambiamenti inerenti alla linfoadenite sieroso-emorragica e alla polmonite croupous-necrotica. È possibile la transizione dell'infiammazione alla camicia del cuore e al miocardio. Il decorso asintomatico della malattia di natura limitata si manifesta con iperemia irregolare dei linfonodi bronchiali o portali, polmonite focale sierosa-catarale o sieroso-fibrinosa. Nei suini malati, il virus provoca inizialmente iperplasia delle cellule linfoidi. Nel processo di riproduzione e accumulo, la maggior parte di essi (70-80%) muore in base al tipo di cariopiknosi e carioressi. In una coltura di cellule del midollo osseo e di leucociti del sangue suino, gli eritrociti vengono adsorbiti sulla superficie delle cellule infettate dal virus della PSA quando il titolo virale raggiunge 103,5-4,0 HAEzo/ml. Nella zona perinucleare delle cellule infette compaiono inclusioni, situate nei siti di sintesi del virus. Successivamente, le cellule infette si arrotondano, perdono il contatto tra loro e si sfaldano dal muro.

Patogenesi. IN In condizioni naturali, il virus entra nel corpo dei maiali attraverso la pelle e le mucose respiratorie, digestive, danneggiate. L'acido nucleico del virus induce una ristrutturazione del metabolismo cellulare e attiva gli enzimi idrolitici, con conseguente aumento della proliferazione delle cellule del tessuto linfoide. Le cellule in proliferazione forniscono un ambiente favorevole per la riproduzione del virus. Nel corpo, il virus si diffonde rapidamente attraverso i vasi sanguigni e linfatici, colpisce il tessuto linfoide, il midollo osseo e le pareti dei vasi sanguigni. La sua azione è aggravata dallo sviluppo di reazioni allergiche, manifestate da un aumento della quantità mastociti, eosinofili, nonché lo sviluppo di gonfiore mucoide e necrosi fibrinoide delle pareti vascolari.

Il virus della PSA si moltiplica nelle cellule dei tessuti linfoidi e reticoloendoteliali. Nel decorso acuto della malattia, deprime il sistema immunitario, distruggendo o modificando le funzioni delle cellule linfoidi, nei casi cronici o latenti, interrompe il rapporto tra le sottopopolazioni leucocitarie, la funzione dei macrofagi, la sintesi e l'attività dei mediatori di cellule immunità. Processi patologici che si sviluppano nella fase avanzata del decorso acuto della PSA (forte deterioramento condizione generale, aumento della permeabilità vascolare, emorragie multiple), nonché con un lungo decorso della malattia (polmonite necrotica cronica, infiltrazione tissutale con cellule linfoidi, necrosi cutanea, artrite, ipergammaglobulinemia) sono causati da processi iperergici, allergici e autoimmuni. I processi allergici e autoallergici svolgono un ruolo significativo nella patogenesi della PSA. Nel decorso acuto della malattia, le proprietà del sangue cambiano drasticamente (leucopenia, aumento dell'adesione dei leucociti, attivazione degli enzimi nel sangue e negli organi), gravi alterazioni degenerative nelle cellule RES, emorragie multiple a causa della ridotta permeabilità della parete vascolare, attivazione di fosfatasi e la scomparsa del glicogeno nel fegato.

Nel decorso cronico della PSA viene rilevata una manifestazione sistemica di una reazione allergica, che si trasforma in una malattia autoimmune con danni agli organi bersaglio. Nelle lesioni è stata riscontrata la deposizione di complessi antigene-anticorpo con fissazione del complemento. Durante il periodo di recidiva della malattia, vengono rilevati cambiamenti ciclici nel quadro del sangue bianco, danno autoimmune ai neutrofili e inibizione dell'attività fagocitaria. Nel decorso subacuto e cronico della PSA, si sviluppano spesso processi infiammatori locali estesi, chiamati formazioni tumorali, nel sito di reintroduzione del virus. Sono estesi rigonfiamenti nello spazio sottomandibolare e nel collo con un diametro fino a 30-40 cm, mentre il dolore e l'aumento della temperatura locale non sono espressi. Tuttavia, entro 12-14 giorni queste formazioni aumentano, accompagnate da un aumento della temperatura e da un deterioramento delle condizioni generali degli animali. Alla macellazione e all'autopsia di tali suini, vengono stabilite formazioni che non sono chiaramente limitate dai tessuti normali con grave edema lungo la periferia e necrosi nella parte centrale. Nei tessuti è stato stabilito l'accumulo del virus in forma non emoassorbente fino a 107,5 TCC50/ml e AG specifico rilevato in CSC e IF. L'esame istologico ha rivelato cambiamenti caratteristici dell'infiammazione iperergica: infiltrazione di tessuti con elementi linfoidi-istiocitici con una mescolanza di eosinofili, neutrofili e plasmociti.

Le reazioni infiammatorie-allergiche nel sito di reintroduzione del virus o del suo AG contribuiscono alla localizzazione del processo patologico. La sensibilizzazione allergica nella PSA può essere rilevata mediante test allergologici intradermici. Gli allergeni sono materiali contenenti virus concentrati, inattivati U- Raggi che vengono iniettati per via intradermica. Nel sito di iniezione dell'allergene negli animali infetti dal virus della PSA, dopo 24-48 ore, si sviluppa una reazione infiammatoria, accompagnata dall'infiltrazione dello strato di tessuto connettivo della pelle con cellule mononucleate, che si manifesta con iperemia e gonfiore da 10 a 40 mm di diametro. Una reazione allergica viene rilevata da 3 a 150 giorni dopo l'infezione nel 68,7% degli animali. Le informazioni di cui sopra suggeriscono che le reazioni allergiche o autoallergiche svolgono un ruolo significativo nella patogenesi e nell'immunogenesi della PSA.

Morfologia e composizione chimica. I virioni sono particelle arrotondate con un diametro di 175-215 nm, costituite da un nucleoide denso, un capside icosaedrico a due strati e un guscio esterno. Il nucleoide contiene DNA e proteine ​​ed è circondato da uno strato trasparente per gli elettroni. Il capside a doppio strato è costituito da capsomeri 1892-2172. L'involucro lipoproteico esterno dei virioni ha una struttura tipica e non è necessario per la manifestazione delle proprietà infettive del virus. C'è uno strato trasparente agli elettroni tra il guscio esterno e il capside. La densità galleggiante in CsCl è 1,19-1,24 g/cm3, il coefficiente di sedimentazione è 1800-8000S. L'infettività del virus persiste a 5 ° C per 5-7 anni, a temperatura ambiente - 18 mesi, a 37 °C - 10-30 giorni. Il virus è stabile a pH 3-10, sensibile ai solventi grassi e inattivato a 56°C per 30 minuti.

Le estremità del DNA sono legate in modo covalente e contengono ripetizioni invertite, simili a quelle del DNA dei poxvirus. Il DNA non è infettivo. 54 polipeptidi sono stati trovati nei virioni del virus della PSA. I virioni sono associati a diversi enzimi necessari per la sintesi dei primi mRNA.

Il virus della PSA si riproduce nel citoplasma delle cellule, ma per la sua riproduzione è necessaria anche la funzione del nucleo. Nelle cellule infette sono state trovate 106 proteine ​​virus-specifiche, di cui 35 sintetizzate prima della replicazione del DNA virale (proteine ​​precoci) e 71 dopo la replicazione del DNA (proteine ​​tardive). I virioni maturano nel citoplasma e acquisiscono un involucro esterno quando germogliano attraverso la membrana citoplasmatica. Il virus si moltiplica nel corpo dei maiali e delle zecche del genere Ornithodoros. Nei suini, il virus si replica nei monociti, nei macrofagi e nelle cellule reticoloendoteliali. Nelle zecche femminili, il virus persiste per più di 100 giorni, viene trasmesso per via transovariale e transfasica.

È noto che la penetrazione dei virus nel corpo è accompagnata dalla formazione di VNA. L'eccezione è principalmente il virus ASF. L'infezione da questo virus non induce la sintesi di VNA negli animali, sebbene KSA, PA e GA AT inibitori tipo-specifici siano rilevati nel siero del sangue. L'assenza di VNA comporta l'incapacità del corpo di legare ed eliminare il virus, che a sua volta porta a una mortalità eccezionalmente elevata negli animali infetti. D'altra parte, il noto fenomeno paradossale vanifica i tentativi di creare un vaccino efficace, poiché ceppi attenuati del virus provocano un decorso cronico della malattia nei suini e un prolungato trasporto del virus, molto pericoloso dal punto di vista epizootologico.

Il virus della PSA ha caratteristiche distinte di irido e poxvirus. È l'unico rappresentante di una famiglia unica. Il DNA codifica oltre 100 polipeptidi, di cui più di 30 sono stati trovati in preparazioni virali purificate. Numerose attività enzimatiche sono associate ai virioni, tra cui l'RNA polimerasi DNK-dipendente, l'attività della fosfatidrolasi, nonché la protein chinasi e la fosfatasi acida. L'RNA polimerasi DNA-dipendente si trova alla periferia del capside e l'idrolasi ATP si trova tra il capside e il nucleoide. Il capside è formato principalmente da polipeptidi con una mol. M. 73 e 37 kD. Al capside è associata anche una RNA polimerasi DNA-dipendente, coinvolta nelle fasi iniziali della riproduzione del virus. Il DNA è una struttura a due filamenti. M. 100-106 D, composto da 170 mila p. 58 nm di lunghezza con collegamenti terminali covalenti sotto forma di ripetizioni invertite di 2,7 mila bp.

Il virus della PSA ha una forma a 20 facce, la sua dimensione è di 175-215 nm, è ricoperto da un guscio di lipoproteine ​​​​a due strati, che ha affinità antigenica con i tessuti dell'ospite. Il prossimo è un capside a tre strati di capsomeri posizionati periodicamente, all'interno c'è una nucleoproteina di fitte fibrille contenenti DNA. La membrana superficiale e il capside contengono una grande quantità di lipidi. DNA del virus PSA pz. BA71V ha una lunghezza di 170101 bp. e 151 frame di lettura aperti. Il sequenziamento del DNA ha dimostrato che il virus della PSA occupa una posizione intermedia tra poxvirus e iridovirus e appartiene a una famiglia di virus indipendente. Sotto l'azione della restritasi ECo-R-l, sono stati rilevati 28 frammenti di DNA (valore 0,3-21,9 kD), che è il 96% dell'intera molecola, e 11-50 frammenti (0,3-76,6 kD) sono stati rilevati da altre restritasi. È stata ottenuta l'espressione di 16 frammenti di DNA in E. coli, la posizione di 80 siti è stata determinata mediante ibridazione molecolare ed è stata compilata una mappa della posizione dei frammenti. Sono state rivelate le differenze tra i singoli isolati e le varianti del virus, nonché il meccanismo e la sequenza di sintesi delle proteine ​​​​specifiche del virus, il loro ruolo nella patogenesi della malattia.

Secondo altri dati, nella composizione di virioni e cellule infette sono state trovate 28-37 proteine ​​​​specifiche del virus, secondo altri dati sono state registrate 100 proteine ​​​​specifiche del virus strutturali e 162 non strutturali con una massa di 11,5-245 kD. Sono stati identificati i principali polipeptidi (172, 73, 46, 36, 15, 12 kD), proteine ​​precoci e tardive, glicoproteine ​​(54, 34, 24, 5, 15 kD), è stata stabilita una relazione con le proteine ​​AT 25. Si ritiene che le proteine ​​​​precoci siano sintetizzate dalle sezioni terminali del DNA e quelle tardive dalla sua parte centrale. Le proteine ​​​​specifiche del virus nelle cellule infette si trovano come segue: nelle proteine ​​​​di membrana - 220, 150, 24, 14, 2 kD, nei viroplasti - 220, 150, 87, 80, 72, 60 kD, nel nucleo cellulare - 220, 150, 27 kD. È stato stabilito un certo ordine di posizione delle singole proteine ​​​​nel virione (a partire dalla superficie): 24, 14, 12, 72, 17, 37 e 150 kD. Sono state costruite mappe fisiche del DNA del ceppo virulento del virus ASF K-73 (sierotipo 2) e della variante avirulenta KK-262 da esso isolata, adattata alla coltura di cellule renali di maiale (PPK-666). Ogni ceppo ha la sua mappa fisica diversa del DNA, con una certa somiglianza. Le proteine ​​32 e 35 kD sono ceppo-specifiche. Il virione conteneva DNA polimerasi, protein chinasi e altri enzimi necessari per la sintesi precoce di strutture specifiche del virus.

Il virus della PSA è eterogeneo. Si tratta di una popolazione eterogenea costituita da cloni che si differenziano per emoassorbimento, virulenza, infettività, formazione di placche e proprietà antigeniche. Le proprietà biologiche del virus utilizzato per l'infezione sperimentale dei suini differiscono dagli isolati virali isolati successivamente dagli stessi suini. Nel 1991 è stato pubblicato un rapporto sui dati attuali sull'architettura della morfogenesi e sulla distribuzione dei polipeptidi strutturali nel virione della PSA. Sulla base del piano generale della struttura del virus della PSA, la localizzazione dei viroplasti nelle cellule infette, il virus è stato assegnato al gruppo degli iridovirus. R. M. Chumak ha ipotizzato l'origine ibrida del virus della PSA, i cui antenati erano virus del gruppo del vaiolo e uno degli iridovirus degli insetti. Secondo l'autore, questo virus dovrebbe essere assegnato a una famiglia separata, dove altri virus verranno assegnati in seguito.

A. D. Sereda e V. V. Makarov hanno identificato un glicopeptide specifico del virus della PSA. Tre polipeptidi glicosilati con una mol. M. 51, 56, 89 kD e tre componenti del guscio monocromatico radiomarcato con un mol. M. 9, 95, 230 kD, la cui natura biochimica non è stata chiarita. Cinque polipeptidi glicosilati indotti da virus con una mol. M. 13, 33, 34, 38, 220 kD sono stati identificati nelle cellule Vera infettate dal virus della PSA. Il polipeptide (110-140 kD) sembra essere direttamente correlato a GAD AG, la cui esistenza era stata precedentemente giudicata solo dal fenomeno GAD. Gli autori hanno mostrato che le proteine ​​oligosaccaridiche costituiscono circa il 50% della massa del polipeptide glicosilato (110-140 kD). La composizione lipidica del virus della PSA dipende dal sistema di coltura cellulare.

L'analisi di restrizione e l'ibridazione incrociata dei frammenti di restrizione hanno mostrato che il genoma dell'isolato del virus CAM/82 ASF non cambia durante il passaggio sui suini (per 20 passaggi) e nelle cellule di midollo osseo di maiale in coltura (per 17 passaggi). Il genoma del virus della PSA è abbastanza stabile durante la trasmissione del virus in condizioni naturali e sperimentali. Il confronto dei dati di mappatura fisica e delle proprietà biologiche dei ceppi virali della PSA ha permesso di ipotizzare che la regione terminale sinistra contenga regioni di DNA che sono direttamente correlate a manifestazioni del fenotipo del virus come la virulenza e l'immunogenicità. Questa ipotesi si basa sul fatto che nei ceppi avirulenti vi è una perdita di un'ampia porzione di DNA in questa regione, mentre negli isolati naturali la lunghezza della regione terminale sinistra è molto più significativa. Sulla base dei risultati ottenuti sono state costruite le mappe fisiche dei genomi dei ceppi di riferimento di ASFV di tutti e 4 i sierotipi ed è stata effettuata la certificazione dei ceppi vaccinali, che consente di controllare ulteriormente eventuali alterazioni del genoma. Utilizzando primer complementari alle sequenze nucleotidiche del gene strutturale della proteina VP2 di VASHF, è stato sviluppato un sistema di test per l'identificazione di VASHF mediante PCR. Il frame di lettura aperto B438L, situato sul frammento EcoRI-L del genoma del virus della peste suina africana (VALS), codifica una proteina di 438 residui con una mol. M. 49,3 kDa, con un motivo di attaccamento cellulare RGD e non omologa alle proteine ​​dei database. Il gene B438L viene trascritto solo nella fase avanzata dell'infezione da VALS. La proteina è stata espressa in Escherichia coli, purificata e utilizzata per ottenere un antisiero di coniglio che riconosce una proteina con una mole. M. 49 kD in cellule infette da VALS. Questa proteina è sintetizzata nella fase avanzata dell'infezione da tutti i ceppi VALV studiati, si trova nelle fabbriche virali citoplasmatiche ed è un componente strutturale dei virioni VASF purificati.

I genomi degli isolati del virus della peste suina africana isolati in Camerun nel 1982-1985 sono indistinguibili dall'analisi di restrizione. L'isolato CAM/87 differisce leggermente dagli isolati del 1982-1985. Tuttavia, sono state riscontrate differenze significative nel DNA dell'isolato CAM/86 utilizzando enzimi a 4 restrizione in 2 frammenti (all'interno della regione terminale destra e nella regione centrale).

Sostenibilità. Il virus della PSA è eccezionalmente stabile in un'ampia gamma di temperature e ambienti di pH, tra cui l'essiccazione, il congelamento e il decadimento. Può rimanere vitale a lungo nelle feci, nel sangue, nel terreno e su varie superfici: legno, metallo, mattoni. Nei cadaveri dei maiali viene inattivato non prima di 2 mesi, nelle feci - entro 16 giorni, nel suolo - entro 190 giorni e in frigorifero a -30-60 ° C - da 6 a 10 anni. I raggi del sole, indipendentemente dagli oggetti infetti (cemento, ferro, legno), inattivano completamente il virus PSA (st. Dolizi-74) dopo 12 ore e pz. Mfuti-84 - in 40-45 minuti. Nelle condizioni di un porcile a 24 ° C, l'inattivazione naturale del virus (pz. Dolizi-74) si è verificata in 120 giorni e pz. Mfuti-84 - in 4 giorni. La soluzione di formalina allo 0,5% si è rivelata ottimale per la disinfezione dei locali infetti. Il congelamento non influisce sull'attività biologica del virus, ma lo è stato iniziale danno del genoma. Il virus con percol è resistente alla DNasi dopo il congelamento a -20 ° C e -70 ° C e viene danneggiato a -50 ° C. L'essiccazione del virus senza uno stabilizzatore provoca la perdita della sua infettività.

La stabilità a lungo termine dell'agente patogeno nel sangue, negli escrementi e nei cadaveri viene presa in considerazione quando si pianificano misure veterinarie e sanitarie. Poiché il virus rimane vitale nei porcili infetti per 3 mesi, questo periodo corrisponde all'esposizione, dopodiché è consentita l'importazione di un nuovo lotto di suini. La stabilità del virus è influenzata dalla composizione e dal pH del mezzo in cui è sospeso, dal contenuto di proteine ​​e sali minerali, dal grado di idratazione e dalla natura del materiale contenente il virus in studio. A 5 °C rimane attivo per 5-7 anni, se conservato a temperatura ambiente - fino a 18 mesi, a 37 °C - 10-30 giorni. A 37 °C, la sua infettività è diminuita del 50% entro 24 H In un terreno con il 25% di siero e per 8 ore in un terreno senza siero. A 56 °C, una piccola quantità di virus è rimasta infettiva per più di 1 ora, quindi un'inattivazione del siero di 30 minuti a 56 °C utilizzata nella pratica non è sufficiente per distruggere l'agente patogeno.A 60 °C, è stata inattivata entro 20 minuti. e in ambiente alcalino. La maggior parte dei disinfettanti (creolino, lisolo, soluzione di NaOH 1,5%) non lo inattivano. Il massimo effetto virucida su di esso è esercitato dai preparati cloroattivi (soluzione di cloramina al 5%, ipocloriti di sodio e di calcio con 1 -2% di cloro attivo, candeggina) con un'esposizione di 4 ore.L'idrossido di sodio sotto forma di una soluzione al 3% è consigliato per la disinfezione solo a caldo (a una temperatura di 80-85 ° C).Durante la disinfezione, prestare particolare attenzione è pagato per un'accurata pulizia meccanica e risciacquo con acqua calda, poiché la materia organica del letame può ridurre l'efficacia della disinfezione.

struttura AG. È complesso con il virus. L'agente eziologico contiene antigeni GAD di gruppo KS-, precipitanti e tipici. Sono state trovate proteine ​​​​leganti il ​​​​DNA, comprese quelle maggiori e minori con una mol. M. da 12 a 130kD. Il loro numero totale raggiunge i 15, di cui 7 strutturali. Le proteine ​​​​P14 e P24 si trovano alla periferia del virione e P12, P17, P37 e P73 - nello strato intermedio; è stata scoperta la proteina P150, una delle principali proteine ​​virali, che si trova nel nucleoide o in uno dei vertici (angoli) del virione. Tutte le cellule eucariotiche hanno una proteina speciale, costituita da sostanze di residui amminoacidici e legate in modo covalente a varie proteine ​​cellulari (ad esempio, l'istone). Questa connessione è fornita dall'enzima di configurazione dell'ubiquitina UBS. Una delle proteine ​​codificate dal virus della PSA è in grado di attivare l'ubiquitina.

Le domande sulla natura dell'ipertensione infettiva che induce la formazione di VNA sono ancora aperte. La situazione è diversa con gli AG che inducono la formazione di AT che ritardano l'emoassorbimento. I sieri con proprietà anti-HAD sono ampiamente utilizzati da tutti i ricercatori che studiano il problema della PSA. Polipeptidi con una mol. M. 120, 78, 69, 56, 45, 39, 28, 26, 24, 16 e 14 kD sono rilevati più intensamente su elettroforegrammi e immunoblotogrammi di preparati di virus ASF purificati. Una miscela di proteasi e lipasi pancreatica a basse concentrazioni rimuove i polipeptidi da queste preparazioni con una mol. m 120 e 78 kD, in concentrazioni medie - polipeptidi con una mol. M. 69, 56, 45, 39, 28 e 14 kD, in alte concentrazioni - un polipeptide con una mol. M. 26 kD. Polipeptide con mol. M. 21 kDa, che non ha reagito nell'immunoblot con siero antivirale specifico, era resistente all'azione combinata di proteasi e lipasi. Il trattamento del virus con Triton X-100 ed etere ha portato ad un aumento dell'attività della RNA polimerasi DNA-dipendente associata al virus e il trattamento con etere e la successiva riprecipitazione hanno portato a una significativa diminuzione dell'attività nella preparazione precipitata. Il trattamento del virus con etere non ha influenzato la sua attività. Sulla base dei risultati ottenuti e dei dati della letteratura, è stato proposto uno schema per la disposizione dei polipeptidi e degli enzimi virali nella struttura del virione.

Variabilità e parentela dell'AG. Sulla base del ritardo di emoadsorbimento, sono stati identificati due gruppi AG A e B (tipi) e un sottogruppo C del virus della PSA. All'interno dei gruppi A, B e del sottogruppo C, sono stati identificati molti sierotipi di questo patogeno. Due gruppi genetici (CAM/88 e CAM/86) del virus della peste suina africana isolati in Camerun causano segni clinici e lesioni simili nei suini domestici. 3-6 giorni dopo l'infezione, si sviluppano febbre, perdita di appetito, letargia, perdita di coordinazione, tremore, diarrea e mancanza di respiro. C'è iperemia dei polmoni e comparsa di emorragia nei reni e nei linfonodi viscerali. I titoli virali nei suini infettati con isolati di gruppi diversi non differivano statisticamente.

Con l'aiuto di test immunologici e RZGA, sono stati stabiliti 7 ceppi di riferimento di ciascun gruppo: L-57; L-60; Hinde-2; Rodesia; Dakar; 2743; Mozambico. I ceppi di riferimento includono - pz. hindi; N. 2447; 262; Magadì; Spencer; L-60 e Rhodesia. L'immunoblotting MAB ha rivelato 6 gruppi e l'analisi di restrizione ha rivelato 4 gruppi e 3 sottogruppi. Questo è un pezzo di riferimento. Uganda, Spencer, Tengani, Angola, L-60, E-75. Esistono segnalazioni di elevata variabilità del virus della PSA in termini di antigenicità, virulenza e altre proprietà, nonché dell'esistenza di popolazioni miste, difficili da attenuare. Ad esempio, pz. Kerovara-12, isolato da un facocero in Tanzania, mostra la tipica eterogeneità della popolazione PSA. Le caratteristiche del virus sono correlate ai processi patologici e immunologici nel corpo dei suini infetti. La maggior parte degli isolati isolati durante l'epizoozia dai maiali domestici in Africa presentava vari GA AG. Gli isolati passati in vivo nei macrofagi suini cambiano più velocemente e più profondamente rispetto a quando sono passati nelle cellule Vero. Negli isolati africani, P150, P27, P14 e P12 si sono rivelate le proteine ​​​​più variabili, negli isolati non africani - P150 e P14, la proteina P12 non cambia e P72 - l'AG principale - era stabile quando diagnosticata con EL1SA . Le differenze AH tra i ceppi del virus della PSA non possono essere determinate utilizzando la fase solida ELISA, RDP e IEOP, poiché questi metodi rivelano solo AG comune per tutti i ceppi del virus ASF. Questo può essere fatto solo esaurendo l'antigene ASFV in coltura con siero eterotipico. Come si può vedere dai fatti di cui sopra, la pluralità sierologica e immunologica del virus della PSA è una delle sue principali proprietà.

Localizzazione del virus. Il virus si trova in tutti gli organi e tessuti di animali malati. Appare nel sangue durante l'aumento iniziale della temperatura e vi si trova fino alla morte dell'animale in titoli da 103 a 108 GAd5o / ml - Nel decorso cronico della malattia, il titolo del virus nel sangue diminuisce rapidamente, la viremia è intermittente. In assenza di viremia, può persistere a lungo (fino a 480 giorni) nella milza e nei linfonodi. L'esatta localizzazione del virus nel decorso latente della malattia non è stata stabilita. Negli organi inizialmente infetti (tessuto linfoide nella faringe), il virus è rimasto in un titolo di circa 107 HAD50L fino alla morte dell'animale. I suoi titoli più alti (10s) sono stati osservati in tessuti contenenti un gran numero di elementi reticoloendoteliali: la milza, midollo osseo, fegato, che è coerente con il rilevamento di lesioni significative in questi tessuti. Il sito principale di localizzazione del virus sono le tonsille. La sua presenza nei leucociti dal 1° giorno di infezione indica che l'agente patogeno viene introdotto in altri tessuti dai leucociti. La comparsa del virus nella milza e nel midollo osseo dopo 2 giorni e il rapido aumento del titolo del virus in questi tessuti suggerisce che essi siano la sede della riproduzione secondaria del patogeno.

Dal corpo degli animali infetti, il virus si diffonde nel sangue, nelle escrezioni nasali, nelle feci, nelle urine, nella saliva e, probabilmente, attraverso i polmoni con l'aria espirata. Nella maggior parte degli animali sopravvissuti, il portatore del virus è quasi per tutta la vita. Periodicamente, il virus può essere isolato dal sangue, dai linfonodi, dai polmoni, dalla milza. È difficile isolarlo da altri tessuti. La diffusione del virus avviene 2-4 giorni dopo l'inizio della febbre. I fattori di stress contribuiscono all'esacerbazione dell'infezione e al rilascio del virus nell'ambiente esterno. Allo stesso tempo, la stagionalità dell'escrezione del virus è associata al parto. Nelle zecche Ornithodoas, il virus della PSA si moltiplica nell'intestino e poi si diffonde alle ghiandole salivari e agli organi riproduttivi. Le zecche possono rimanere persistentemente infette e trasmettere il virus fino a 3 anni; insieme ai facoceri, creano un serbatoio permanente del virus per i maiali domestici. Le zecche sono in grado di trasmetterlo transovarialmente e transpha-zovo. La concentrazione del virus nelle zecche è più alta che nei suini portatori di virus.

Attività AG. Nei sieri dei convalescenti compaiono SC che precipitano e trattengono GAd AT, che non influenzano la CPP del virus. PA e KSA non sono specifici per tipo, sono comuni a tutti gli individui, mentre gli AT che inibiscono GAd sono strettamente specifici per tipo e vengono utilizzati per la tipizzazione del virus ASF. KSA e PA non sono associati alla formazione dell'immunità. I BHA non si formano, ma un meccanismo mediato da AT opera in difesa. Questi anticorpi sono attivi in ​​due sistemi: UN) In vitrocitotossicità cellulare anticorpo-dipendente; b) lisi dipendente dal complemento. I sieri degli animali convalescenti trattengono specificamente il GAD nelle colture infettate con il virus omologo della PSA. Il titolo di tale AT raggiunge il suo massimo 35-42 giorni dopo la guarigione clinica degli animali. Il virus della PSA non provoca la formazione di VNA e le componenti umorali della risposta immunitaria non ne hanno di grande importanza. L'incapacità di produrre VNA contro il virus della PSA è probabilmente dovuta alle proprietà del patogeno stesso.

Interazione del virus con AT. Uno dei motivi della scarsa conoscenza dell'immunologia della PSA è la mancata neutralizzazione del virus AT, proprietà principale di altri virus che sono stati la base tradizionale per studiarne l'immunogenicità fin dalla scoperta delle reazioni sierologiche. A questo proposito, esiste un solo analogo zoopatogeno: il parvovirus della malattia aleutina dei visoni, ma è anche nota la scarsa capacità di neutralizzare i rappresentanti tipici degli iridovirus. Sono stati fatti molti tentativi per studiare questo fenomeno unico, ma nessuna spiegazione soddisfacente è stata ancora offerta; Esistono molte versioni: dall'assenza di glicoproteine ​​​​del virione al mimetismo antigenico e all'eterogeneità. Nel tentativo di chiarire questo problema, gli autori hanno studiato passo dopo passo i risultati dell'interazione del virus con l'AT, il virus con le cellule sensibili in coltura e il complesso virus + AT con le cellule sensibili. È stato dimostrato che il complesso immunitario (AG+AT) penetra liberamente nelle cellule sensibili e il virus conserva la sua attività riproduttiva originaria. Nella PSA, la neutralizzazione del virus in vitro è accompagnata dall'effetto opposto: aumento della riproduzione virale e patologia estesa dovuta alla diffusione di monociti macrofagici infetti.

La questione dell'interazione del virus della PSA con l'AT necessita di ulteriori studi sperimentali. Negli animali nativi sieropositivi, CSA e PA specifici si trovano nel sangue in titoli fino a 1:128 e 1:64, rispettivamente. Anticorpi specifici nel sangue dei suinetti compaiono solo dopo aver assunto il colostro da scrofe sieropositive. Il livello di AT nel colostro era uguale o superiore alla loro concentrazione nel sangue.

infezione sperimentale. Gatti, cani, topi, ratti, conigli, polli, piccioni, pecore, capre, bovini e cavalli sono immuni all'infezione sperimentale. Nelle zecche argasidi sperimentalmente infette Ornithodoros turicata, il virus è stato rilevato mediante saggio biologico durante l'anno. Nell'intestino della zecca è stata stabilita la prima e più lunga presenza del virus. La sua rapida distribuzione e replicazione in altri tessuti avviene attraverso l'emolinfa. Già 24 ore dopo l'infezione. AH è stato rilevato utilizzando MFA. Dopo 2-3 settimane, il virus è stato trovato negli emociti e, entro la 6-7a settimana, nella maggior parte dei tessuti.

Coltivazione. Per la coltura del virus della PSA possono essere utilizzate scrofette di 3-4 mesi di età, che vengono infettate con qualsiasi metodo. Più spesso, vengono infettati per via intramuscolare alla dose di 104-106 HAd50 Con lo sviluppo dei sintomi clinici della malattia il 4-6 ° giorno dopo l'infezione, gli animali vengono uccisi e il sangue e la milza vengono utilizzati come materiale contenente virus, in che il virus accumula in un titolo di 106-8 HAd50 I tentativi di coltivare il virus ASF non hanno avuto successo in altre specie animali.

Le colture dei leucociti del sangue e dei macrofagi del midollo osseo dei suini erano sensibili al virus. Le cellule vengono solitamente infettate il 3-4° giorno di crescita alla dose di 103 HAD del virus per 1 ml di terreno nutritivo. Dopo 48-72 ore, si accumula nelle colture cellulari nel titolo JO6-7 5 HAD 50/ml - Il virus della PSA ha infettato la maggior parte dei macrofagi (monociti), se non tutti, quindi solo circa 4 % Leucociti polimorfonucleati nel sangue periferico. I linfociti B e T, che sono a riposo o stimolati con PHA, liposaccaride o mitogeno della fitolacca americana, non sono suscettibili al virus. Quest'ultimo si replica esclusivamente nei macrofagi e si trova nei titoli più alti negli eritrociti suini. Entra nella cellula principalmente in modo indipendente dal recettore, la sua replicazione avviene nel citoplasma, ma per i processi sintetici è necessaria la partecipazione del nucleo. È possibile l'infezione con più di una particella del virus, il che implica la presenza di molte delle sue sottopopolazioni in una cellula e la loro interazione. Il numero di cellule contenenti AG sulla superficie raggiunge il suo livello massimo dopo 13-14 ore. Una grande quantità di materiale specifico del virus inutilizzato, avente una struttura a membrana, cilindrica o eccentrica, rimane nelle cellule infette. Si presume che i loro gusci contengano GAD AG.

Il virus si moltiplica nelle colture di leucociti e midollo osseo dei suini con lo sviluppo di GAD e CPP senza adattamento. Alla dose ottimale di infezione, GAd si manifesta dopo 18-24 ore, CPP - dopo 48-72 ore ed è caratterizzata dalla formazione di inclusioni citoplasmatiche, seguita dalla fuoriuscita del citoplasma e dalla comparsa di cellule giganti multinucleate (cellule ombra) . Entra nelle cellule CV-1 o Vero mediante endocitosi adsorbente o endocitosi mediata da recettori. La "spogliatura" dei virioni avviene negli endosomi o in altri organelli vescicolari intracellulari acidi. Quando la PSA viene incubata con cellule mononucleate del sangue periferico suino, inibisce la risposta proliferativa dei linfociti alla fitoemoagglutinina e ad altre lectine. Si ritiene che questa inibizione sia indotta da frazioni solubili rilasciate dalle cellule mononucleate periferiche dopo la co-incubazione con il virus. L'HAD del virus nelle colture infette è così specifico che viene utilizzato come test principale nella diagnosi della malattia. In altri tipi di colture cellulari, il virus non si moltiplica senza un precedente adattamento. È adattato a numerose colture omo ed eterologhe: linee cellulari continue di rene di maiale (PP e RK), rene di scimmia verde (MS, CV), cellule Vero di rene di macaco, ecc. In letteratura, si presta poca attenzione a l'effetto dei componenti dei carboidrati, che possono dal 50 al 90% della massa delle glicoproteine, sull'immunogenicità del virus: uno dei motivi della debole immunogenicità della glicoproteina avvolta (gp 120) del virus dell'immunodeficienza (HIV) è quel 50 % La sua massa è dovuta all '"atmosfera" degli zuccheri, che possono svolgere un ruolo negativo, impedendo, ad esempio, all'AT di accedere al sito di fissazione sull'involucro dell'HIV, ovvero le aree vitali dell'HIV sono protette "chimicamente" dall'azione sistema immunitario. È possibile che la presenza di proteine ​​altamente glicosilate sulla superficie dei virioni possa essere la ragione della non neutralizzazione del virus della PSA. La coesistenza di componenti glicosilati di natura sconosciuta nell'involucro dei virioni della PSA è stata segnalata da Mudel Wahl et al nel 1986.

La presenza di tali componenti sulle membrane cellulari può anche contribuire alla fuga da altri meccanismi effettori del sistema immunitario dell'ospite e aumentarne la patogenicità. Lo studio della localizzazione subcellulare e dell'attività della transpreniltransferasi del virus della PSA nelle cellule infette ha mostrato che l'enzima è una proteina di membrana integrale e mostra l'attività della geranilgeranildifosfato sintasi feniltransferasi nelle frazioni di membrana, un aumento di 25 volte nella formazione di geranilgeranildifosfato nelle cellule infette. Pertanto, la proteina legata alla membrana sintetizza prevalentemente sintetasi trans-GGDP. caratteristiche di riproduzione. I metodi di ibridazione in situ, autoradiografia e microscopia elettronica sono stati utilizzati per studiare l'organizzazione ultrastrutturale della replicazione DNA Virus della PSA nelle cellule Vera infette. In una fase iniziale della sintesi del DNA virale, forma focolai densi nel nucleo vicino alla membrana nucleare e in una fase successiva è esclusivamente nel citoplasma. La sedimentazione in un gradiente di concentrazione di saccarosio alcalino ha mostrato che in una fase iniziale, piccoli frammenti di DNA (= 6-12 S) si trovano nel nucleo e, in una fase successiva, frammenti più lunghi (= 37-46 S) sono etichettati nel citoplasma. L'etichettatura del polso ha mostrato che questi frammenti sono precursori del DNA virale reticolato maturo.

Nelle fasi intermedie e tardive sono state riscontrate forme testa a testa. Questi dati suggeriscono che la replicazione del DNA del virus della PSA segue un meccanismo di avvio de novo con la sintesi di brevi frammenti di DNA, che poi si trasformano in lunghi frammenti. La ligazione o l'allungamento di queste molecole dà strutture a due unità con estremità dimeriche, che possono generare genomica DNA Come risultato della formazione di una rottura, riarrangiamenti e legatura a singolo filamento specifici del sito. I metodi biochimici per l'analisi dell'assemblaggio, dell'assemblaggio e della formazione dell'involucro del capside del virus della PSA sono stati utilizzati per studiare i processi cellulari che sono importanti per avvolgere il virus nelle cisterne della membrana. L'assemblaggio del capside ASFV sulle membrane del reticolo endoplasmatico (ER) e l'avvolgimento della cisterna ER è inibito quando l'ATP o il calcio sono esauriti a seguito dell'incubazione con A23187 ed EDTA o con taxiharpina, un inibitore dell'ATPasi del calcio ER. Il metodo EM ha dimostrato che le cellule prive di Ca non possono assemblare particelle VASF icosaedriche. Invece, i siti di assemblaggio contengono strutture a pettine o bulbose, in rari casi, strutture 5-gonal chiuse vuote. Il reclutamento della proteina del capside VALS dal citosol alle membrane ER non richiede riserve di ATP o Ca2+. Tuttavia, le fasi successive dell'assemblaggio del capside e della formazione del guscio dipendono dall'ATP e sono regolate dal gradiente di Ca2+ nelle cisterne della membrana dell'ER.

Proprietà GA e GAd. Il virus non ha proprietà GA. Quando lo moltiplichi in vitro nelle colture di leucociti o cellule del midollo osseo dei suini si osserva il fenomeno dell'adsorbimento degli eritrociti sulla superficie delle cellule colpite. Gli eritrociti si attaccano alla parete del leucocita, formando una caratteristica corolla attorno ad esso e talvolta chiudendo la cellula da tutti i lati, per cui i leucociti colpiti sembrano un gelso. Il tempo di comparsa di HAD dipende dalla dose inoculata del virus e può comparire già dopo 4 ore, ma nella maggior parte dei casi - dopo 18-48 ore e con bassi titoli virali - dopo 72 ore Con un aumento del tempo di incubazione, il numero di cellule colpite aumenta, quindi iniziano a scomparire e si manifesta la CPD del virus. La sensibilità di RGAD dipende dalle proprietà del virus e dal grado del suo accumulo nella coltura cellulare infetta. Si rileva al microscopio ottico quando il titolo di infettività nella coltura non è inferiore a 104 LD50/ml - Secondo alcuni autori, il tempo di insorgenza dell'HAD dipende dal titolo virale presente nel campione di materiale in esame. Una diminuzione del titolo del virus ASF comporta una diminuzione della sensibilità di RAd. A tal proposito, in alcuni casi, si rende necessario condurre fino a tre passaggi seriali "ciechi" consecutivi del virus nella coltura dei leucociti o del midollo osseo al fine di confermarne la presenza nel materiale di prova nel caso della variante HAD .

A volte vengono isolati ceppi del virus non emoadsorbenti, che hanno solo proprietà citopatogene pronunciate. Quando li passavano nella coltura cellulare almeno 50 volte e infettavano i maiali, l'emoassorbimento non veniva ripristinato. In Sud Africa, un ceppo non emoadsorbente è stato isolato da suini domestici durante un'epizoozia naturale. Successivamente, una variante non emoassorbente è stata isolata lì da sospensioni di acari O. moubata raccolti in focolai di infezione.

Poiché la GAD specifica caratterizza la virulenza dei ceppi di PSA, l'isolamento di virus meno virulenti non emoassorbenti da suini con polmonite cronica è di grande interesse. Tuttavia, singoli isolati o cloni non emoassorbenti possono essere altamente virulenti. Il meccanismo della reazione GAD, così come la localizzazione degli AG responsabili del GAD, non sono stati stabiliti. Il ruolo delle membrane esterne dei virioni nel loro legame con gli eritrociti è importante, poiché i virioni che non hanno membrane non vengono adsorbiti sugli eritrociti. Gli antigeni coinvolti nel GAD sono localizzati negli involucri dei virioni originati dalle membrane citoplasmatiche delle cellule ospiti.

La PSA alla manifestazione iniziale di solito procede in modo acuto e subacuto con la morte fino al 97% della popolazione suina. Nelle fattorie isolate in condizioni tropicali, la causa dei focolai secondari sono i maiali malati, portatori latenti dell'agente patogeno. Pertanto, il virus della PSA in Congo circola tra gli animali locali sotto forma di una popolazione non emoassorbente difficile da rilevare, senza causare alcun sintomo visibile della malattia e creando un background immunitario positivo nei suini locali. Un'indagine epidemiologica sulla popolazione suina locale indica che, in determinate condizioni, i suini domestici autoctoni, in quanto serbatoi del virus in natura, svolgono un ruolo significativo nell'epizootologia della PSA. Negli animali nativi sieropositivi, KSA e PA specifici si trovano nel sangue in titoli fino a 1:128 e 1:64, rispettivamente.

Per studiare la formazione dell'immunità passiva sono stati condotti esperimenti con suinetti di diverse età ottenuti da animali sieropositivi. Nel sangue dei feti non ancora nati, così come nei suinetti senza colostro, erano assenti AT specifici. Inoltre, il virus non è stato isolato da questi animali. L'AT specifico nel sangue dei suinetti è comparso solo dopo l'assunzione di colostro da scrofe sieropositive. La dinamica dell'AT specifico nel sangue di 82 suinetti di scrofe sieropositive è stata tracciata su un periodo di 5 mesi. Nell'infezione di controllo di suinetti di 2-5 mesi, nel cui sangue CSA e PA sono stati trovati rispettivamente in titoli di 1:16-1:32 e 1:2-1:4, tutti gli animali sono morti con segni clinici di PSA. I suinetti sieropositivi della stessa età in contatto con loro erano resistenti all'infezione.

Il virus della PSA può persistere sia nei suini suscettibili che in vitro nelle colture cellulari. Negli ambienti africani, i maiali domestici possono essere infettati attraverso il contatto con facoceri selvatici (Phaco choerus) e maiali selvatici (Patomochoerus), nei quali provoca un'infezione latente. Gli acari Argas O. moubata porcinus sono un serbatoio naturale e un portatore del virus della PSA. Le zecche Ornithodorina (portatrici del virus ASF) possono vivere per 9 anni, il virus ASF persiste a lungo nella loro popolazione. O. turicata si trova in Nord America a Uta, Colorado, Kansas, Oklahoma, Texas, New Mexico, Arizona, California e Florida. Le zecche possono migrare fino a 8 km dal loro habitat. Oltre a O. turicata, il virus della PSA può essere trasmesso anche da specie di zecche sferraglianti: O. puertoriceusis, O. tolaje, O. dugersi.

È stata stabilita la stabilità del virus nelle zecche morte, nonché la sua riproduzione e persistenza nel 70-75% delle zecche per 13-15 mesi. Gli artropodi ottengono il virus succhiando animali malati durante il periodo della viremia. Il virus si moltiplica negli artropodi, che hanno un lungo periodo di persistenza, e infine gli acari lo trasmettono ai suini sani durante l'alimentazione. La PSA è stata isolata dal fluido coxale, dalla saliva, dagli escrementi, dai vasi malpighiani e dall'essudato genitale di zecche infette naturalmente e sperimentalmente, nonché da uova e neanidi del primo stadio di femmine infette. Pertanto, in questa specie di zecca è possibile la trasmissione transovarica e transspermale del virus. Ciò contribuisce al mantenimento e alla circolazione del virus nella popolazione, anche in assenza di contatti regolari dei portatori con animali infetti. È sufficiente portare l'agente nella popolazione di zecche una volta e la sua circolazione avviene, indipendentemente dal contatto di questa popolazione con animali sensibili in futuro. A causa della lunga durata della vita delle zecche (10-12 anni), il focus della malattia, se si verifica, può esistere per un tempo indefinitamente lungo. Nelle aree in cui ciò è avvenuto, la possibilità di eradicare la PSA appare dubbia.

Pertanto, la via principale per la rapida diffusione dell'agente patogeno e l'emergere di nuovi focolai della malattia è probabilmente alimentare. La via respiratoria contribuisce alla sua diffusione all'interno del fuoco epizootico e la via trasmissibile contribuisce alla creazione di focolai naturali persistenti. A causa della stretta relazione biologica tra il virus e gli acari argasidi, può esistere un focolaio naturale senza reintroduzione del virus per un periodo indefinito. Sebbene il ceppo Malawi Lil20P (MAL) del virus AHS sia stato isolato dalle zecche Ornithodorus sp., i tentativi di infettare sperimentalmente queste zecche alimentando il ceppo MAL non hanno avuto successo. 10 popolazioni di zecche O. porcinus porcinus e una popolazione di zecche O. porcinus domesticus sono state alimentate con VALS MAL. A 10 giorni dall'infezione, meno del 25% delle zecche conteneva ASFV. In oltre il 90% degli acari, VALS non è stato rilevato 5 settimane dopo l'inoculazione. Dopo l'inoculazione orale di VAS MAL agli acari O. porcinus porcinus, il titolo VALS è diminuito di 1000 volte dopo 4-6 settimane ed è sceso al di sotto del limite di rilevamento. Tuttavia, dopo l'inoculazione dell'isolato VALS Pretoriuskop/90/4/l (Pr4), il titolo VALS è aumentato di 10 volte dopo 10 giorni e di 50 volte dopo 14 giorni. Nell'intestino medio delle zecche inoculate con ASFV, è stata trovata l'espressione di geni virali precoci ma non tardivi e non è stata osservata alcuna sintesi del DNA di ASFV.

I virioni della progenie sono raramente presenti nelle zecche dopo l'inoculazione orale con VALS. Se sono presenti, sono associati a una forte citopatologia delle cellule epiteliali fagocitiche dell'intestino medio (MEC). Con la somministrazione parenterale di VALS MAL, si instaura un'infezione persistente nell'emocele, ma si osserva una generalizzazione ritardata di MAL e il suo titolo nella maggior parte dei tessuti è 10-1000 volte inferiore rispetto a dopo l'infezione con VALS Pr4. L'analisi ultrastrutturale ha mostrato che MAL VALS si replica in molti tipi di cellule, ma non negli EXSC, e Rg4 VALS può replicarsi negli EXSC. Pertanto, la replica MAL VALS è limitata nei tick ESC.

La PSA in Madagascar è stata confermata mediante PCR e sequenziamento nucleotidico dopo l'isolamento del virus. Dopo l'inoculazione dei leucociti, non è stato osservato emoadsorbimento o CPE, ma la replicazione virale nelle cellule è stata confermata mediante PCR. La determinazione del genoma virale della PSA è stata effettuata mediante amplificazione di una regione altamente convertita che codifica per la proteina p72. È stata trovata un'identità del 99,2% tra i ceppi di Maladasi e il virus isolato nel 1994 durante un focolaio in Mazambika. Sono stati condotti studi sierologici su 449 campioni di siero, di conseguenza è stato riscontrato che solo il 3-5% dei sieri isolati dai suini tra il 1996 e il 1999. erano positivi.

In condizioni naturali, i maiali domestici e selvatici sono malati di peste africana. In alcuni maiali selvatici africani, la malattia è subclinica. Tali animali rappresentano un grande pericolo per i maiali di razze culturali. In natura esiste un circolo vizioso di circolazione di questo virus tra cinghiali portatori del virus e zecche (genere Ornithodorus). Il virus della PSA è una popolazione eterogenea costituita da cloni con diverse caratteristiche biologiche in termini di GAD, virulenza, infettività, dimensione della placca e proprietà antigeniche. La virulenza di un isolato è determinata dalla virulenza del clone dominante nella popolazione e non dalla quantità di virus introdotto. Il passaggio degli isolati del virus della PSA nei suini e nella coltura cellulare Vero può portare a un cambiamento nel rapporto tra diversi cloni nella popolazione virale ea un cambiamento in tutte le sue caratteristiche. Le proprietà colturali e virulente del patogeno della PSA vengono modificate durante il decorso naturale dell'epizoozia e durante la selezione sperimentale. Le proprietà colturali e di virulenza del virus della PSA sono estremamente labili: può perdere la sua capacità HA, ridurre la sua virulenza, fino alla sua completa perdita, durante l'evoluzione naturale di un'epizoozia e in un esperimento quando passa in colture tissutali.

Immunità e profilassi specifica. Le reazioni allergiche o autoallergiche svolgono un ruolo significativo nella patogenesi e nell'immunogenesi della PSA. Sotto l'azione di ceppi virali attenuati sulle cellule linfoidi, vengono sintetizzati AT difettosi, incapaci di neutralizzare il virus. Si formano complessi antigene-anticorpo, che si concentrano nei tessuti degli organi bersaglio, portando a una violazione delle loro funzioni e allo sviluppo di processi allergici e autoimmuni; osservano la stimolazione dell'immunità cellulare - la lisi delle cellule infette da parte dei linfociti sensibilizzati, il rilascio di mediatori dell'immunità cellulare: linfotossina, il fattore di inibizione della migrazione della trasformazione blastica, ecc. Lo sviluppo di questi processi dipende dalle proprietà biologiche del ceppi utilizzati e le caratteristiche individuali dell'organismo (stato del sistema immunitario).

Un certo ruolo nella patogenesi della malattia è svolto dall'interazione del virus con gli eritrociti e da una violazione del meccanismo di coagulazione del sangue. L'effetto del virus sulle cellule del sistema linfoide e degli eritrociti è caratterizzato dalla loro distruzione o cambiamento di funzione, nonché dallo sviluppo di processi allergici e autoimmuni.

Gli animali che sono stati ammalati o vaccinati (con materiale inattivato o virus attenuato) hanno un certo grado di resistenza all'isolato omologo del virus (ritardo nella morte dei suini), un cambiamento nella gravità dei segni clinici della malattia, guarigione e una completa mancanza di risposta per controllare l'infezione). La mancanza di una protezione specifica contro gli isolati isolati in altre aree indica le loro differenze immunologiche e di AH.

S. Anderson ha osservato il trasporto a lungo termine del virus e il suo attecchimento dopo la reinfezione in animali recuperati e vaccinati. L'immunità passiva e colostrale è debolmente espressa. AT non neutralizza sufficientemente il virus. Le ragioni della debole tensione immunitaria, così come l'attività neutralizzante dell'AT, sono associate alle caratteristiche della struttura antigenica del virus (blocco dell'antigene da parte dei lipidi, competizione o mascheramento dell'antigene protettivo da parte dell'antigene della specie del virus o ospite), nonché con un cambiamento nella funzione delle cellule linfoidi - una violazione dell'interazione del virus e dell'antigene con i macrofagi e la cooperazione di quest'ultimo con i linfociti T e B. La prima ipotesi è supportata da una risposta debole o alterata ai farmaci antigenici inattivati ​​sia nelle specie animali suscettibili che in altre. In condizioni di bassa attività AT, le risposte immunitarie cellulari sono potenziate, che sono essenziali per bloccare l'infezione e causano anche lo sviluppo di ipersensibilità di tipo ritardato, complicanze allergiche e autoimmuni.

Il processo di protezione nella PSA si presenta come un equilibrio dinamico tra fattori eziologici (virus) e meccanismi di difesa immunitaria. Può essere predominante in entrambe le direzioni, dipende dalle proprietà dei ceppi applicati e dallo stato del sistema immunitario dell'animale. Non esistono farmaci profilattici affidabili contro la PSA. Nessuno è riuscito a ottenere vaccini inattivati ​​contro la PSA con metodi classici utilizzando metodi moderni. La maggior parte degli animali vaccinati è morta durante l'infezione di controllo e solo una parte insignificante di essi è sopravvissuta dopo una lunga malattia. I risultati del test di un vaccino inattivato suggeriscono che la struttura dell'AG e la loro interazione reciproca, e non lo stato del sistema immunitario del macroorganismo, è di primaria importanza nell'anomalia dell'immunità nella PSA.

I preparati a base di virus vivi attenuati si sono dimostrati più efficaci, provocando una debole reazione post-vaccinazione, hanno protetto il 50-90% degli animali vaccinati dall'infezione con un virus omologo. Tuttavia, gli svantaggi più significativi dei vaccini vivi sono il prolungato trasporto del virus dopo la vaccinazione, lo sviluppo di complicanze in alcuni animali immuni, l'attecchimento di un virus virulento negli animali vaccinati senza segni clinici della malattia, che è anche pericoloso in condizioni pratiche. Date queste carenze, è stata messa in discussione la questione dell'uso di vaccini vivi attenuati per eliminare i focolai della malattia in combinazione con altre misure veterinarie e sanitarie.

La molteplicità dei tipi immunologici dell'agente patogeno e l'esistenza di popolazioni di virus misti o modificati limitano significativamente l'uso di tali farmaci. Tuttavia, esistono informazioni sulla selezione di agenti efficaci per il trattamento dei suini malati e la rimozione dei portatori di virus, che possono essere utilizzati in combinazione con ceppi attenuati del virus. Atti della riunione di esperti della PSA della Comunità economica europea (1978-1987) e altri rapporti delineano lo sviluppo della ricerca scientifica finalizzata alla creazione di vaccini componenti, chimici e geneticamente modificati. A tale scopo, vengono studiate la struttura arteriosa fine del patogeno della PSA e delle cellule infette, la struttura e le funzioni del materiale genetico e vengono ricercati gli antigeni protettivi utilizzando metodi moderni di biologia molecolare, genetica, mAb. Queste indicazioni possono portare allo sviluppo di nuovi approcci allo sviluppo di vaccini efficaci e innocui contro la PSA. Il gene 9GL del virus ASF è omologo al gene ERV1 del lievito coinvolto nella fosforilazione ossidativa e nella crescita cellulare, e al gene ALV con la frazione epatotrofica.

Il gene 9GL codifica per una proteina di 119 residui (I) ed è altamente conservato in tutti gli isolati di campo della PSA studiati. È stato dimostrato che sono una proteina VASV tardiva. Un mutante del ceppo MAL con una delezione del gene 9GL (A9GL) si moltiplica 100 volte peggio nei macrofagi e forma piccole placche rispetto al genitore MAL. I influenza la normale maturazione dei virioni: il 90-99% dei virioni nei macrofagi infettati con il mutante A9GL ha strutture nucleoidi acentriche. La mortalità dei suini è del 100% se infettati dal ceppo MAL e se infettati dal mutante A9GL, tutti i suini sopravvivono e hanno una febbre temporanea. Tutti i suini infettati dal mutante A9GL rimangono clinicamente normali e il loro titolo di viremia si riduce di 100-10.000 volte. Tutti i suini precedentemente sfidati con il mutante A9GL sono sopravvissuti alla successiva sfida con una dose letale di ASFV MAL. Pertanto, il mutante A9GL può essere utilizzato come vaccino VALS vivo attenuato.

Fonte: Linee guida per i veterinari preparate dall'ONU FAO

All'interno del settore zootecnico globale, il settore suino svolge un ruolo chiave come fonte di proteine ​​animali. L'aumento della domanda globale di carne ha portato al fatto che il maiale è diventato il più importante prodotto alimentare, grazie alla rapida crescita dei suini, all'efficiente conversione del mangime, al rapido ricambio e alla fertilità. La carne di maiale è la carne terrestre più consumata, rappresentando oltre il 37% del consumo globale di carne, seguita da pollo (35,2%) e manzo (21,6%) (FAO, 2013).

Negli ultimi decenni, c'è stato crescita stabile settore suinicolo (Fig. 1), ma in diversi paesi del mondo il GR non è uniforme. Ci sono grandi popolazioni in Cina e parti del sud-est asiatico come Vietnam, Europa occidentale, Stati Uniti d'America centrali e orientali, America centrale e Brasile meridionale. In Africa, dove la PSA è endemica, il numero di suini è in costante aumento, indicando la diffusione delle pratiche di allevamento suino in un continente dove i ruminanti sono ormai la specie animale domestica dominante. I fattori religiosi e culturali influenzano notevolmente la distribuzione dei maiali, ad esempio, ci sono pochi o nessun maiale nelle aree musulmane (Fig. 2).

Questo settore è caratterizzato da un profondo divario tra il tradizionale, la piccola scala produzione naturale, da un lato, e la produzione industriale di suini con crescente integrazione verticale, dall'altro. Naturalmente, ci sono un certo numero di tipi intermedi di fattorie tra di loro.

Negli ultimi decenni, la produzione commerciale di suini ha subito una significativa intensificazione. Un gran numero di alcune delle razze suine più produttive viene allevato in un numero limitato di grandi aziende agricole, con un corrispondente aumento della produzione di bestiame. I sistemi di produzione su larga scala hanno raggiunto un elevato livello di uniformità facendo affidamento sullo stesso materiale genetico e potendo quindi utilizzare alimenti e infrastrutture simili. Sebbene la produzione su larga scala sia in grado di soddisfare una quota crescente della domanda globale di carne suina, circa il 43% dei suini è ancora allevato in piccoli allevamenti, soprattutto nei paesi in via di sviluppo (Robinson et al. 2011).

Nei paesi in via di sviluppo, la maggior parte dei maiali viene ancora allevata in fattorie tradizionali, su piccola scala e di sussistenza, dove servono come qualcosa di più di una semplice fonte di carne. In questi sistemi a basso costo, l'allevamento di suini genera valore aggiunto convertendo i rifiuti domestici in proteine ​​e fornendo letame per fertilizzare campi e stagni. Pertanto, la carne di maiale contribuisce alla nutrizione e alla sicurezza alimentare, mentre gli animali vivi sono una rete di sicurezza finanziaria, svolgono un ruolo significativo nelle tradizioni culturali e forniscono ulteriori mezzi per pagare scolarizzazione, cure mediche e piccoli investimenti.

Questi due gruppi di produzione molto diversi hanno priorità diverse nelle pratiche di produzione o negli investimenti di biosicurezza per prevenire e controllare le malattie dei suini. Infatti, i cortili sono caratterizzati da bassa biosicurezza, pratiche e tecnologie agricole obsolete e scarsa conoscenza delle normative sulla salute degli animali (segnalazione dei focolai, gestione del traffico e dei trasporti, certificazione, vaccinazione, ecc.) che svolgono un ruolo importante nell'introduzione, diffusione e controllo della PSA e di una serie di altre malattie dei suini.

virus PSA

L'agente eziologico della PSA è un unico arbovirus contenente DNA citoplasmatico avvolto che è l'unico membro della famiglia Asfarviridae (Figura 3). Sebbene in precedenza si pensasse che esistesse un solo sierotipo di ASFV, studi recenti hanno classificato 32 isolati di ASFV in otto diversi sierogruppi sulla base del test di ritardo dell'emoassorbimento (HAd) (Malogolovkin et al., 2015). Tuttavia, la caratterizzazione genetica di tutti gli isolati del virus della PSA finora conosciuti ha dimostrato 23 genotipi associati a posizioni geografiche, con numerosi sottogruppi che illustrano la complessità dell'epidemiologia della PSA (Figura 4). Il genotipo riflette la variabilità del gene dell'acqua e del segmento proteico (\/P772) ed è utilizzato principalmente per scopi filogenetici ed epidemiologici molecolari (p. es., per determinare l'origine delle epidemie). Per quanto ne sappiamo, non determina la virulenza o altri parametri della malattia.

Animali che sono stati infettati

Nel ciclo naturale della foresta, le zecche molli senza occhi di Ornithodoros (noti anche come acari velenosi sudafricani) così come i maiali selvatici africani sono il serbatoio e l'ospite naturale del virus della PSA. Le zecche trasmettono il virus attraverso i loro morsi.

Tutti i membri della famiglia dei suini (Suidae) sono suscettibili all'infezione, ma la malattia clinica si osserva solo nei maiali domestici e selvatici, nonché nel loro parente stretto * cinghiale europeo. I maiali selvatici africani sono portatori asintomatici di PSA e sono un serbatoio del virus in alcune parti dell'Africa (Figura 5). Questi includono cinghiali africani (Phacochoerus africanus e P. aethiopicus), orecchie a spazzola (Potamochoerus porcus e Potamochoerus larvatus) e grandi maiali delle foreste (Hylochoerus meinertzhageni).

Distribuzione geografica della PSA

La PSA è attualmente prevalente nell'Africa sub-sahariana, nell'Europa orientale, nel Caucaso e nell'isola italiana della Sardegna. Con l'aumento della circolazione della PSA, cresce la preoccupazione che il virus si diffonda in altre parti del mondo. Qualsiasi paese con un settore suinicolo è a rischio. L'esperienza dimostra che la malattia può entrare in qualsiasi paese non colpito dal virus e situato a migliaia di chilometri di distanza, principalmente attraverso la carne che arriva a bordo di aerei e navi e poi smaltita in modo improprio o trasportata da singoli passeggeri. Desta particolare preoccupazione la possibilità che il virus si diffonda nell'Asia orientale. In Cina, che è fortemente dipendente dalla produzione di carne suina e ha quasi la metà della popolazione suina domestica del mondo, un'epidemia di PSA comporterebbe conseguenze catastrofiche per la produzione e il commercio di prodotti suini, con gravi implicazioni per la sicurezza alimentare globale.

Le informazioni ufficiali sullo stato e le date dei focolai di PSA possono essere ottenute dal WAHIS Global Animal Health Information System ospitato dall'Organizzazione mondiale per la salute animale (OIE).

Africa

La PSA è considerata endemica nella maggior parte dell'Africa sub-sahariana (Figura 6) ed è anche altamente dinamica poiché spesso si verifica in nuove aree. Questa dinamica è dovuta principalmente all'enorme crescita del settore suino in Africa‚ poiché in alcuni paesi (es. Madagascar, Namibia, Uganda) le popolazioni di suini sono raddoppiate in meno di un decennio (FAOSTAT - http://www.fao.org/ faostato/ ). Un altro motivo importanteè quello di aumentare la circolazione di persone e merci. La crescita nel settore suinicolo continua nonostante i sistemi di marketing disorganizzati e non sicuri che non incoraggiano i produttori a investire in una migliore produzione di carne suina.

La crescita si osserva principalmente nei cortili privati ​​con basso livello biosicurezza, che crea problemi in termini di diffusione della malattia. Inoltre, con gli strumenti attualmente disponibili, eradicare la PSA in Africa è un compito molto difficile perché non esiste un vaccino e nessun meccanismo di compensazione. Pertanto, gli sforzi di prevenzione e controllo dovrebbero concentrarsi sui metodi per migliorare la produzione di bestiame, la biosicurezza e la protezione delle aree indenni da malattia (attraverso la regolamentazione del commercio e programmi di sviluppo del settore suino che si concentrano su misure educative e preventive). Allo stesso tempo, va ricordato che le dinamiche della PSA differiscono da sottoregione a sottoregione.

Africa dell'est

La peste suina africana è stata rilevata per la prima volta in Kenya nel 1909 dopo l'importazione nel paese di maiali domestici europei (Montgomery, 1921). Nell'Africa orientale, il virus persiste in un ciclo forestale tra cinghiali africani e zecche scavatrici di Ornithodoros. I primi focolai si sono verificati nei maiali di proprietà dei coloni europei, e si è scoperto che l'erezione di recinti intorno alla fattoria poteva eliminare cinghiali e zecche africane, e in questo modo i maiali potevano essere protetti dall'infezione. Tuttavia, da allora l'allevamento di suini è diventato molto popolare nella regione e un gran numero di animali si trova in condizioni non sicure o in libertà. Ciò ha portato a ripetuti focolai di PSA, principalmente a causa del movimento e del trasporto di suini e carni suine, e non a causa della fauna selvatica. L'aumento dell'allevamento di suini suburbani ha portato a focolai in grandi città come Kampala, Nairobi, Mombasa e Dar es Salaam. Un ciclo tra maiali domestici e zecche Ornithodoros è stato riscontrato anche in Kenya (Gagliardo et al. 2011).

Sud Africa

Il ciclo forestale del cinghiale africano è presente nelle parti settentrionali della subregione (Botswana, Malawi, Mozambico, Namibia, Zambia, Zimbabwe e Sudafrica nord-orientale). In Malawi e Mozambico, un ciclo che coinvolge maiali domestici e zecche è definito "altamente probabile". L'Angola e il Mozambico segnalano regolarmente focolai, mentre altri paesi hanno visto sporadicamente focolai di PSA associati al cinghiale africano. Lo Zimbabwe nel 2015, dopo un intervallo di oltre 2 anni, ha segnalato il primo focolaio nei suini allevati all'aperto. Nella parte nord-orientale del Sudafrica, dove una percentuale significativa di cinghiali africani è infettata dal virus della PSA, è stata istituita una zona di controllo in cui la produzione di suini è consentita solo in condizioni rigorose di biosicurezza. Tuttavia, si verificano ancora focolai sporadici a seguito di attività illegali. Il resto del Sudafrica, il Lesotho e lo Swaziland sono storicamente rimasti liberi dalla PSA, anche se nel 2012 il Sudafrica ha vissuto la prima epidemia fuori controllo in cinquant'anni a causa del movimento illegale di maiali nell'area. Le isole dell'Oceano Indiano sono rimaste indenni dalla PSA fino al 1997, quando il virus è stato introdotto in Madagascar, dove da allora è diventato endemico.

Nel 2007, Mauritius ha subito un'invasione del virus, che in l'anno prossimoè stato liquidato. La subregione presenta un elevato livello di variabilità genetica (Figura 2) associato alla presenza del ciclo forestale.

Africa centrale

La Repubblica Democratica del Congo e la Repubblica del Congo sono storicamente endemiche. È probabile che il ciclo forestale sia difettoso almeno in alcune parti di questi paesi, poiché nella Repubblica del Congo sono stati segnalati cinghiali africani infetti (Plowright et al. 1994; Saliki et al. 1985).

Anche altre regioni della regione hanno segnalato focolai, in particolare il Camerun, che ha subito la sua prima invasione nel 1982, poco dopo che la popolazione suina era raddoppiata. Nel 1973, la nazione insulare di Sao Tome e Principe ha subito epidemie che sono state rapidamente debellate. Nel 2010, il Ciad ha segnalato il primo focolaio nel sud del paese, anche se negli anni '80 ci sono stati sporadici casi di PSA in Ciad (Plowright et al. 1994). È interessante notare che il genotipo IX della PSA, tradizionalmente presente nell'Africa orientale, così come il genotipo I sono stati recentemente segnalati in questa regione (Figura 2).

Africa occidentale

Il primo rapporto ufficiale dell'OIE sulla PSA in Africa occidentale risale al 1978 in Senegal, ma un virus isolato nel 1959 da Dakar conferma che il virus è stato introdotto lì almeno due decenni prima. In Africa occidentale, la malattia sembra aver colpito il Senegal meridionale e i suoi vicini (Guinea-Bissau, Gambia e Capo Verde) fino al 1996, quando la Costa d'Avorio ha conosciuto la sua prima epidemia, seguita da un'epizoozia che ha colpito la maggior parte dei paesi della regione con significativa produzione di suini (Benin, Nigeria, Togo, Ghana e Burkina Faso). Da allora la malattia è diventata endemica nella maggior parte di questi paesi, ad eccezione della Costa d'Avorio, dove è stata eradicata entro un anno prima di una nuova invasione nel 2014. Niger e Mali hanno segnalato i loro primi focolai nel 2009 e nel 2016. È stato dimostrato che il ciclo forestale che coinvolge maiali selvatici o zecche del genere Ornithodoros non è coinvolto nel mantenimento del virus. Circola solo il genotipo I|, suggerendo l'introduzione piuttosto che l'evoluzione del virus nella regione (Figura 2).

Europa orientale e Caucaso

Nel 2007, ASF è apparso in Georgia. Il genotipo II della PSA ha avuto origine nell'Africa sudorientale ed è stato molto probabilmente introdotto via nave come rifiuto, convertito in mangime per suini o scartato in un luogo accessibile ai suini al pascolo. La malattia si è diffusa rapidamente nel Caucaso (Armenia nel 2007 e Azerbaigian nel 2008) e nella Federazione Russa (2007). Negli ultimi anni, la malattia si è gradualmente diffusa verso ovest, prima in Ucraina (2012) e Bielorussia (2013), poi nell'Unione Europea (Lituania, Polonia, Lettonia ed Estonia, 2014) e Moldavia (2016) (Figura 6) .

Una delle principali vie di infezione nell'Europa orientale è attraverso la catena di commercializzazione della carne di maiale, quando vengono importati carne di maiale contaminata a buon mercato e prodotti a base di carne di maiale provenienti da regioni infette. L'alimentazione di scarti dei suini e lo smaltimento improprio delle carcasse causano l'infezione nelle popolazioni suine suscettibili. Il fatto che la PSA rimanga contagiosa per settimane e persino mesi nei tessuti e nei prodotti a base di carne di maiale gli consente di persistere nell'ambiente (ad es. carcasse di animali) e nella carne e nei prodotti a base di carne refrigerati e congelati.

Negli Stati membri dell'UE colpiti dalla PSA, i cinghiali svolgono un ruolo importante nell'infezione, nella diffusione e nel mantenimento della PSA. Come ciò avvenga non è del tutto chiaro, ma si ritiene che dipenda in gran parte dalla densità della popolazione di cinghiali e dalla loro interazione con i suini negli allevamenti a bassa biosicurezza (suini ruspanti e al pascolo). Si ritiene che anche le carcasse di animali infetti e i rifiuti alimentari contenenti carne di maiale contaminata abbiano un ruolo in questo processo.

In sintesi, la PSA è ormai stabilmente radicata, cioè endemica in alcune regioni del Caucaso e dell'Europa orientale, dove non solo provoca gravi problemi nel commercio, ma provoca anche notevoli danni alla piccola produzione suinicola.

Precedenti incursioni di PSA al di fuori dell'Africa

In Europa, la PSA è entrata per la prima volta in Portogallo dall'Africa occidentale nel 1957. Dopo la distruzione della malattia, il genotipo I di ASFV è riapparso nel paese nel 1960, per poi diffondersi in tutta Europa (in Italia - nel 1967; in Spagna - nel 1969; in Francia - nel 1977; a Malta - nel 1978; in Belgio - nel 1985 e nei Paesi Bassi nel 1986). Colpì anche i Caraibi (Cuba - 197171980; Repubblica Dominicana - 1978; Haiti - 1979) e Brasile (1978). Tutti i paesi sono riusciti a tenere sotto controllo la situazione, ad eccezione di Spagna e Portogallo, dove la lotta contro la malattia è durata diversi decenni fino agli anni '90 del secolo scorso, così come l'isola mediterranea italiana della Sardegna, dove la PSA è diventata endemica da il tempo in cui il virus ha invaso nel 1978, circolando, principalmente tra maiali e cinghiali allevati all'aperto.

Trasmissione

Il virus della PSA ha diversi cicli: tradizionalmente c'è un ciclo forestale, un ciclo tick-maiale e un ciclo interno (maiale-maiale). Più recentemente è stato descritto il ciclo del cinghiale, che a volte può verificarsi insieme ai cicli di cui sopra. Il ciclo forestale si verifica solo in alcune parti dell'Africa e comprende il cinghiale africano e il complesso delle zecche Ornithodoros moubata. Il ciclo acaro-maiale comprende maiali e zecche del genere Ornithodoros spp., descritti come parti infestanti dell'Africa e della penisola iberica.

Trasmissione da ciclo forestale (wild Maiale africano) nel ciclo interno (allevamenti di suini) avviene attraverso la trasmissione indiretta dell'infezione da parte delle zecche. Questo può accadere quando maiali e cinghiali africani entrano in contatto, specialmente quando i cinghiali africani scavano nelle fattorie, o quando le zecche entrano nei villaggi attraverso le carcasse dei cinghiali africani uccisi per il cibo.

ciclo di infezione forestale

Questo ciclo include gli ospiti naturali di ASFV, cioè Complesso Ornithodoros moubata di cinghiale africano e zecche molli, che fungono da vettori biologici nell'Africa meridionale e orientale. Tuttavia, sono disponibili poche informazioni in relazione ad altre regioni africane. Inoltre, deve ancora essere chiarito il ruolo specifico di altri maiali selvatici africani, come il bush pig.

La trasmissione della PSA è mantenuta dalla trasmissione del virus dalla zecca al cinghiale africano (Fig. 7). I cinghiali africani vengono infettati dai morsi della zecca Ornithodoros nelle prime 68 settimane di vita mentre si trovano nella tana (Figura 8). Successivamente, sviluppano viremia e infettano altre zecche. Dopo un breve periodo di presenza del virus nel sangue (23 settimane), i giovani verri africani guariscono e non mostrano segni clinici.

Nelle aree endemiche, fino al 100% dei cinghiali africani può avere anticorpi contro la PSA. Il virus di solito può essere isolato dai linfonodi dei cinghiali africani di qualsiasi età, anche se viremia sufficiente per infettare le zecche è stata trovata solo nei neonati rintanati. È probabile che i cinghiali africani subiscano ripetute reinfezioni quando le zecche li attaccano, con piccole quantità di virus che rimangono latenti nei linfonodi.

Le popolazioni di zecche possono rimanere infette e contagiose per lungo tempo a causa della trasmissione transstadio, sessuale e transovarica del virus nella popolazione, permettendo al virus di sopravvivere anche in assenza di ospiti viremici. Le zecche infette svolgono un ruolo importante nel mantenimento a lungo termine della malattia, sopravvivendo per mesi nelle tane e fino a diversi anni dopo essere state infettate da un ospite infetto.

Ciclo di infezione tra maiale e zecca

Nella penisola iberica, EASF ha trovato facilmente un ospite adatto: Ornithodoros erraticus, una zecca autoctona che viveva nei rifugi per maiali. Le zecche sono state quindi coinvolte nel mantenimento della PSA e nella sua trasmissione ai maiali, nonostante l'assenza di maiali selvatici africani. Il ciclo è stato descritto anche in alcune parti dell'Africa ed è stato ben documentato in Madagascar, Malawi e Mozambico, sebbene le zecche non sembrino svolgere un ruolo importante nella trasmissione del virus all'interno delle popolazioni suine (Haresnape e Mamu 1986; Kwembo et al., 2015 ; Ravaiomanana et al., 2010).

Diverse specie di zecche Ornithodoros hanno dimostrato di essere vettori competenti di PSA sia in campo che in condizioni sperimentali (Tabella 1). Tuttavia, ciò che accade in laboratorio non riflette necessariamente ciò che accade sul campo. Affinché le zecche Ornithodoros diventino vettori competenti sul campo, i suini devono essere gli ospiti preferiti e, se questi non sono disponibili, è probabile che la trasmissione naturale del virus rimanga limitata. La competenza vettoriale può anche variare notevolmente all'interno di una specie o di gruppi di specie strettamente imparentate, a seconda delle proprietà di una particolare popolazione. Sebbene le zecche Ornithodoros siano state segnalate dalle aree attualmente colpite del Caucaso e dell'Europa sud-orientale, non vi è alcuna indicazione che siano coinvolte nel ciclo epizootico della PSA o che possano effettivamente trasmettere la malattia.

Ciclo infettivo dei suini domestici

In questo ciclo, più comune nei suini domestici, il virus persiste nei suini in assenza di cinghiali e zecche (Figura 9). Il virus può essere diffuso attraverso il contatto oronasale diretto attraverso il contatto con le secrezioni di suini infetti, attraverso l'ingestione di carne di maiale o altri prodotti contaminati, o indirettamente attraverso oggetti contaminati.

Il virus viene trasmesso da un allevamento all'altro quasi esclusivamente a causa dell'intervento umano, come il trasporto di animali o attrezzature, l'alimentazione di alimenti contaminati, ecc. Questa via di trasmissione richiede popolazioni di suini numerose e in costante rifornimento per mantenere il virus in circolazione. Tuttavia, anche in assenza di suini infetti, il virus a volte persiste nella carne refrigerata o congelata, permettendogli di persistere a lungo e riapparire quando questi prodotti a base di carne vengono somministrati ai suini.

Ciclo infettivo del cinghiale

Nell'Europa orientale, nel Caucaso e in Sardegna, le popolazioni di cinghiali svolgono un ruolo importante nel mantenere il virus in circolazione e infettare, soprattutto dove c'è un allevamento all'aperto o maiali che rovistano tra i rifiuti. Ciò è possibile anche a causa di altre violazioni della biosicurezza, come lo scarico di mangimi contaminati o avanzi di cibo, recinti che consentono il contatto naso a naso tra animali, ecc. Anche il trasporto di cinghiali nelle zone di caccia e/oa fini di controllo, così come i cacciatori, può svolgere un ruolo (Figura 7).

Il ruolo del cinghiale in questo processo, tuttavia, non è ancora del tutto compreso. Nel Caucaso e nella Federazione Russa, dove la densità dei cinghiali è relativamente bassa, la loro infezione non è durata a lungo ed è stata principalmente mantenuta dalle ricadute del virus dai suini domestici. Tuttavia, poiché la PSA si è spostata verso ovest in popolazioni dense di cinghiali in Polonia e nei paesi baltici (Figura 98), durante tutto l'anno sono stati osservati una trasmissione costante e focolai continui. In queste regioni, il cinghiale è considerato il vero serbatoio epidemiologico di questo virus, con la maggior parte dei casi che si verificano durante i mesi estivi.

In quelle parti dell'Europa orientale dove le temperature rimangono al di sotto di 0°C per gran parte dell'inverno, si sta delineando un nuovo scenario epidemiologico mai visto prima. Il virus presente nelle carcasse infette nei campi e nelle foreste rimane infettivo fino alla primavera, quando i cinghiali (ed eventualmente i maiali allevati all'aperto, anche se questo è raro) possono imbattersi in tali carcasse, mangiarle e infettarsi (Fig. 9A).

L'intervento umano, come la caccia, l'alimentazione, la scherma, ecc., ha gravi conseguenze per lo sviluppo di epizoozie nelle popolazioni di cinghiali. La caccia può indurre i cinghiali a sfuggire ai cacciatori in altre aree, diffondendo la PSA, ma può anche essere molto utile per controllare la densità degli animali (e quindi la trasmissione del virus). Diversi tipi anche le cacce possono produrre effetti diversi, come la caccia guidata o la caccia alle femmine, ecc. Allo stesso modo, l'alimentazione può aumentare la trasmissione del virus a causa del gran numero di cinghiali che si radunano nelle aree di alimentazione, ma allo stesso tempo consente a più cinghiali di sopravvivere a condizioni invernali rigide.

Trasmissione della PSA e persistenza della PSA

Il periodo di incubazione è il periodo dal momento dell'infezione (cioè quando il virus entra nell'animale) all'insorgenza della malattia (cioè quando l'animale mostra segni clinici). Nel caso della PSA, questo periodo varia da 4 a 19 giorni, a seconda del virus, dell'ospite suscettibile e della via di infezione. La diffusione del virus può iniziare fino a due giorni prima della comparsa dei segni clinici. Il periodo in cui un suino diffonde il virus può variare a seconda della virulenza del particolare ceppo di ASFV: i suini infettati da un ceppo meno virulento di ASFV possono essere persistentemente infettivi per più di 70 giorni dopo l'infezione.

Il virus si diffonde nella saliva, nelle lacrime, nelle secrezioni nasali, nelle urine, nelle feci e nelle secrezioni del tratto genitale. Il sangue, in particolare, contiene grandi quantità di virus. Pertanto, i suini possono essere infettati attraverso il contatto con molte diverse fonti infettive, principalmente suini infetti, carne suina contaminata e altri prodotti suini (ad es. rifiuti alimentari) e oggetti (ad es. lettiere). Questi animali infetti e materiali contaminati possono essere trasportati da veicoli e persone su lunghe distanze.

Sebbene la PSA sia associata a un'elevata mortalità (la maggior parte degli animali infetti muore), non è contagiosa come alcune altre malattie animali transfrontaliere come l'afta epizootica. Ciò significa che la PSA di solito si diffonde lentamente e alcuni animali potrebbero non essere infettati dal virus.

In un ambiente adatto ricco di proteine, l'ASFV rimane stabile in un'ampia gamma di temperature e livelli di pH per lunghi periodi di tempo, è anche resistente all'autolisi e a vari disinfettanti. Pertanto, né la putrefazione, né il processo di maturazione, né il congelamento della carne possono inattivarlo. Pertanto, il virus sopravvive nelle secrezioni, nelle carcasse, carne fresca e alcuni prodotti a base di carne per vari periodi di tempo. Può rimanere infettivo per almeno 11 giorni nelle feci, 15 settimane nella carne refrigerata (e probabilmente più a lungo nella carne congelata) e mesi nel midollo osseo o nel prosciutto e nella salsiccia affumicati, a meno che non siano cotti o affumicati ad alta temperatura (tabella 2). Il metodo di preparazione è molto importante per la diffusione della PSA. Le carni poco cotte, poco cotte, stagionate o salate, così come il sangue, le carcasse o il mangime preparato da esse, possono essere una fonte di infezione se somministrate ai suini o smaltite con i rifiuti urbani in luoghi in cui possono essere mangiate da suini o selvatici cinghiali. La cottura della carne a 70°C per 30 minuti inattiva il virus (Figura 10).

L'introduzione di nuovi maiali in una mandria o in un porcile porta spesso individui che si attaccano e si mordono a vicenda. Nel caso di suini allevati all'aperto o al pascolo, l'infezione può avvenire attraverso il contatto con animali randagi infetti, cinghiali, loro carcasse o residui di cibo. Inoltre, il virus può essere trasmesso utilizzando lo stesso ago per vaccinare o trattare più suini. La trasmissione del virus mediante inseminazione artificiale non è stata dimostrata, ma la possibilità non è esclusa.

La trasmissione del vettore è possibile anche attraverso i morsi delle zecche Ornithodoros infette. Alcuni insetti succhiatori di sangue, in particolare Stomoxys calcitrans, hanno dimostrato di essere in grado di trattenere e trasmettere la PSA per almeno 24 ore dopo il contatto con un individuo malato (Mellore et al. 1987), che è particolarmente importante nella trasmissione all'interno di un branco.

L'infezione attraverso grandi corpi idrici, come fiumi e laghi, sembra improbabile, poiché la concentrazione del virus, una volta diluito con acqua, diventa inferiore ai livelli infettivi.

Quadro clinico e dati autoptici

Di norma, la malattia è caratterizzata dalla morte improvvisa dei maiali, indipendentemente dall'età o dal sesso. Gli animali isolati dal resto della mandria, come le scrofe con giovani suinetti lattanti, possono evitare l'infezione a causa della contagiosità piuttosto bassa della PSA. Il tasso di diffusione della malattia all'interno di un allevamento (e il numero di vittime) può variare da pochi giorni a poche settimane, a seconda del tipo di allevamento di suini, della gestione e delle misure di biosicurezza. Infatti, la PSA, sebbene altamente letale, è meno comune di alcune altre malattie animali transfrontaliere come l'afta epizootica. Inoltre, alcune razze suine autoctone in Africa hanno sviluppato un certo grado di tolleranza alla PSA. I cinghiali, in virtù dell'appartenenza alla stessa specie dei maiali domestici, presentano lo stesso quadro clinico.

I segni clinici associati all'infezione da PSA sono molto variabili (vedi Tabella 3) e dipendono da vari fattori: virulenza del virus, razza suina, via di trasmissione, dose infettiva ed endemicità locale.

In base alla loro virulenza, gli ASFV sono divisi in tre gruppi principali: isolati ad alta virulenza, a virulenza moderata e a bassa virulenza (Figura 11). Le forme cliniche di PSA vanno da iperacute (molto acute) ad asintomatiche (indistinguibili). Come mostrato nella Figura 11, gli isolati di ASFV altamente virulenti causano forme iperacute e acute della malattia, mentre gli isolati moderatamente virulenti causano forme acute e subacute. Isolati a bassa virulenza sono stati descritti in aree endemiche (oltre a virus virulenti circolanti), sono caratterizzati da sintomi più lievi e talvolta sono associati a PSA subclinica o cronica. L'incidenza (cioè la proporzione di animali colpiti) dipenderà dall'isolato del virus e dalla via di trasmissione.

Sebbene non sia noto esattamente, è stato riportato che il periodo di incubazione per l'infezione naturale varia da 4 a 19 giorni. Il decorso clinico della malattia può essere inferiore a sette giorni dopo l'infezione nella forma acuta, fino a diverse settimane o addirittura mesi nella forma cronica. Il tasso di mortalità dipende dalla virulenza dell'isolato, può raggiungere il 1007% nei ceppi altamente virulenti che colpiscono suini di tutte le età, ma può essere inferiore al 20% nella forma cronica. In quest'ultimo caso, la malattia è spesso fatale nei suini gravidi e giovani che sono malati di altre malattie o sono debilitati per un altro motivo. I tassi di sopravvivenza contro ceppi altamente virulenti osservati in alcune aree endemiche possono essere più elevati, probabilmente a causa dell'adattamento dei suini al virus.

Forma super affilata

È caratterizzato da temperatura elevata (41-42°C), perdita di appetito e letargia. La morte improvvisa può verificarsi entro 1-3 giorni prima che si sviluppino segni clinici. Spesso non ci sono segni clinici o danni agli organi.

forma acuta

Dopo un periodo di incubazione di 4-7 giorni (raramente fino a 14 giorni) negli animali con forma acuta La febbre da PSA sale a 40-42°C e l'appetito scompare; gli animali sembrano assonnati e deboli, si rannicchiano e giacciono sul pavimento (Fig. 12), la loro frequenza respiratoria aumenta.

La morte avviene spesso entro 6-9 giorni per ceppi altamente virulenti, o entro 11-15 giorni per isolati moderatamente virulenti. Nei suini domestici, la mortalità raggiunge spesso il 90-100%. Gli stessi segni si osservano nei cinghiali e nei cinghiali. Le forme acute sono facilmente confuse con altre malattie, principalmente peste suina classica, erisipela suina, avvelenamento, salmonellosi e altre condizioni setticemiche (vedi capitolo successivo sulla diagnosi differenziale). I suini infetti possono mostrare uno o più dei seguenti segni clinici:

• aree blu-viola ed emorragie (puntiformi o dilatate) sulle orecchie, sull'addome e/o sul zampe posteriori(figura 12);
• scarico dagli occhi e dal naso;
• arrossamento della pelle del torace, dell'addome, del perineo, della coda e delle gambe (Fig. 12);
• stitichezza o diarrea che può passare da mucosa a ematica (melena);
• vomito;
• aborto nelle scrofe gravide in tutte le fasi della gravidanza;
• schiuma sanguinante dalla bocca/naso e secrezione dagli occhi (Fig. 15);
• l'area attorno alla coda può essere contaminata da feci sanguinolente (Figura 12).

Nei cinghiali è difficile notare lo scolorimento e il sanguinamento della pelle a causa del colore più scuro della pelle e del pelo spesso. Lo stesso vale per le razze di maiali dalla pelle scura.

Le carcasse dei suini morti nella fase acuta della malattia possono rimanere all'interno buone condizioni, sebbene possano avere segni clinici esteriori. I reperti autoptici più riconoscibili (Figura 13): linfonodi ingrossati, edematosi e completamente emorragici che sembrano coaguli di sangue (soprattutto gastrointestinali e renali); milza ingrossata e friabile da rosso scuro a nero con bordi arrotondati; ed emorragie petecchiali (puntiformi) nella capsula renale.

All'autopsia, di solito si riscontrano i seguenti fenomeni:

1. Emorragie sotto la pelle;
2. Eccesso di liquido nel cuore (idropericardio - accumulo di liquido giallastro) e cavità corporee (idrotorace, ascite) (Fig. 15);
3. Petecchie sulla superficie del cuore (epicardio), vescica e reni (nello strato corticale del rene e della pelvi renale) (Fig. 14);
4. Nei polmoni sono possibili iperemia e petecchie, schiuma nella trachea e nei bronchi e grave edema polmonare alveolare e interstiziale (Fig. 15);
5. Petecchie, ecchimosi (estesa emorragia) ed eccesso di sangue coagulato nello stomaco e nell'intestino tenue e crasso (Fig. 14);
6. Iperemia epatica ed emorragia nella cistifellea.

I cinghiali infetti nell'Europa orientale mostrano le stesse caratteristiche dell'autopsia e hanno gli stessi segni clinici, ma
a causa del loro mantello spesso e scuro, i segni clinici esteriori sono meno evidenti (Figura 16).

Forma subacuta

La forma subacuta della malattia è causata da isolati moderatamente virulenti e può verificarsi nelle regioni endemiche. I maiali di solito muoiono entro 7-20 giorni, con un tasso di mortalità del 30-70%. I maiali sopravvissuti guariscono in un mese. I segni clinici assomigliano (sebbene siano generalmente meno intensi) a quelli della forma acuta della malattia, tranne per il fatto che i cambiamenti vascolari sono meno pronunciati con emorragie ed edema.

Un sintomo comune è la febbre intermittente, che è accompagnata da depressione e perdita di appetito. Il movimento degli animali può essere doloroso e le articolazioni sono spesso gonfie di liquido e fibrina accumulati. Potrebbero esserci segni di difficoltà respiratorie e polmonite. Le scrofe gravide possono abortire. La pericardite sierosa (fluido attorno al cuore) spesso si sviluppa in forme più avanzate di pericardite fibrinosa.

Forma cronica

Nella forma cronica, spesso il tasso di mortalità è inferiore al 30%. Questa forma è stata descritta in paesi dove la PSA è presente da tempo, come Spagna, Portogallo e Angola. La forma cronica ha origine da virus naturalmente attenuati o da un virus vaccinale rilasciato durante la ricerca sul campo sui vaccini, che si sospetta si sia verificato nella penisola iberica negli anni '60. I segni clinici iniziano da 14 a 21 giorni dopo l'infezione con febbre lieve seguita da difficoltà respiratoria lieve e gonfiore articolare (da moderato a grave). Questo è spesso accompagnato da arrossamento della pelle che si gonfia e diventa necrotica (Figura 17). Ulteriori risultati dell'autopsia includono polmonite con necrosi caseosa (a volte con mineralizzazione focale) nei polmoni, pericardite fibrinosa e linfonodi edematosi che possono essere parzialmente emorragici (principalmente linfonodi mediastinici) (Figura 17).

Diagnosi differenziale

La peste suina africana non si presenta sempre con la serie completa di segni clinici descritti nella sezione precedente. Nelle prime fasi della malattia, o quando è coinvolto un piccolo numero di animali, può essere difficile formulare una diagnosi clinica. La diagnosi di PSA è spesso ipotetica ei sintomi possono essere confusi con altre malattie e/o condizioni. Inoltre, un certo numero di malattie dei suini (e dei cinghiali) possono avere tassi di mortalità simili a quelli osservati nei focolai acuti di PSA. la diagnosi non è definitiva finché non viene confermata da un laboratorio.

Oltre alle principali diagnosi differenziali elencate in questo capitolo (Tabella 4), possono essere prese in considerazione anche altre setticemia generalizzate e condizioni emorragiche.

Peste suina classica

La diagnosi differenziale più importante della PSA è la peste suina classica, nota anche come colera suina, causata da un Pestivirus della famiglia Flaviviridae. Come con la PSA, si presenta in una varietà di manifestazioni o forme cliniche. Il CSF acuto ha quasi gli stessi segni clinici e risultati autoptici della PSA acuta e ha anche un alto tasso di mortalità. I segni clinici possono includere febbre alta, anoressia, depressione, emorragie (nella pelle, nei reni, nelle tonsille e nella cistifellea), congiuntivite, segni respiratori, debolezza, animali affollati, pelle blu e morte entro 2-10 giorni. L'unico modo per distinguere tra i due è attraverso la conferma di laboratorio. Non sarebbe saggio tentare di vaccinare gli animali contro la PSC prima di confermare la diagnosi, poiché la PSA può essere diffusa da personale non addestrato durante la vaccinazione.

Sindrome riproduttiva e respiratoria dei suini (PRRS)

La PRRS, a volte indicata come "malattia dell'orecchio blu", è caratterizzata da polmonite nei suini in accrescimento e all'ingrasso e da aborti nelle scrofe gestanti. Questo è spesso accompagnato da febbre, rossore e, in particolare, una tinta bluastra sulla pelle delle orecchie. Anche la diarrea è caratteristica. Sebbene la mortalità per PRRS non sia generalmente elevata, negli ultimi anni i virus altamente patogeni della PRRS hanno decimato interi allevamenti di suini in Cina, Vietnam ed Europa orientale, caratterizzati da elevata mortalità, febbre alta, letargia, anoressia, tosse, dispnea, zoppia e cianosi/blu (pelle orecchie, arti e perineo).

I risultati dell'autopsia includono danni ai polmoni (polmonite interstiziale) e agli organi linfoidi (atrofia del timo ed edema ed emorragia nei linfonodi) ed emorragie petecchiali nei reni.

Sindrome da dermatite e nefropatia dei suinetti (PDNS)

Questa è una delle malattie correlate al circovirus-2 nei suini. L'LDNP di solito colpisce i suini in accrescimento ei suini nella fase finale dell'ingrasso. Sebbene i segni clinici parlino da soli, non esistono test diagnostici specifici.

La sindrome è caratterizzata da lesioni cutanee da rosso scuro a porpora che di solito sono più pronunciate nella parte posteriore del tronco e del perineo, sebbene nei casi più gravi possano essere colpiti anche il fianco e l'addome iliaco. Le lesioni nelle pareti dei vasi sanguigni causate da vasculite necrotizzante (infiammazione dei vasi sanguigni) sono microscopicamente facilmente distinguibili dalle lesioni della PSA. La malattia è anche accompagnata da anoressia, depressione e grave nefrosi (infiammazione del rene), che di solito è la causa della morte. I linfonodi possono anche essere ingranditi. L'incidenza è generalmente bassa, ma i suini colpiti muoiono molto frequentemente.

Erisipela di maiale

Questo malattia batterica causata da Erysipelothrix rhusiopathiae colpisce suini di tutte le età e può interessare suini sia in allevamenti piccoli che estensivi e in sistemi intensivi commerciali. La malattia può manifestarsi in forme acute o subacute. La forma acuta, che di solito si verifica nei giovani suini, è caratterizzata da morte improvvisa, anche se la mortalità è solitamente molto inferiore a quella della PSA.

Due o tre giorni dopo l'infezione, i suini malati possono sviluppare lesioni cutanee a forma di diamante molto caratteristiche dovute a vasculite necrotizzante (infiammazione dei vasi sanguigni). Nei suini adulti, questa è di solito l'unica manifestazione clinica della malattia. Come con la PSA acuta, la milza può essere iperemica E visibilmente indurita. i risultati dell'autopsia includono anche congestione dei polmoni e dei linfonodi periferici, nonché emorragie nella corteccia del rene, del cuore e della sierosa dello stomaco. L'isolamento del batterio può confermare la diagnosi e i suini rispondono bene al trattamento con penicillina. I cambiamenti microscopici sono di natura diversa rispetto alla PSA.

Malattia di Aujeszky

La malattia di Aujeszky, nota anche come pseudorabbia, causa gravi problemi neurologici e riproduttivi ed è spesso fatale. Sebbene quasi tutti i mammiferi possano essere infettati, i maiali sono i più colpiti e ne sono il serbatoio. Gli animali giovani sono i più colpiti, la mortalità durante le prime due settimane di vita raggiunge il 100%. I suinetti di solito sviluppano la febbre, smettono di mangiare, sviluppano segni neurologici (tremori, convulsioni, paralisi) e spesso muoiono entro 24-36 ore.

I maiali più anziani (di età superiore ai due mesi) possono sviluppare sintomi simili, ma di solito presentano segni respiratori e vomito e la mortalità non è così elevata. Scrofe e verri mostrano per lo più segni respiratori, ma le scrofe gravide possono abortire o dare alla luce suinetti deboli con tremori. Le lesioni focali necrotiche e da encefalomielite possono trovarsi nel cervello, nel cervelletto, nelle ghiandole surrenali e in altri organi interni come i polmoni, il fegato o la milza. Le macchie bianche nel fegato nei feti o nei maialini molto giovani sono molto caratteristiche di questa infezione.

Salmonellosi (e altre setticemia batteriche)

La salmonellosi di solito colpisce i maialini. Se il trattamento viene avviato in tempo, gli animali rispondono bene alla terapia antibiotica. La diagnosi è confermata dalla coltura batteriologica. I segni simili alla PSA includono febbre, perdita di appetito, disturbi respiratori o gastrointestinali e una carcassa arrossata e infiammata al momento della macellazione.

Gli animali possono morire 3-4 giorni dopo l'infezione. I maiali che muoiono di salmonellosi settica mostrano cianosi delle orecchie, delle zampe, della coda e dell'addome. I risultati dell'autopsia possono includere emorragie petecchiali nei reni e sulla superficie del cuore, milza ingrossata (ma con un colore normale), gonfiore dei linfonodi mesenterici, fegato ingrossato e congestione polmonare.

Avvelenamento

Quando un gran numero di maiali muore improvvisamente, dovrebbe essere considerata la possibilità di avvelenamento. Alcune sostanze tossiche possono causare lo stesso tipo di sanguinamento della PSA. E mentre il veleno per topi a base di cumarina, come il warfarin, può causare emorragie massicce, è più probabile che colpisca pochi suini piuttosto che l'intero allevamento.

Alcune tossine fungine nei mangimi ammuffiti, come l'aflatossina e la stachibotriotossina, possono causare sanguinamento e grave mortalità. L'avvelenamento accidentale o doloso da pesticidi può provocare la morte di suini di tutte le età, ma la morte di tutti i suini entro 24-48 ore, con pochi o nessun segno clinico, senza lesioni riscontrate all'autopsia, aiuterà a distinguere questo risultato dalla PSA. È improbabile che l'avvelenamento sia accompagnato da febbre.

Le sezioni di questo capitolo sono state e sono tratte dalla FAO Good Emergency Management Practice (GEMP): The Essentials (FAO, 2011), che può essere consultata per maggiori dettagli.

È consigliabile avere sempre pronto un kit di indagine presso l'ufficio veterinario locale in modo che il veterinario possa iniziare il prima possibile con il minimo ritardo. L'attrezzatura dovrebbe idealmente includere Camera digitale, CHW e mezzi di comunicazione rapida (telefono cellulare, ma può includere anche la radio), nonché tutte le attrezzature necessarie per il campionamento, l'imballaggio adeguato e il trasporto dei campioni (GEMP, 2011).

Il sospetto di PSA viene solitamente segnalato dagli stessi allevatori o da un veterinario privato. Quando ci si trova di fronte a un sospetto focolaio di PSA in un'azienda agricola, si dovrebbe farlo immediatamente, anche prima conferma di laboratorio, adottare le seguenti misure sulla base del presupposto di una diagnosi sul campo di PSA:

• Raccogliere dati sugli allevamenti e sugli animali colpiti (cfr. riquadro 1).
• Gli allevamenti infetti e sospetti devono essere immediatamente messi in quarantena, ad es. nessuna persona, veicolo, animale o prodotto suino deve lasciare o essere introdotto nell'azienda finché la diagnosi non è stata confermata.
• Stabilire punti di disinfezione per persone e veicoli agli ingressi e alle uscite dell'edificio in cui sono tenuti i suini. I dipendenti e i visitatori devono garantire che le scarpe, gli indumenti e le attrezzature siano disinfettati all'uscita dall'allevamento. Qualora il veterinario o altro addetto debbano venire a contatto con animali malati o materiali potenzialmente contaminati, devono utilizzare i dispositivi di protezione individuale.
• Effettua ispezioni in ogni locale dell'allevamento, esame clinico dei singoli animali ed esame post mortem degli animali morti (o macellati). Quando si esegue un esame clinico di animali sospetti, è necessario un approccio sistematico.
• È anche importante registrare i risultati man mano che avanzi nel sondaggio. Il modulo compilato ti aiuterà a svolgere efficacemente questo compito. In presenza di un gran numero di animali, è necessario dare la priorità a quali animali esaminare. Prima di tutto, è necessario condurre un esame di animali con segni clinici evidenti.

• I campioni appropriati devono essere prelevati il ​​prima possibile e inviati immediatamente a un laboratorio per la diagnosi (vedere la sezione Campionamento). Nel caso in cui molti animali mostrino segni clinici, i campioni di cinque di essi dovrebbero essere sufficienti per stabilire una diagnosi.
• Condurre un'indagine sull'epidemia (nota anche come indagine epidemiologica).
• Agricoltori vicini o coloro che hanno recentemente acquistato o venduto animali da questa fattoria, ad es. le persone di contatto a rischio devono essere informate in modo che possano testare i loro animali (e segnalare eventuali sintomi riscontrati alle autorità veterinarie) e interrompere il movimento di suini e prodotti da e verso questi porcilai. Dovrebbero essere informati anche i fornitori di servizi che hanno recentemente visitato questi allevamenti.

• Anche con un'adeguata pulizia e disinfezione, i dipendenti coinvolti in un'indagine su un focolaio in un allevamento potenzialmente infetto non devono visitare altri allevamenti per almeno 24 ore per prevenire la possibilità di diffusione accidentale della malattia.
• Quando si tratta di un focolaio in un allevamento di suini ruspanti o al pascolo, il primo passo è restituire tutti gli animali scoperti e tenerli al chiuso, o almeno legati.

Come condurre un'indagine su un focolaio

Questa sezione è tratta dal tutorial online di EuFMD.

Un'indagine sull'epidemia, nota anche come indagine epidemiologica, dovrebbe determinare:

(a) Quanto dura la malattia?

b) possibili fonti della malattia;

c) quali movimenti di animali, persone, veicoli o altri oggetti potrebbero portare alla diffusione della malattia;

d) l'entità del problema attraverso il conteggio dei casi, la definizione delle unità epidemiologiche e la valutazione della popolazione a rischio. Queste informazioni sono fondamentali quando si decide su un'efficace strategia di controllo e si monitora l'attuazione della strategia di controllo una volta che queste misure sono già state adottate.

Il primo passo è definire un'unità epidemiologica (unità), che dovrebbe includere tutti i suini con un livello simile di rischio di infezione. Questi saranno tutti animali suscettibili sotto lo stesso sistema di gestione o di biosicurezza, ad es. solitamente fattorie. Tuttavia, questa unità può espandersi fino al livello di un villaggio se non ci sono confini reali tra le fattorie. È importante ricordare che unità agricole geograficamente separate possono trovarsi nello stesso sistema di gestione e far parte della stessa unità epidemiologica.

L'intervallo di tempo/la rappresentazione grafica aiuta a determinare quando si sospetta che si sia verificata l'infezione e la trasmissione della malattia e offre l'opportunità di guidare le indagini sui focolai. Questo grafico viene utilizzato per determinare le finestre temporali in cui potrebbe verificarsi l'introduzione del virus (in base al periodo di incubazione) e la diffusione ad altri siti (in base al periodo di isolamento del virus).

Una volta creato il programma, il passo successivo è utilizzarlo per risalire alla fonte del virus e diffonderlo ulteriormente in modo da stabilire contatti che potrebbero portare alla trasmissione del virus entro il tempo calcolato. I fattori di rischio per la diffusione della malattia includono:

• movimento di animali o prodotti di origine animale (es. carne di maiale);
• dipendenti che visitano i locali e sono a diretto contatto con gli animali di altri allevamenti, come un veterinario o altri allevatori;
• lavoratori agricoli in visita ad altre aziende zootecniche;
• movimento di veicoli o attrezzature tra aziende zootecniche;
• contatto diretto degli animali ai confini dell'allevamento;
• cinghiali o loro prodotti.

Una volta identificate le possibili fonti di infezione, è importante dare la priorità a ulteriori indagini epidemiologiche. Ciò consente una rapida indagine e identificazione di tutti i contatti che possono contribuire all'ulteriore diffusione della malattia. La priorità dovrebbe essere data a quei contatti che si sono verificati durante il periodo di tempo in cui l'infezione era possibile.

Questa programmazione è particolarmente importante quando il personale e le risorse sono limitati, come spesso accade. Anche i tipi di contatto sono importanti. La priorità dovrebbe essere data a:

• grandi allevamenti dove sono presenti più animali;
• "intersezioni" in cui si incontrano animali provenienti da più luoghi, inclusi mercati del bestiame e macelli;
• aziende agricole in cui vi è un movimento regolare di animali, ad esempio da commercianti di bestiame;
• contatto diretto con animali, ad esempio, al momento dell'acquisto di animali;
• stanze adiacenti dove ci sono i maiali.

Esistono vari modi per indagare su possibili contatti:

Colloquio

Intervistare in modo efficace richiede determinate abilità, specialmente in una situazione in cui è probabile che l'agricoltore sia sottoposto a grave stress. Gli agricoltori hanno spesso paura degli estranei e in particolare dei funzionari governativi. È estremamente importante dedicare del tempo alla creazione di un rapporto di fiducia con l'intervistato. Inoltre, non pianificare di visitare più di una fattoria al giorno. Vi proponiamo alcune idee che potete trovare nel box 2.

Altre fonti di informazione

Esamina i registri dei movimenti del bestiame e del personale. Anche i registri veterinari, i diari, le polizze di carico e le fatture o le ricevute delle consegne possono fornire informazioni preziose. Ricorda che l'agricoltore in questi momenti può essere molto turbato, è difficile per lui ricordare e trasmettere tutti i dettagli, e quindi le note diventano una fonte di informazioni ancora più preziosa.

Oltre a intervistare l'agricoltore, dovresti ispezionare attentamente i locali. È necessario aggirare i locali attorno al perimetro esterno per determinare se vi è contatto con maiali vicini o maiali selvatici. A volte è utile fare uno schizzo dell'area, indicando il luogo in cui sono tenuti gli animali, i gruppi di animali, l'entrata e l'uscita ei suoi confini.

Ai fini dell'indagine epidemiologica e del monitoraggio, può essere utile contattare altri visitatori dei locali, come veterinari, raccoglitori di latte o tecnici dell'inseminazione artificiale.

Garantire la biosicurezza quando si visita un allevamento

Questa sezione ha utilizzato materiale del corso di formazione online EuFMD. Un video dettagliato che mostra i passaggi seguenti può essere visualizzato su: https://www.youtube.com/watch?v=ljS-53r0FJk&feature=youtu.be

Prima di partire:

• Assicurati di rimuovere tutte le attrezzature non necessarie dal veicolo.
• Disporre le aree "pulite" e "sporche" nel sedile posteriore e nel bagagliaio dell'auto, rivestite con teli di plastica.
• Assicurati di portare con te tutta l'attrezzatura necessaria. Per fare questo, ha senso redigere una lista di controllo (vedi riquadro 3). È utile disporre di un elenco standard delle attrezzature necessarie per allestire un punto di disinfezione. Tale elenco può essere nel tuo piano di emergenza o nel tuo manuale.

All'arrivo

• L'auto non deve entrare nel territorio (lasciarla all'ingresso dell'agriturismo).
• Scegli una posizione adatta su una superficie pulita e asciutta (preferibilmente in cemento) per il tuo punto di disinfezione, delineando chiaramente i lati puliti e sporchi (cancelli).
• Rimuovi tutti gli indumenti e gli oggetti non necessari (ad esempio giacca, cravatta, orologio) e prendi tutto dalle tasche.
• Le apparecchiature elettroniche (come un telefono cellulare) necessarie in allevamento devono essere riposte in un sacchetto di plastica sigillato per facilitare la successiva pulizia e disinfezione. Il telefono in fattoria non va mai tirato fuori dalla borsa, può essere utilizzato solo se contemporaneamente è in una busta di plastica.
• Prelevare dall'auto tutti gli oggetti necessari alla disinfezione da portare in allevamento.
• Potrebbe essere necessario portare la propria acqua per la preparazione di detergenti e disinfettanti.

Preparazione

• Posizionare un foglio di plastica sul lato pulito del punto di disinfezione.
• Posiziona gli oggetti che porterai con te alla fattoria sul lato sporco del punto di disinfezione (come sacchetti di plastica neri e contenitori per campioni).
• Mescola l'acqua che hai portato con te con il detersivo in un secchio e il disinfettante in due secchi. Due secchi - uno con detersivo e uno con disinfettante - rimarranno dalla parte sporca, li utilizzerai per rimuovere lo sporco che hai "raccolto" in fattoria. Un altro secchio disinfettante con la propria spazzola sarà sul lato pulito.
• Spesso il disinfettante è specifico, destinato all'uso in caso di una particolare malattia. La concentrazione e il tempo di esposizione devono essere attentamente monitorati.

Condimento (sul lato pulito)

• Togliti le scarpe e lasciale sul telo di plastica.
• La tuta protettiva usa e getta viene prima indossata e poi viene infilata negli stivali. I guanti devono essere fissati con nastro adesivo.
• Tute impermeabili (se le condizioni meteorologiche lo richiedono) dovrebbero coprire gli stivali. Ha i suoi strati di guanti usa e getta che possono essere sostituiti quando si sporcano.
• I copriscarpe devono coprire almeno la suola e la parte inferiore degli stivali di gomma.
• Indossa un cappuccio protettivo e ricontrolla l'elenco prima di scendere dal telo di plastica e dirigerti verso la fattoria.

Spogliarello (sul lato sporco)

• Prima di lasciare i locali, utilizzare i prodotti disponibili in azienda per pulire le aree molto sporche.
• Lavare il contenitore del campione con detergente e spazzolare prima di immergerlo nel disinfettante per il periodo di tempo richiesto, quindi inserirlo nel sacchetto del campione sul lato pulito.
• Lava e disinfetta la borsa contenente il telefono e altri oggetti simili che hai portato alla fattoria.
• Rimuovi i copriscarpe e mettili sul lato sporco in sacchetti di plastica. Arrotola la tuta impermeabile (se ne indossi una) sulla parte superiore degli stivali prima di pulire gli stivali con detergente e spazzola, soprattutto la parte inferiore (possibilmente usando un cacciavite per pulire le suole). Quindi utilizzare il detersivo per lavare l'intera tuta, compreso il cappuccio.
• Rimuovere il secondo paio di guanti (quello esterno) e metterli nella busta sul lato sporco prima che la tuta impermeabile non lavata venga rimossa e immersa nella soluzione disinfettante. Dopo essere stato nella soluzione per il tempo richiesto, deve essere posto in un sacchetto dalla parte pulita.
• Gli stivali, se necessario, possono essere rapidamente lavati di nuovo e adeguatamente disinfettati.
• Il primo paio di guanti (quello interno) va tolto e riposto nella borsa sul lato sporco prima di togliere la muta interna (le gambe vanno tirate fuori dagli stivali quando si toglie la tuta, e poi si possono rimettere gli stivali) . La tuta deve essere riposta nella borsa dal lato sporco.

Sul lato pulito

• Togli i piedi dagli stivali e calpesta il lato pulito del lenzuolo prima di prendere gli stivali e disinfettarli sul lato pulito (hai bisogno di un altro secchio per disinfettare). Infine, mettili nel sacchetto dal lato pulito. Qui è necessario disinfettare anche mani e occhiali, oltre che il viso (con salviette disinfettanti).
• Le attrezzature e i campioni riutilizzabili devono essere imbustati due volte e tenuti chiusi.

Puoi rimetterti le scarpe normali.

• Se i secchi sul lato sporco sono i tuoi, devono essere disinfettati, messi in due sacchetti e solo allora possono essere portati via. Tutti i secchi della fattoria dovrebbero essere lasciati sul lato sporco.
• Le borse devono essere posizionate nell'area sporca dell'auto.
• Chiedi all'agricoltore di portare la spazzatura per la lavorazione, se necessario.
• Dopo aver lasciato gli allevamenti, i campioni/l'attrezzatura devono essere inviati immediatamente per la diagnostica.
• Se non hai maiali nelle vicinanze, puoi andare a casa, poi fare una doccia e lavarti accuratamente i capelli. Tutti i vestiti che indossavi quel giorno dovrebbero essere messi in un disinfettante per 30 minuti e lavati a una temperatura superiore a 60 ° C. Se ci sono maiali dove vivi, fai tutto altrove.
• Non visitare alcun luogo in cui sono tenuti i maiali per almeno tre giorni.

Oltre alle procedure di autodisinfezione, è necessario anche lavare e disinfettare l'auto. Prima di iniziare la visita, assicurati che l'auto sia libera da oggetti non necessari e che sia pulita. Posizionare un pezzo di telo di plastica nelle parti del veicolo in cui è riposta l'attrezzatura e dividerlo in due parti: pulita e sporca. Ricordarsi di seguire le normative locali sulla disinfezione dei veicoli.

Dovresti, se possibile, lavare e disinfettare l'esterno del veicolo prima di lasciare l'area interessata, quindi ripetere questa procedura all'interno e all'esterno del veicolo dopo il tuo ritorno alla base.

• Rimuovere eventuali fogli di plastica che sono stati drappeggiati sopra l'auto e smaltirli correttamente.
• Lavare l'esterno dell'auto utilizzando una lavatrice o un tubo flessibile e una spugna usa e getta, rimuovere tutto sporco visibile. Non dimenticare di pulire i punti nascosti come i passaruota, il battistrada dei pneumatici e il fondo dell'auto.
• Dopo aver rimosso tutto lo sporco, spruzzare il disinfettante all'esterno della macchina.
• Sbarazzarsi dei detriti all'interno della macchina, rimuovere tutto lo sporco (prendersi cura del corretto smaltimento dei rifiuti).
• Pulisci volante, pedali, cambio, freno a mano, ecc. panno imbevuto di disinfettante.

Se si sospetta PSA nel cinghiale

In primo luogo, è molto importante avere una chiara definizione di caso sospetto di PSA nei cinghiali. È probabile che tali definizioni varino a seconda della situazione epidemiologica nella regione/paese e possono diventare più rigorose con l'aumentare del rischio. La definizione copre generalmente qualsiasi cinghiale con segni clinici o comportamento anomalo, o qualsiasi animale raccolto con lesioni (trovate dopo l'autopsia), o qualsiasi cinghiale trovato morto o ucciso in incidenti stradali (specialmente nelle aree ad alto rischio).

Il sospetto che i cinghiali possano essere infetti viene solitamente segnalato dai cacciatori, anche se silvicoltori, escursionisti, raccoglitori di funghi, ecc. può anche segnalarlo. Varia a seconda del paese, ma i cacciatori possono svolgere un ruolo molto importante nel rilevare la malattia. Per ottenere la loro collaborazione, avrai bisogno di una motivazione, ad esempio denaro. È importante che ogni cacciatore in una zona a rischio sia addestrato a riconoscere i segni clinici della PSA per sapere che tipo di esemplare prelevare e come, avvisare tempestivamente le autorità e sapere come smaltire la carcassa . I cacciatori devono inoltre garantire che qualsiasi cinghiale cacciato sia macellato in un'area designata e che le frattaglie o i sottoprodotti siano adeguatamente smaltiti, ad esempio collocati in contenitori o fosse designati.

Se si sospetta la salute dell'animale, i cacciatori potrebbero dover conservare l'intera carcassa in un frigorifero (di solito un capanno da caccia) fino a quando non saranno disponibili i risultati di laboratorio.

Le carcasse sospette trovate nella foresta dovrebbero, se possibile, essere raccolte e trasportate (in auto, slitta, ecc.) in un luogo sicuro per l'incenerimento o lo smaltimento. Inoltre, possono essere distrutti in loco mediante incenerimento o discarica.

In caso di sospetto clinico, devono essere prese immediatamente le seguenti misure:

• Raccogliere dati sugli animali colpiti (numero, età, sesso, lesioni patologiche, localizzazione, ecc.).
• Assicurarsi che tutti coloro che sono stati in contatto con la carcassa dell'animale, le loro scarpe, i vestiti e le attrezzature siano disinfettati. Se il veterinario e gli altri dipendenti entrano in contatto con animali malati/morti o materiali potenzialmente contaminati, devono utilizzare dispositivi di protezione individuale.
• Condurre l'esame clinico e l'esame post mortem degli animali.
• Raccogliere i campioni appropriati e portarli in un laboratorio per la diagnosi il prima possibile (vedere la sezione Diagnosi di laboratorio della PSA, pagina 39) In alcuni casi, specialmente se le carcasse si trovano in luoghi remoti, i cacciatori devono prelevare i campioni da soli.
• Condurre un'indagine sull'epidemia (indagine epidemiologica).
• Avvisare gli allevatori vicini dell'evento in modo che possano verificare la presenza di segni clinici nei loro animali e chiuderli.
• Anche dopo un'adeguata pulizia e disinfezione, i dipendenti coinvolti nelle indagini su un cinghiale potenzialmente infetto a causa di un focolaio di malattia non devono visitare gli allevamenti per almeno 48 ore per evitare la diffusione involontaria della malattia.

Quando si conduce un'indagine epidemiologica che coinvolge animali selvatici, i protocolli saranno diversi da quelli utilizzati negli allevamenti, tenendo conto delle diverse caratteristiche della popolazione. Gli intervistati non saranno proprietari di animali, ma persone che visitano regolarmente la foresta, come il capo o i membri del club di caccia locale, le guardie forestali locali, ecc. Le domande possono includere:

• Chi cacciava nella zona, sia cacciatori locali che in visita?
• Ci sono state battute di caccia (con battitori) nell'ultimo mese o due?
• Quali sono i confini geografici della riserva?
• Qual è la pratica di gestione nella riserva?
• Quali sono le misure di biosicurezza?
• Cos'è l'igiene della caccia?
• Ci sono popolazioni di suini domestici nella zona?
• Azioni immediate a livello di azienda agricola in caso di sospetto focolaio

Procedure operative standard (SOP) (GEMP, 2011)

Le SOP sono fondamentali per garantire che i casi sospetti siano adeguatamente indagati. Dovrebbero includere:

• note di sicurezza per investigatori e proprietari di animali domestici;
• un elenco delle attrezzature da prelevare, comprese le attrezzature per il campionamento;
• criteri per stabilire il grado di contaminazione dell'area e, sulla base di questo, un punto di ingresso biologicamente sicuro;
• prendere precauzioni di biosicurezza quando si entra e si esce dal luogo;
• restrizioni all'arrivo sul movimento di bestiame, cibo, personale, veicoli e attrezzature;
• esami necessari (numero e tipo di animali); prelevare campioni da animali con caratteristiche simili;
• manipolazione del campione;
• la procedura per l'invio dei campioni per il test; e - una procedura per la comunicazione dei risultati provvisori alle autorità competenti.

Team diagnostico specializzato (GEMP, 2011)

Si raccomanda di assegnare uno o più team diagnostici specializzati che possano essere mobilitati immediatamente. I membri del team devono essere attrezzati e pronti a viaggiare poco tempo. Per questa missione, il team deve portare con sé tutta l'attrezzatura necessaria per indagare sull'epidemia, raccogliere e trasportare campioni diagnostici e comunicare rapidamente. La squadra deve recarsi sul luogo del focolaio accompagnata dal personale veterinario locale, compreso il veterinario locale. Il team dovrebbe condurre un esame clinico, raccogliere un'anamnesi, condurre un'indagine epidemiologica preliminare, tracciare il movimento di animali sospetti e raccogliere un'ampia gamma di campioni diagnostici, sia per la malattia sospettata che per qualsiasi altra malattia endemica o esotica che possa essere inclusa nel diagnosi differenziale. Il team deve trasportare questi campioni al laboratorio. Deve inoltre adottare le misure immediate necessarie per controllare la malattia nel luogo del focolaio e deve disporre dell'autorità legale per farlo. Inoltre, deve avere l'autorità di impartire istruzioni immediate ai funzionari locali della sanità animale. Il team deve riferire immediatamente al veterinario dell'oblast/regionale e al veterinario capo una valutazione della situazione, comprese le misure adottate per confermare la diagnosi e le raccomandazioni per un'ulteriore strategia di controllo della malattia, compresa la creazione di aree infette e di sorveglianza. La composizione del team diagnostico può variare a seconda delle circostanze, ma può includere:

• patologo veterinario del laboratorio diagnostico veterinario centrale o regionale;
• uno specialista epidemiologo, preferibilmente con esperienza o formazione professionale nel campo delle malattie transfrontaliere ed emergenti, e in particolare nel campo della malattia sospetta;
• un veterinario con una vasta esperienza in malattie endemiche;
• qualsiasi specialista richiesto per un esame specifico.

Campionamento, confezionamento e trasporto dei campioni

Questa guida pratica è destinata ai team sul campo e di laboratorio.

Selezione del campione

punto di partenza per qualsiasi ricerca di laboratorio ASF sta campionando. Una considerazione importante qui è lo scopo dell'indagine, come la diagnosi della malattia, la sorveglianza della malattia o la certificazione sanitaria. Gli animali da campionare dipenderanno dallo scopo del campionamento.

Ad esempio, quando si indaga su un focolaio (sorveglianza passiva), il gruppo target è costituito da animali malati e morti, ma se si desidera scoprire se gli animali sono suscettibili alla malattia (sorveglianza attiva), è necessario campionare gli animali più anziani.

Il personale che preleva i campioni (e conduce gli esami clinici) dovrebbe essere addestrato su come immobilizzare i suini (durante l'esame clinico e il campionamento).

Il gruppo di campionamento dovrebbe portare forniture e attrezzature sufficienti per prelevare campioni (cfr. riquadro 4) da un certo numero di animali, con una riserva nel caso in cui i materiali/attrezzature diventino inutilizzabili (ad esempio vacutainer che perdono, ecc.). Inoltre, assicurati di portare con te tutto il necessario per la raccolta dei dati, la protezione personale/biosicurezza e il trasporto dei campioni (vedere la sezione "Materiali per il trasporto dei campioni" nel riquadro 4).

Si consiglia di utilizzare il modulo di campionamento sul campo per raccogliere tutti i campioni e le informazioni necessarie in loco. Se i campioni devono essere inviati a un laboratorio di riferimento regionale/internazionale, si consiglia di prelevare i campioni in duplice copia in modo che uno possa essere inviato e l'altro possa essere conservato, evitando così la necessità di scongelare e aliquotare/separare i campioni per la spedizione.

I campioni dovrebbero essere prelevati dalla comunità utilizzando i metodi corretti per evitare stress eccessivo e lesioni all'animale o autolesionismo. I campioni devono essere prelevati in condizioni sterili per evitare la contaminazione incrociata e devono essere sempre utilizzati nuovi aghi per ogni singolo animale per evitare la trasmissione di malattie. Tutti i campioni in attesa di analisi devono essere considerati infetti e manipolati di conseguenza. Tutti i materiali utilizzati per il campionamento in azienda devono essere smaltiti in conformità con le normative nazionali, ad esempio in sacchi e trasportati al laboratorio per la sterilizzazione in autoclave/adeguato smaltimento.

I laboratori diagnostici richiedono che i campioni vengano consegnati al laboratorio in buone condizioni ed etichettati in modo chiaro e permanente.

Tipi di campioni

UN. Sangue intero

Raccogliere il sangue intero dalla vena giugulare, dalla vena cava inferiore o dalla vena dell'orecchio utilizzando provette sterili (vacutainers) con un anticoagulante (EDTA - tappo viola). Se l'animale è già morto, il sangue può essere prelevato dal cuore, ma questo deve essere fatto immediatamente. Evitare l'uso di eparina (tappo verde) perché potrebbe inibire la PCR e/o dare un risultato falso positivo nell'identificazione dell'emoassorbimento (HAd). Il sangue è l'obiettivo per il rilevamento del virus mediante PCR e l'isolamento del virus. Il plasma separato durante il processo di centrifugazione può essere utilizzato per rilevare gli anticorpi utilizzando un test dell'immunoperossidasi indiretta (IPT) o un test anticorpale fluorescente indiretto (nMFA).

Il test del microvolume a macchia di sangue secco (DBS) su una carta da filtro è un modo conveniente per raccogliere e conservare il sangue per un'ulteriore rilevazione del DNA e/o degli anticorpi. Queste carte sono molto utili in aree remote o quando non è disponibile una catena del freddo, come la caccia o le aree rurali ai tropici. Tuttavia, i test di rilevamento del genoma dell'ASSF o degli anticorpi sono meno sensibili con la DBS che con il sangue intero o il siero. I campioni DBS sono la raccolta di alcune gocce di sangue utilizzando una lancetta o un ago sterile da una siringa da una vena o pelle su una carta da filtro assorbente appositamente realizzata (carta). Il sangue impregna completamente la carta e si asciuga in poche ore. I campioni vengono conservati in sacchetti di plastica a bassa permeabilità ai gas con l'aggiunta di un essiccante per ridurre l'umidità. Possono essere conservati a temperatura ambiente anche in climi tropicali.

B. Siero

Raccogliere il sangue intero dalla vena giugulare, dalla vena cava inferiore o dalla vena dell'orecchio o al momento dell'autopsia utilizzando vacutainer sterili senza anticoagulante (tappo rosso). Quando viene inviato al laboratorio per ottenere il siero, il sangue deve essere incubato per 14-18 ore a 4 ± 3 °C per separare il coagulo. Il coagulo viene scartato e, dopo centrifugazione per 10-15 minuti, si ottiene un surnatante (siero). Se il siero è rosso, significa che il campione è emolizzato e questo può portare a una reazione falsa positiva nel test ELISA. L'emolisi di solito si verifica quando un animale, come un cinghiale, è già morto. Il siero può essere immediatamente testato con metodi di rilevamento di anticorpi e virus o conservato a temperatura<-70 °С до дальнейшего использования. Для обнаружения антител температура хранения может быть -20 °С, но для обнаружения вируса это не оптимально.

v. Campioni di tessuti e organi

Sebbene tutti gli organi e i tessuti del suino possano essere utilizzati per testare la presenza di PSA (principalmente nelle forme acute e subacute della malattia), gli organi preferiti sono la milza, i linfonodi, il fegato, le tonsille, il cuore, i polmoni e i reni. Di questi, la milza e i linfonodi sono considerati i più importanti, poiché di solito contengono grandi quantità di virus. Il midollo osseo è utile anche nel caso di animali selvatici morti, poiché potrebbe essere l'unico tessuto relativamente ben conservato se l'animale è morto da tempo. I tessuti intra-articolari delle articolazioni possono essere esaminati per verificare la presenza di isolati a bassa virulenza. Si raccomanda di conservare i campioni a 4°C e di consegnarli al laboratorio il prima possibile (entro 48 ore). Se ciò non è possibile per motivi tecnici, i campioni possono essere conservati in un congelatore o in azoto liquido. Per l'esame istopatologico si possono utilizzare in parallelo campioni in formalina tamponata al 10%. Sebbene non possano essere utilizzati per ulteriori test di isolamento del virus, possono essere utilizzati per PCR e immunoistochimica.

Per il rilevamento del virus mediante PCR, l'isolamento del virus e/o dell'antigene mediante ECBA, è necessario preparare una sospensione di tessuto omogeneizzato al 10% (p/v) in soluzione salina tamponata con fosfato. Dopo la centrifugazione, si consiglia di filtrare il supernatante e trattarlo con antibiotico allo 0,1% per 1 ora a 4±3°C. La sospensione tissutale omogeneizzata può essere utilizzata immediatamente per il rilevamento della PSA e del genoma o conservata in< -70 °С для дальнейшего использования. Для ПЦР рекомендуется обработать разведенный 1/10 супернатант параллельно с неразведенным материалом. Экссудаты тканей, полученных, главным образом, из селезенки, печени и легких, очень полезны для проверки на наличие антител с использованием ИПТ и нМФА (Гайардо, 2015 г.).

d. Esemplari di acari molli

Le zecche molli di Ornithodoros possono essere testate per PSA e genoma. Le zecche possono essere trovate nelle tane dei cinghiali africani, nelle fessure/buchi nei porcili e occasionalmente nelle tane dei roditori all'interno dei porcili. Diversi tipi di zecche hanno diversi habitat e habitat preferiti. Esistono tre metodi per la raccolta degli acari: raccolta manuale, cattura dell'anidride carbonica e aspirazione sottovuoto. Dopo la raccolta, le zecche devono rimanere vive o conservate in azoto liquido per garantire una ritenzione ottimale del virus all'interno delle zecche ed evitare la degradazione del DNA.

Imballaggio e trasporto di campioni

Per ottenere una diagnosi corretta è importante selezionare i campioni giusti, imballarli con cura, etichettarli e, con un adeguato controllo della temperatura, inviarli rapidamente al laboratorio. La diagnosi di PSA è urgente ei campioni devono essere inviati al laboratorio appropriato più vicino per la via più breve. I campioni devono essere accompagnati da un documento di accompagnamento indicante il numero e il tipo di campioni, la specie animale, il luogo del prelievo (indirizzo, provincia, provincia, distretto, paese di origine). Dovrebbe inoltre elencare i test richiesti, il nome della persona che presenta i campioni, i segni clinici osservati, le lesioni significative, la morbilità, la mortalità, il numero di animali colpiti, l'anamnesi e quali tipi di animali sono colpiti. Nel caso di animali da compagnia, devono essere forniti il ​​proprietario, il nome dell'allevamento e il tipo di azienda, nonché un elenco delle diagnosi differenziali. Bisogna fare attenzione che ogni campione possa essere associato all'animale da cui è stato prelevato.

Tuttavia, le informazioni minime richieste possono variare da laboratorio a laboratorio. È prudente chiamare il laboratorio prima del campionamento per seguire la procedura corretta per l'invio dei campioni e per garantire che il numero prescritto di campioni possa essere analizzato o che i campioni siano conservati per il tempo richiesto.

I campioni devono arrivare al laboratorio il prima possibile per evitare il deterioramento della qualità e garantire i migliori risultati. Devono essere spediti in condizioni di sicurezza per evitare di contaminare altri animali o persone durante il trasporto e per evitare di contaminare i campioni stessi. I campioni spediti devono essere consegnati con materiali di raffreddamento sufficienti, come impacchi di ghiaccio, per evitare il degrado. Ricorda che una diagnosi accurata può essere fatta solo quando i campioni sono in buone condizioni.

Trasporto via terra

Quando si trasportano i campioni al laboratorio più vicino, devono essere seguite le norme e i regolamenti nazionali, anche se i campioni sono trasportati da veterinari. Per l'Europa, il documento principale è l'Accordo europeo relativo al trasporto internazionale di merci pericolose su strada (ADR). In altre regioni, devono essere osservati codici e regolamenti nazionali.

Se non disponibile, è necessario seguire i regolamenti modello delle Nazioni Unite stabiliti nel manuale dell'OIE per i test diagnostici e i vaccini per animali terrestri (2016; capitoli 1.1.2 e 1.1.3).

Il triplo imballaggio deve essere utilizzato anche in caso di trasporto su strada. Un esempio dettagliato delle caratteristiche di una confezione tripla è mostrato nella Figura 27.

Trasporto aereo

I campioni devono essere trasportati secondo le normative3‚ utilizzando un sistema di “triplo imballaggio”. In particolare, se i campioni vengono trasportati per via aerea, il mittente deve essere conforme alla International Dangerous Goods Regulations (DGR) della International Air Transport Association (IATA) e l'imballaggio deve essere conforme alla Packing Instruction 650 della DGR.

I campioni diagnostici di peste suina africana sono considerati pericolosi e devono essere adeguatamente imballati ed etichettati per prevenire la diffusione del virus. Pertanto, è necessario utilizzare materiali che soddisfino i requisiti tecnici (ovvero i requisiti IATA pertinenti per il trasporto di campioni diagnostici, come test di pressione 95 kPa, test di caduta). Per trovare fornitori di tali contenitori e confezioni, cerca in Internet con parole chiave come "95 kPa" e "UN3373" e "vial", "tube" o "bag", e in questo modo puoi ottenere le informazioni di cui hai bisogno.

• contenitori primari. I campioni devono essere conservati in un contenitore ermetico, a tenuta stagna e sterile (chiamato "contenitore primario") come mostrato nella Figura 27. Ogni contenitore primario non deve contenere più di 1 litro. Il coperchio di ogni contenitore deve essere sigillato con nastro adesivo o parafilm. Questi contenitori sigillati primari devono essere imballati separatamente in materiale ammortizzante e assorbente che, se fuoriuscito dai contenitori o dalle fiale, può assorbire il liquido e proteggere dagli urti. È importante etichettare ogni contenitore con inchiostro impermeabile in modo da poter identificare l'animale da cui è stato prelevato il campione.
• imballaggio secondario. Tutti questi contenitori primari devono essere collocati in contenitori secondari a tenuta stagna, ermeticamente sigillati, in plastica o metallo. L'imballaggio secondario deve, senza perdite, sopportare una pressione interna di 95 kPa (0,95 bar) in un intervallo di temperatura da -40 °C a 55 °C. Il materiale assorbente deve essere posto anche all'interno del secondo contenitore. Se diversi recipienti primari fragili vengono collocati in un contenitore secondario, ciascuno deve essere avvolto o separato dagli altri per evitare il contatto.

AVVERTIMENTO 1) il ghiaccio secco non deve essere collocato all'interno del recipiente primario o secondario a causa del rischio di esplosione. 2) Il contenitore primario deve essere in grado di sopportare, senza perdite, una pressione interna di 95 kPa (0,95 bar) in un intervallo di temperatura compreso tra 740 °C e 55 °C.

• Imballaggio esterno rigido. Il contenitore secondario deve essere imballato in un imballaggio esterno utilizzando materiale di rivestimento adeguato. Deve superare con successo il test di caduta da 1,2 m ed essere specificamente contrassegnato UN3373. L'imballaggio esterno non deve contenere più di 4 litri di liquido o più di 4 kg di solidi. Le quantità indicate non comprendono il ghiaccio, il ghiaccio secco o l'azoto liquido, utilizzati per mantenere freddi i campioni.

Campioni spediti a 4°C, solitamente per spedizioni brevi (1-2 giorni)
Tali campioni, imballati come sopra, devono essere spediti con refrigeranti (sufficienti a mantenere la temperatura desiderata) in imballaggi isolati e sicuri, in conformità con le IAEA Packing Instruction (IAEA) No. 650, se trasportati per via aerea.

Campioni spediti congelati (-20°C o -70°C)
Per spedizioni superiori a tre giorni, anche i campioni devono essere imballati come specificato, con sufficiente ghiaccio secco aggiunto in un sacchetto isolante per mantenere la temperatura. È importante assicurarsi che l'imballaggio secondario sia al centro della scatola, poiché quando il ghiaccio secco si "scioglie" il contenitore secondario potrebbe fuoriuscire. L'anidride carbonica (CO2) rilasciata a seguito dello "scioglimento" del ghiaccio secco abbassa il pH e inattiva il virus; pertanto tutti i contenitori primari e secondari devono essere chiusi ermeticamente. Quando si utilizza ghiaccio secco per mantenere freddi i campioni durante il trasporto, l'imballaggio esterno deve essere ventilato (cioè non sigillato ermeticamente) per evitare l'accumulo di pressione che potrebbe rompere il contenitore. Non congelare mai sangue intero o siero contenente un coagulante.

1. Etichettatura ed etichettatura di pericolo

La parte esterna della scatola (imballaggio esterno rigido) deve recare la seguente marcatura:

1. firmare “Sostanza biologica Categoria B” (Figura 28) e accanto il nome proprio di spedizione: “Sostanza biologica, Categoria B” (“Sostanza biologica, Categoria B”);
2. nome completo, indirizzo e numero di telefono del mittente;
3. il nome completo, l'indirizzo e il numero di telefono del destinatario;
4. nome completo e numero di telefono della persona responsabile che è a conoscenza della spedizione, ad esempio: persona responsabile: nome, cognome ‚+ 123 4567 890;
5. adesivo che recita: "conservare a 4 gradi Celsius" o "conservare a -70 gradi Celsius".
   Quando si utilizza il ghiaccio secco:
6. segno "ghiaccio secco" (Figura 29);
7. Numero ONU e designazione corretta per la spedizione del ghiaccio secco con la scritta "HOW TO COOL". Accanto deve essere scritto chiaramente il peso netto del ghiaccio secco in chilogrammi (Figura 29), ad esempio: UN 1845, DRY ICE, AS COOLANT, NET.## KG.

2. documentazione

I campioni inviati al laboratorio devono essere accompagnati da un documento di accompagnamento, il cui modulo è stato precedentemente presentato da tale laboratorio o, se non disponibile, una lettera di accompagnamento. Questa lettera dovrebbe includere informazioni sul proprietario dell'animale, nome dell'allevamento e dell'area, tipo di sistema di allevamento degli animali, dettagli dell'animale/animali colpiti, anamnesi, segni clinici e dati dell'autopsia. È inoltre necessario specificare i test richiesti. Documentazione di trasporto: se la spedizione attraversa i confini nazionali, a volte è richiesto un permesso di importazione o un permesso di esportazione, nonché una copia dell'autorizzazione del laboratorio ricevente che può accettare la sostanza infettiva per scopi diagnostici, ecc. Tali requisiti variano da paese a paese. Si consiglia di chiedere preventivamente al laboratorio del destinatario quali documenti sono necessari per l'importazione di campioni diagnostici.

3. Trasporto

Prima di inviare i campioni, contattare il laboratorio ricevente il prima possibile e informarlo della spedizione pianificata, fornire dettagli, data e ora di arrivo approssimative. È meglio utilizzare un servizio di corriere porta a porta che consegnerà direttamente al laboratorio. Una volta spediti i campioni, il corriere dovrà fornire al laboratorio ricevente la ragione sociale e l'identificativo postale, la lettera di vettura e/o il numero della lettera di vettura aerea, se presente. Se i campioni vengono trasportati per via aerea, è necessario prendere accordi preventivi con il laboratorio ricevente per ritirare la spedizione all'arrivo in aeroporto (alcuni laboratori internazionali dispongono di questo sistema, ma non tutti). Il laboratorio ricevente dovrebbe ricevere il prima possibile il nome della compagnia aerea, il numero del volo e il numero della lettera di vettura aerea. Alle persone è vietato portare con sé sostanze infettive come bagaglio registrato o a mano o su se stesse.

Trasporto del virus della PSA isolato/in coltura

La PSA isolata/coltivata deve essere trasportata come sostanza infettiva di categoria A. Numero ONU UN2900, nome proprio di spedizione Sostanze infettive che colpiscono gli animali (virus della peste suina africana) . Deve essere utilizzato un imballaggio conforme alle istruzioni di imballaggio 620. Anche le etichette di pericolo e le marcature all'esterno della scatola sono diverse.

I regolamenti sulle merci pericolose richiedono che tutti i dipendenti coinvolti nel trasporto ricevano una formazione adeguata. Ciò è particolarmente importante nel trasporto di sostanze infettive di categoria A, dove il personale deve essere addestrato in conformità con i requisiti, compresa la frequenza di corsi speciali, il superamento di esami e l'ottenimento di un certificato (per un periodo di due anni). Per ulteriori informazioni, consultare le linee guida dell'OMS per il trasporto di sostanze infettive.

Diagnosi di laboratorio della PSA

Poiché non esiste un vaccino, la diagnosi precoce e precoce della malattia è essenziale per attuare rigorose misure sanitarie e di biosicurezza per prevenire la diffusione della malattia. La diagnosi di PSA significa l'identificazione di animali che sono o sono stati precedentemente infettati da PSA. Al fine di ottenere le informazioni appropriate per l'attuazione dei programmi di controllo ed eradicazione, è necessario effettuare una diagnosi, che includa il rilevamento e l'identificazione degli antigeni specifici della PSA o del DNA e degli anticorpi. Quando si sceglie un test diagnostico (Figura 30), è importante considerare il decorso della malattia. Poiché gli animali possono trovarsi in diversi stadi della malattia, durante i focolai e nei programmi di controllo/eradicazione della malattia dovrebbero essere eseguiti sia i test di rilevamento del virus che quelli di rilevamento degli anticorpi.

Il periodo di incubazione per l'infezione naturale varia da 4 a 19 giorni. Entro due giorni prima della comparsa dei segni clinici, gli animali con infezione da PSA iniziano a eliminare grandi quantità di virus. La diffusione del virus può variare a seconda della virulenza di un particolare ceppo di ASFV. La conversione sierologica avviene tra il settimo e il nono giorno dopo l'infezione e gli anticorpi possono essere rilevati per tutto il resto della vita dell'animale (Fig. 30).

Un test positivo per la presenza del virus (cioè dell'antigene) indica che gli animali testati erano già infetti al momento del campionamento. D'altra parte, un test anticorpale positivo per la PSA indica un'infezione in corso o pregressa quando l'animale è guarito (e può rimanere sieropositivo per tutta la vita).

Dalla fine del 2015, i dati sierologici epidemiologici nell'Europa orientale hanno mostrato un aumento significativo dell'incidenza di animali sieropositivi, che è particolarmente evidente nella popolazione di cinghiali nei paesi svantaggiati dell'UE. Questi risultati indicano che alcuni animali sopravvivono per più di un mese e possono riprendersi dalla PSA, e in alcuni casi rimangono addirittura infetti subclinicamente, come osservato in precedenza nella penisola iberica, nelle Americhe e in Africa. Pertanto, i metodi di rilevamento degli anticorpi sono necessari per ottenere informazioni complete per l'attuazione dei programmi di controllo e di eradicazione delle malattie.

Rilevamento del virus PSA

Rilevazione del genoma della PSA mediante reazione a catena della polimerasi (PCR)
La reazione a catena della polimerasi (PCR) viene utilizzata per rilevare il genoma della PSA in campioni prelevati da maiali (sangue, organi, ecc.) e zecche. Piccoli frammenti di DNA virale vengono amplificati mediante PCR a quantità rilevabili. Tutti i test PCR convalidati possono rilevare il DNA virale anche prima della comparsa dei segni clinici. La PCR consente di diagnosticare la PSA entro poche ore dall'arrivo dei campioni in laboratorio. Nella rilevazione dell'ASFV, la PCR è un'alternativa sensibile, specifica e rapida all'isolamento del virus. La PCR ha una maggiore sensibilità e specificità rispetto ai metodi alternativi di rilevamento dell'antigene come il test ELISA (enzyme-linked immunosorbent assay) o il test dell'anticorpo fluorescente diretto (MFA). Tuttavia, una sensibilità PCR troppo elevata comporta un rischio di contaminazione incrociata, pertanto è necessario adottare adeguate precauzioni per ridurre al minimo questo rischio.

La PCR convenzionale e in tempo reale raccomandata nelle linee guida OIE per test diagnostici e vaccini per animali terrestri (2016) sono pienamente convalidate e sono buoni strumenti per la diagnosi di routine di questa malattia. Altri test PCR in tempo reale sono più sensibili di quelli raccomandati dalle linee guida dell'OIE e possono essere utilizzati per rilevare il genoma della PSA negli animali recuperati. I diversi set di primer e sonde utilizzati in questi metodi molecolari sono progettati per amplificare il locus nella regione codificante VP72, una regione ben studiata e altamente conservata del genoma dell'ASFV. Utilizzando questi metodi PCR è possibile rilevare un'ampia gamma di isolati appartenenti a tutti i 22 genotipi virali noti di p72 anche in campioni inattivati ​​o degradati.

La PCR dovrebbe essere scelta in caso di infezione da PSA iperacuta, acuta o subacuta. Inoltre, poiché la PCR rileva il genoma virale, la reazione può essere positiva anche quando non viene trovato alcun virus durante l'isolamento del virus, rendendo la PCR uno strumento molto utile per rilevare il DNA di ASFV nei suini infetti da ceppi a bassa o moderata virulenza. Sebbene non sia possibile determinare l'infettività del virus mediante PCR, questo metodo fornisce informazioni sulla sua quantità.

Isolamento del virus PSA
L'isolamento del virus si basa sull'inoculazione del campione in colture cellulari primarie suscettibili di origine suina, monociti e macrofagi. Se l'ASFV è presente nel campione, si replicherà nelle cellule sensibili, inducendo un effetto citopatico (CPE) nelle cellule infette. Pisi cellulare e CPE di solito si verificano dopo 4872 ore di emoassorbimento. L'importanza di questa scoperta risiede nella sua specificità, perché nessuno degli altri virus suini è in grado di emoassorbimento nelle colture di leucociti. Quando il virus si replica in queste colture, la maggior parte dei ceppi di ASFV induce una reazione di emoassorbimento (HAd) adsorbendo i globuli rossi suini sui leucociti infetti da ASFV per formare le cosiddette "rosette" (Fig. 31).

Tuttavia, è importante notare che il CPE, in assenza di emoadsorbimento, può essere causato dalla citotossicità dell'inoculo, dalla presenza di altri virus come l'ADV o da un isolato VASF non emoassorbente. In questi casi, la presenza di ASFV nel sedimento cellulare deve essere confermata da altri test virologici, come MFA, o mediante PCR. Se non si osservano cambiamenti o se MFA e PCR sono negativi, il surnatante deve essere sub-inoculato in colture fresche fino a 375 passaggi prima di poter escludere la PSA.

L'isolamento e l'identificazione del virus mediante GAd sono raccomandati come test di riferimento per confermare i risultati positivi di un test antigenico positivo preliminare (ELISA, PCR o MFA). Questi test sono consigliati anche quando la PSA è già stata confermata con altri metodi, soprattutto in caso di primo focolaio di PSA nell'area. Inoltre, l'isolamento del virus è obbligatorio se il tuo obiettivo è ottenere materiale virale per la successiva caratterizzazione con metodi molecolari e biologici.

Rilevamento dell'antigene della PSA mediante il metodo dell'anticorpo fluorescente diretto (MFA)
L'MFA può essere utilizzato per rilevare l'antigene ASFV nei tessuti dei suini. Il test consiste nella rilevazione microscopica di antigeni virali su strisci-impronte o sottili criosezioni di tessuto d'organo. Gli antigeni intracellulari vengono rilevati utilizzando anticorpi specifici coniugati con isotiocianato di fluoresceina (FITC). L'MFA può anche essere utilizzato per rilevare l'antigene ASFV nelle colture di leucociti che non mostrano AHAD, e quindi è possibile identificare ceppi di ASFV non emoadsorbenti. L'MFA può anche distinguere tra CPE causato da ASFV e CPE indotto da altri virus o citotossicità dell'inoculo. I controlli positivi e negativi vengono utilizzati per garantire la corretta interpretazione dei vetrini. È un test altamente sensibile per i casi di PSA iperacuta e acuta e può essere eseguito abbastanza rapidamente. Si tratta di un test affidabile, ma nella maggior parte dei casi viene sostituito dalla PCR e i reagenti non sono sempre disponibili. Tuttavia, è importante notare che nella forma subacuta e cronica della malattia, la sensibilità dell'AMF è molto inferiore (40%).

Rilevazione dell'antigene della PSA mediante antigene-ELISA
Gli antigeni virali possono anche essere rilevati utilizzando il saggio di immunoassorbimento enzimatico (ELISA), che è più economico della PCR e consente di testare campioni su larga scala in breve tempo senza attrezzature di laboratorio speciali.

Tuttavia, come nel caso dell'AMF, nella forma subacuta e cronica della malattia, la sensibilità dell'antigene-ELISA è significativamente ridotta. Inoltre, i campioni sul campo sono spesso in cattive condizioni e questo può anche ridurre la sensibilità del test. Pertanto, si raccomanda di utilizzare l'antigene-ELISA (o qualsiasi altro test ELISA) solo come test "di gruppo", insieme ad altri test virologici e sierologici.

Rilevamento degli anticorpi della PSA

I test sierologici sono i test diagnostici più comunemente utilizzati per la loro semplicità, il costo relativamente basso e il fatto che non richiedono una grande quantità di attrezzature o laboratori specializzati. Poiché non esiste un vaccino contro la PSA, la presenza di anticorpi contro la PSA indica sempre un'infezione in corso o pregressa. Inoltre, gli anticorpi contro la PSA compaiono subito dopo l'infezione e persistono per diversi anni. Tuttavia, nelle infezioni iperacute e acute, i suini spesso muoiono prima che i livelli di anticorpi raggiungano livelli rilevabili. Pertanto, si raccomanda di raccogliere campioni e rilevare il DNA virale già nelle prime fasi di un focolaio.

I seguenti test sono raccomandati per la rilevazione degli anticorpi contro la PSA: ELISA per lo screening anticorpale e, come conferma, immunoblotting (IB) o anticorpi fluorescenti indiretti (nMFA). Il test dell'immunoperossidasi indiretta (IPT) può essere utilizzato come test di conferma alternativo per rilevare gli anticorpi della PSA nel siero e nell'essudato tissutale. Può essere utilizzato con un gran numero di campioni, non richiede costose apparecchiature per microscopio a fluorescenza e fornisce una sensibilità sufficiente.

Rilevazione degli anticorpi della PSA mediante test ELISA
ELISA è una tecnica molto utile ed è ampiamente utilizzata negli studi sierologici su larga scala di molte malattie animali. Alcune delle caratteristiche più importanti di questo metodo sono l'elevata sensibilità e specificità, la velocità di esecuzione, il basso costo e la facile interpretazione dei risultati. Grandi popolazioni possono essere sottoposte rapidamente a screening con apparecchiature automatizzate.

Per rilevare gli anticorpi contro la PSA nei campioni di siero, ELISA utilizza l'etichettatura degli anticorpi con determinati enzimi. Quando l'antigene e l'anticorpo si legano l'un l'altro, l'enzima provoca una reazione che provoca un cambiamento di colore, identificando così la presenza di PSA. Una varietà di metodi commerciali e in laboratorio, come l'ELISA indiretto o bloccante, sono attualmente utilizzati per rilevare gli anticorpi della PSA.

Il siero processato in modo errato o mal conservato (a causa di conservazione o trasporto inadeguati) e campioni emolizzati possono causare fino al 20% di falsi positivi. Pertanto, tutti i campioni positivi e dubbi dopo il test ELISA devono essere testati con metodi di conferma sierologici alternativi.

L'immunoblotting (IB) è un test rapido e sensibile per il rilevamento e la caratterizzazione delle proteine. Utilizza il riconoscimento antigene-anticorpo deterministico specifico. Questo test utilizza strisce di antigeni che trasportano antigeni virali. Il test comprende la solubilizzazione, la separazione elettroforetica e il trasferimento delle proteine ​​alle membrane (di solito si usa la nitrocellulosa). La membrana viene ricoperta con anticorpi primari per un bersaglio specifico e quindi etichettati con anticorpi secondari per visualizzare una reazione positiva.

Le prime proteine ​​virali che inducono anticorpi specifici per la PSA nei suini reagiscono invariabilmente all'IB in tutti gli animali infetti. Negli animali sopravvissuti, le reazioni diventano positive con sieri ottenuti da animali 7-9 giorni dopo l'infezione e fino a diversi mesi dopo l'infezione. I sieri di animali vaccinati contro altri virus possono dare reazioni false positive. In tali casi, dovrebbero essere utilizzati metodi di conferma alternativi come IPT o MFA.

Rilevamento di anticorpi PSA mediante anticorpi fluorescenti indiretti (nMFA)
Il test si basa sulla rilevazione degli anticorpi della PSA legati a un monostrato di cellule renali di scimmia verde africana infettate con PSA adattato. La reazione antigene-anticorpo viene rilevata utilizzando un coniugato marcato con fluoresceina. I campioni positivi mostrano una fluorescenza specifica nel citoplasma delle cellule infette. nMFA è un metodo rapido per la rilevazione degli anticorpi della PSA nel siero, nel plasma o nell'essudato tissutale, con elevata sensibilità e specificità.

Rilevazione degli anticorpi della PSA mediante un test dell'immunoperossidasi indiretta (IPT)
L'IPT è un metodo immunocitochimico a cellule fisse per determinare la formazione di un complesso antigene-anticorpo sotto l'influenza della perossidasi. In questo metodo, le cellule renali di scimmia verde vengono infettate con un isolato di ASFV adattato a queste colture cellulari. Le cellule infette vengono fissate e utilizzate come antigeni per determinare la presenza di specifici anticorpi anti-PSA nei campioni. Come l'MFA, l'IPT è un metodo rapido, altamente sensibile e altamente specifico per rilevare gli anticorpi della PSA nel siero, nel plasma o nell'essudato tissutale. L'interpretazione dei risultati è più semplice rispetto all'MFA grazie al sistema di imaging enzimatico utilizzato.

Riassumendo, possiamo dire che i moderni test diagnostici consentono di diagnosticare con sicurezza la PSA combinando metodi per rilevare sia il virus che gli anticorpi. La PCR in tempo reale è il metodo diagnostico virologico più utilizzato per il rilevamento sensibile, specifico e rapido del DNA di ASFV. A causa della possibilità di contaminazione incrociata, un risultato PCR positivo di un singolo animale proveniente da un habitat naturale (ad es. cinghiale) o un risultato PCR positivo di un gruppo di animali deve essere confermato da ulteriori test virologici in combinazione con test sierologici, patologici e risultati epidemiologici. Poiché la PCR rileva la presenza di DNA virale e non di virus vivo, si raccomanda vivamente di eseguire l'isolamento del virus da campioni infetti prima che venga confermato un focolaio se è interessata una nuova regione.

Dati i limiti dei diversi metodi, i test ECBA convalidati sono il metodo migliore per rilevare gli anticorpi della PSA, in particolare per lo screening dei campioni di siero. Test di conferma come IB, nMFA o IPT sono fondamentali per identificare risultati falsi positivi dalla BCE. Inoltre, nMFA e IPT sono i metodi raccomandati per l'analisi degli essudati tissutali e dei campioni di plasma, fornendo un quadro epidemiologico completo e consentendo di determinare il tempo dell'infezione.

Una diagnosi accurata di PSA dovrebbe essere basata su risultati virologici e sierologici, nonché su dati clinici, patologici ed epidemiologici. La tabella 5 mostra le caratteristiche dei principali metodi di laboratorio per la diagnosi di PSA.

Prevenzione e controllo

La peste suina africana differisce dalla maggior parte delle altre malattie animali transfrontaliere in quanto non esiste un vaccino o una cura disponibile per prevenire o curare la malattia. Pertanto, è particolarmente importante che le regioni esenti da questa malattia rimangano tali anche in futuro. Prevenire l'introduzione della PSA nelle popolazioni di suini domestici e selvatici e controllare ed eradicare la malattia non appena viene rilevata sono i modi migliori per ridurre al minimo l'impatto di questa malattia. Esistono, tuttavia, anche esempi riusciti di eradicazione della PSA, ad esempio in Brasile, Portogallo, Spagna o Costa d'Avorio.

La prevenzione inizia con l'introduzione di severe misure alla frontiera e la sensibilizzazione di tutte le parti interessate. La diagnosi precoce, la diagnosi precoce, la risposta precoce e una buona comunicazione sono fondamentali per ridurre al minimo la diffusione della malattia dopo un'introduzione. Per capire quali misure saranno più efficaci, è importante tenere presente come si trasmette la PSA: es. prima di tutto, quando si sposta carne di maiale infetta e prodotti da essa (l'infezione si verifica dopo aver mangiato); per contatto diretto con animali vivi, compresi i cinghiali; e attraverso i morsi delle zecche di Ornithodoros.

Le misure possono essere prese a livello istituzionale o individuale (ad es. agricoltori), la maggior parte di queste misure comporta il miglioramento della biosicurezza. Le azioni di prevenzione e controllo possono essere condotte attraverso iniziative private o pubbliche, ma per raggiungere il livello ottimale di solito è necessaria una combinazione di entrambe. Gli agricoltori svolgono un ruolo chiave, ma potrebbero aver bisogno di sostegno tecnico e finanziario.

Per ulteriori informazioni, consultare le due linee guida della FAO: Good Emergency Management Practice (GEMP): Fundamentals (FAO, 2011) e Good Biosecurity Management Practice in the Swine Sector (FAO, 2010).

Consapevolezza
La sensibilizzazione e la fornitura di informazioni/assistenza tecnica e formazione a tutte le parti interessate ha un impatto positivo diretto sull'attuazione di tutte le attività di prevenzione, controllo e sorveglianza delle malattie. Pertanto, la sensibilizzazione è considerata la misura più conveniente. La consapevolezza aiuta i produttori di suini a prendere decisioni rapide ed efficaci nell'attuazione delle misure di prevenzione e controllo.

Le persone a contatto con i suini dovrebbero essere consapevoli di come prevenire e reagire alla PSA. Questi includono veterinari e allevatori, nonché tutti coloro che sono coinvolti nella filiera del mercato, ad es. persone addette al trasporto, vendita, macellazione e macellazione di suini; fornitori di servizi (ad es. veterinari privati, distributori di mangimi, ecc.); e in alcuni casi, il pubblico in generale. Nel caso dei cinghiali, i destinatari sono anche cacciatori, silvicoltori e lavoratori forestali.

È molto importante stabilire contatti regolari tra il servizio veterinario (professionisti o para-professionisti) e gli allevatori/commercianti di bestiame. Queste dovrebbero essere non solo visite di routine, ma anche "visite domiciliari" per indagare e fornire assistenza in relazione alla malattia. In questo modo, gli allevatori acquisiranno fiducia nel cercare l'aiuto veterinario ufficiale di fronte a malattie insolite e potenzialmente devastanti come la PSA. Questo approccio dal basso consentirà inoltre di tenere conto del contributo degli agricoltori nello sviluppo di strumenti di prevenzione, gestione e strategia. Per quei paesi in cui il settore privato è il fornitore di servizi veterinari ufficiali, è necessaria un'ulteriore interazione tra loro e le autorità veterinarie (GEMP, 2011).

Tutte le parti interessate dovrebbero essere consapevoli della potenziale gravità della PSA, di come rilevarla e prevenirla (ovvero la presentazione clinica) e della necessità di segnalare immediatamente qualsiasi sospetto di PSA al servizio veterinario (ovvero sorveglianza passiva). Quest'ultimo è particolarmente importante in quanto gli allevatori possono percepire la morte di un gran numero di suini come "normale". Dovrebbero essere comunicate anche le misure per ridurre la probabilità di infezione. I pericoli di nutrirsi di rifiuti alimentari e altre violazioni della biosicurezza devono essere sottolineati, specialmente per i piccoli proprietari e il settore privato. Se la PSA viene introdotta nel Paese, la questione dovrebbe essere ben pubblicizzata sulla stampa, sottolineando l'importanza di rafforzare la biosicurezza a tutti i livelli, controllare regolarmente i suini e segnalare tempestivamente alle autorità lesioni sospette e decessi. Anche le informazioni sulle politiche di controllo, come l'abbattimento, la compensazione e il ripopolamento, aiuteranno gli agricoltori a comprendere il loro ruolo in questo processo e rafforzeranno la loro volontà di collaborare.

Commercianti di bestiame, commercianti e commercianti sono spesso trascurati, nonostante si tratti di un importante gruppo target che deve essere informato. Il movimento degli animali effettuato dai commercianti è spesso un fattore chiave nella diffusione di malattie epizootiche come la PSA. Costruire la fiducia tra le autorità veterinarie e coloro che sono coinvolti nel commercio di animali è importante tanto quanto con gli allevatori. I temi principali dovrebbero essere generali, anche se si dovrebbe porre l'accento sull'importanza di acquisire animali da regioni indenni da malattia, in modo che non acquistino o vendano suini malati o suini provenienti da gruppi in cui si sono verificati casi di malattia e che rispettare le norme di quarantena, vaccinazione, test, identificazione degli animali e loro contabilità. Tuttavia, va evidenziato il potenziale impatto della PSA sul commercio interno e internazionale (GEMP, 2011).

Lo sviluppo e la diffusione dell'informazione e della formazione è svolto principalmente da agenzie governative (e talvolta ONG) attraverso servizi di divulgazione e advocacy agricola piuttosto che dal settore privato. Esistono molti modi per comunicare informazioni, come volantini, opuscoli, manifesti, messaggi televisivi e radiofonici, incontri organizzati da leader religiosi o anziani di villaggio, ecc. Il formato dipende dal gruppo target. In alcuni casi, tuttavia, è necessaria una preparazione più approfondita. Quando si tratta di materiali di sensibilizzazione, esistono diversi formati, dai corsi online alla tradizionale formazione faccia a faccia. Quando è necessario fornire informazioni a un gran numero di persone, il modello di formazione dei formatori può essere l'approccio migliore. Questo approccio viene anche definito "formazione a cascata" perché questi programmi sono progettati per formare persone che a loro volta ne formeranno altre.

Prevenzione
Il rischio di introdurre PSA (o qualsiasi altro agente patogeno) è ridotto se vengono applicate buone pratiche di biosicurezza non solo in allevamento, ma in ogni fase della filiera, come mercati di animali vivi, macelli, trasporto di animali, ecc. Particolare attenzione dovrebbe essere prestata alle piccole operazioni commerciali, come i cortili, che hanno bassi standard di biosicurezza, i mercati in cui gli animali si riversano da molte fonti. Sono fondamentali per la diffusione della PSA e sebbene si applichino gli stessi concetti di biosicurezza, sono state sviluppate misure e istruzioni specifiche per loro.

Dovrebbero essere utilizzate misure di biosicurezza per evitare l'ingresso di agenti patogeni nell'allevamento o nell'allevamento (biosicurezza esterna) e per prevenire o rallentare la diffusione della malattia negli animali non infetti nell'allevamento o nell'allevamento dopo l'infezione (biosicurezza interna) e fermare l'infezione altri maiali al chiuso o selvatici. Con le normative sulla biosicurezza imposte dal governo negli allevamenti, le esigenze e le aspettative variano a seconda del sistema di allevamento e delle condizioni geografiche e socio-economiche locali (dagli allevamenti indoor su larga scala agli allevamenti di suini al pascolo nei piccoli villaggi). Le questioni di biosicurezza globale sono rilevanti per tutti i sistemi di produzione, ma sono particolarmente problematiche per le piccole famiglie nei paesi in via di sviluppo e nei paesi con economie in transizione. Tuttavia, un'ampia gamma di opzioni per migliorare la biosicurezza, ad esempio a volte semplici come migliorare la tenuta dei registri, significa che tutte le aziende agricole possono migliorare le loro pratiche di prevenzione e controllo delle malattie.

La capacità degli agricoltori di attuare misure di biosicurezza in azienda dipende dalle caratteristiche del loro sistema produttivo, dalle loro conoscenze tecniche e dalle risorse finanziarie. I responsabili del miglioramento dei programmi di biosicurezza devono avere una conoscenza approfondita dei vari sistemi e comprendere le persone coinvolte nella produzione di suini, ad esempio perché tengono gli animali e quali risorse hanno. Tenendo conto di questi fattori, saranno in grado di sviluppare strategie di biosicurezza sostenibili nelle aziende agricole e lungo le catene di produzione e del valore.

Esistono differenze tra le misure di biosicurezza in azienda prima di un focolaio (contenimento biologico) e dopo che si è verificato un focolaio (biocontenimento), sebbene queste buone misure di prevenzione e gestione siano strettamente correlate. Per distinguere i metodi di prevenzione della PSA dalla prevenzione generale delle malattie, è necessario tenere conto delle modalità di trasmissione della PSA. Di seguito sono elencate alcune delle più importanti misure di biosicurezza. Maggiori informazioni sulla biosicurezza possono essere trovate nelle Linee Guida FAO per le Buone Pratiche di Biosicurezza nel Settore Suino.

Nutrire gli avanzi di cibo
I mangimi sono un importante punto di controllo per la diffusione sia della PSA che di altre malattie. Per sua natura, lo spreco alimentare è un modo conveniente, economico, ma molto pericoloso per nutrirsi. L'alimentazione delle frattaglie presenta un rischio molto elevato di infettare potenzialmente una popolazione di suini sani con una serie di malattie. Un divieto effettivo di nutrire le frattaglie sarebbe la soluzione ideale, ma è improbabile che venga applicato a livello familiare in quanto va contro il motivo principale per cui si tengono i maiali, vale a dire costi minimi di alimentazione dovuti allo spreco di cibo o al pascolo. In ogni caso, ai maiali non dovrebbero essere somministrati rifiuti alimentari contenenti carne di maiale, ma dovrebbero essere bolliti per 30 minuti, mescolando di tanto in tanto, e somministrati refrigerati ai maiali.

Restrizione alla circolazione dei suini
Dovrebbe essere incoraggiata la costruzione di porcilai che consentano condizioni igieniche. Inoltre, un perimetro recintato impedirà il contatto diretto e la diffusione di potenziali malattie dai maiali domestici ai cinghiali (e ai maiali selvatici) e viceversa dai maiali selvatici africani ai maiali domestici. Un perimetro recintato può anche limitare l'accesso dei maiali selvatici e domestici a rifiuti, frattaglie o carcasse di animali che potrebbero essere contaminati. Il recinto non solo trattiene i maiali domestici all'interno dell'edificio e quelli selvatici all'esterno, ma deve anche essere interrato ad una profondità di almeno mezzo metro, in quanto i maiali possono scavare il terreno sotto il recinto. In generale, le autorità dovrebbero impedire la creazione di allevamenti di suini al pascolo, in quanto forniscono ai suini l'accesso a frattaglie o resti di animali potenzialmente infetti, consentono il contatto con cinghiali infetti, altri suini allevati all'aperto o suini selvatici.

Tuttavia, come l'alimentazione dei rifiuti, i metodi tradizionali di allevamento dei maiali non sono facili da modificare, poiché molte aziende agricole potrebbero decidere che non ha senso allevare (e nutrire) i maiali in tali condizioni. Una parte significativa del settore suino opera sulla base del fatto che i maiali possono pascolare liberamente. Pertanto, qualsiasi mossa verso un sistema più chiuso, con il conseguente aumento dei costi dei mangimi, rischia di provocare resistenze da parte di molti piccoli agricoltori.

È difficile implementare un sistema di biosicurezza efficace se i maiali trascorrono la maggior parte della giornata liberamente a rovistare tra i rifiuti. Tuttavia, si possono ancora consigliare alcune semplici precauzioni con un minimo dispendio di tempo e denaro. È possibile applicare recinzioni perimetrali intorno all'intero villaggio perché si presume che i suini dello stesso villaggio abbiano lo stesso stato sanitario. Tuttavia, questa soluzione non è sempre pratica. È utile notare i vantaggi dell'isolamento nella prevenzione di furti, incidenti stradali e predatori. In generale, quando si mantiene la biosicurezza negli allevamenti all'aperto, si dovrebbe prestare maggiore attenzione al controllo dei mangimi, dell'acqua e dei pascoli, nonché della fauna selvatica e dei visitatori.

Pulizia e disinfezione
In azienda, le attrezzature e le strutture devono essere pulite e disinfettate frequentemente. Porcilai, attrezzature, veicoli, ecc. devono essere ripuliti dalla contaminazione organica prima della disinfezione. I dipendenti e i mezzi (scarpe, attrezzature, ecc.) devono essere disinfettati all'ingresso/entrata dell'allevamento e all'uscita/uscita dall'allevamento. I disinfettanti che si sono dimostrati efficaci includono detergenti, ipocloriti e glutaraldeide. VASF è sensibile all'etere e al cloroformio. Il virus viene inattivato con idrossido di sodio 8/1000 (30 minuti), ipocloriti - 2,3% di cloro (30 minuti), formalina 3/1000 (30 minuti), ortofenilfenolo 3% (30 minuti) e composti di iodio (OIE, 2013 .) . Sono disponibili anche prodotti commerciali efficaci. Si dovrebbe prendere in considerazione l'impatto ambientale di questi agenti. Le apparecchiature che non sono facilmente disinfettabili devono essere esposte alla luce solare.

Altre misure di biosicurezza

• Il numero di visitatori dovrebbe essere ridotto al minimo e dovrebbe essere consentito l'ingresso solo dopo che le scarpe sono state pulite e disinfettate o gli indumenti e le scarpe sono stati cambiati, soprattutto nel caso di visitatori ad alto rischio come proprietari di bestiame e personale veterinario. Le persone che lavorano con i suini dovrebbero evitare il contatto con altre popolazioni di suini.
• Gli automezzi non devono entrare nell'allevamento e in particolare il carico e lo scarico dei suini deve avvenire al di fuori del perimetro del recinto. I camion che trasportano suini devono essere puliti e disinfettati dopo lo scarico.
• Le attrezzature non devono essere scambiate tra fattorie/villaggi senza un'adeguata pulizia e disinfezione.
• I lavoratori dovrebbero essere dotati di abbigliamento da lavoro e calzature destinati esclusivamente a questo scopo.
• Ove possibile, gli allevamenti dovrebbero operare come mandrie chiuse, con una fornitura limitata di nuovi animali.
• Gli animali di nuova acquisizione devono provenire da fonti affidabili ed essere messi in quarantena (cioè tenuti in isolamento a scopo di osservazione) per almeno 14 giorni.
• Gli allevamenti dovrebbero essere situati a una distanza adeguata l'uno dall'altro.
• Nell'allevamento dei suini va osservata la segregazione per età (secondo il sistema “vuoto-occupato”).
• Suini morti, liquami e residui di carcasse lasciati dopo la macellazione devono essere smaltiti correttamente, fuori dalla portata dei maiali selvatici e dei maiali domestici al pascolo.
• I maiali che sono stati nel mercato del vivo non dovrebbero essere restituiti alla fattoria. Tuttavia, se riportati mentre lei è, devono essere tenuti in quarantena per 14 giorni prima di essere introdotti nell'allevamento.
• Il personale deve essere addestrato alle buone pratiche igienico-sanitarie e al riconoscimento delle malattie.
• Tenere gli uccelli selvatici, i parassiti e altri animali lontani dai porcili, dai mangimi e dai sistemi idrici.

Analisi dei rischi e procedure di import-export
Il concetto di biosicurezza può essere applicato anche a livello nazionale. Proprio come in un allevamento, l'unico modo per impedire l'ingresso della PSA in paesi esenti da questa infezione è attraverso una rigorosa politica per l'importazione sicura di suini e prodotti ad alto rischio, ad es. carne di maiale e prodotti a base di carne di maiale, sperma di maiale, pelli, ecc. Tali misure preventive aiutano a ridurre l'incidenza della malattia e le sue conseguenze. Linee guida dettagliate sono disponibili nel Codice sanitario internazionale per gli animali terrestri dell'OIE (2016). GEMP (2011) fornisce quanto segue:

• Dovrebbe essere mantenuta un'adeguata consapevolezza per fornire un allarme tempestivo sui cambiamenti nella distribuzione e nell'epidemiologia nei paesi colpiti e nei partner commerciali. Dovrebbero essere raccolte informazioni sui punti di ingresso nel paese dei suini e delle filiere suine, la distribuzione degli allevamenti in base al loro ciclo produttivo, i suini selvatici, le vendite di animali, i macelli, ecc. Questi dati aiuteranno nell'analisi del rischio di tutte le potenziali rotte di ingresso e distribuzione. Questo dovrebbe essere effettuato su base regolare e in base alla valutazione del rischio. Le misure adottate devono essere dinamiche e adeguate al grado di rischio.
• Impedire l'introduzione dell'agente patogeno nell'ambito delle importazioni legittime attraverso ulteriori restrizioni mirate in conformità con gli standard internazionali riconosciuti. Le restrizioni alle importazioni ridurranno i rischi esistenti nel commercio e garantiranno la massima efficacia della “barriera di quarantena”.
• Le dogane, le autorità di regolamentazione e le autorità di quarantena devono effettivamente "intercettare" alimenti illegali/non regolamentati e altri materiali pericolosi negli aeroporti internazionali, nei porti marittimi e ai valichi di frontiera. I materiali confiscati devono essere distrutti o smaltiti in modo sicuro e non gettati alla portata di persone o animali. Gli eventi recenti indicano che occorre prestare particolare attenzione al corretto smaltimento dei rifiuti alimentari provenienti da aerei, navi o veicoli provenienti da paesi svantaggiati, preferibilmente mediante incenerimento o, se possibile, mediante lavorazione di materie prime animali non alimentari.
• Prendere in considerazione la possibilità di testare i prodotti per alcune malattie preoccupanti prima e dopo l'importazione, a seconda del livello di rischio.
• Creare ed espandere lo scambio transfrontaliero di informazioni con i governi vicini.

Controllo
Quando si sospetta un focolaio, è importante adottare misure immediate appropriate. I veterinari, così come i proprietari di aziende agricole, i lavoratori e le altre parti interessate, devono fare tutto il possibile per contenere e prevenire l'ulteriore diffusione di questa malattia. Poiché gli animali infetti da PSA iniziano a diffondere il virus 48 ore prima della comparsa dei segni clinici, l'eliminazione di mangimi, lettiere e animali (sia vivi che macellati) dai locali infetti è fondamentale.

Dopo che la malattia è stata rilevata e confermata, è necessario:

1. ricorrere a un piano di emergenza;
2. valutare il focolaio iniziale (ad es. dimensioni, distribuzione geografica, epidemiologia) e determinare quali misure di controllo potrebbero essere necessarie;
3. attuare tempestivamente e integralmente le misure di controllo;
4. monitorare i progressi e adeguare le politiche;
5. continuare a scambiare informazioni e dati con le amministrazioni limitrofe;
6. comunicare con il pubblico e tutte le parti interessate, inclusa l'OIE (GEMP, 2011).

Le misure adottate per controllare ed eradicare la malattia dipenderanno in gran parte, almeno inizialmente, dalla diffusione della malattia e dalla gravità dell'incursione prima che fosse scoperta. Maggiore è la diffusione della malattia e più allevamenti colpisce, minore è la probabilità che la macellazione sia efficace come mezzo di eradicazione. La macellazione è la misura più efficace quando può essere effettuata entro i primi giorni. Per fare ciò, è necessario identificare rapidamente la malattia e macellare gli animali colpiti immediatamente dopo il rilevamento, per i quali viene pagato un risarcimento. Se ciò non è possibile, potrebbe essere necessario introdurre controlli sui movimenti degli animali e altre azioni. Pertanto, è estremamente importante stabilire la distribuzione geografica e il numero di allevamenti colpiti all'inizio dell'epidemia (ovvero sorveglianza epidemiologica). Di solito il cosiddetto "caso indice" (primo caso trovato) non è effettivamente il primo (GEMP, 2011).

Altrettanto importanti sono le azioni nella fase finale, quando le manifestazioni cliniche della malattia sono cessate. Se i focolai di infezione passano inosservati, i risultati della campagna per debellare la malattia possono essere vanificati. Non bisogna perdere la vigilanza o abbandonare gli sforzi di sorveglianza e controllo quando le manifestazioni cliniche della malattia sembrano essere scomparse e non ci sono più perdite socio-economiche. Se la sorveglianza viene interrotta prematuramente, la PSA può riemergere.

Pianificazione di emergenza (GEMP, 2011)

Prepararsi a un'emergenza è la chiave per una gestione efficace delle emergenze. Tuttavia, la preparazione dovrebbe essere effettuata nella fase di avvertimento, cioè in "tempo di pace". È importante concordare in anticipo e avere una chiara comprensione di chi è responsabile di cosa e creare un'unica catena di comando e linee di comunicazione. In tempo di pace, la distribuzione delle responsabilità avviene spesso in modo diverso. Un vantaggio chiave della pianificazione è che predetermina le persone che saranno coinvolte nel processo e le costringe a riflettere attentamente sui problemi che potrebbero sorgere. Ciò consente di prevenire possibili errori o carenze anche prima dell'epidemia.

La partecipazione degli agricoltori può dare un contributo significativo alla pianificazione delle emergenze. È più probabile che le comunità rurali collaborino nelle emergenze se vedono che viene intrapresa un'azione rapida e decisiva e che alla fine ne trarranno beneficio. Dovrebbero anche essere consapevoli di aver contribuito alla pianificazione e che il loro contributo è stato preso in considerazione.

Questi piani e istruzioni sono documenti "vivi" che dovrebbero essere rivisti e aggiornati regolarmente (almeno ogni cinque anni) per riflettere eventuali cambiamenti intervenuti da allora.

I partecipanti dovrebbero ricevere regolarmente una formazione sulle procedure di rilevamento, segnalazione e risposta delle malattie, indagine e analisi dei focolai, ecc. Simulazioni regolari e corsi di formazione sul campo con la partecipazione di tutte le parti interessate aiutano a mettere in pratica i piani di emergenza e le istruzioni operative. La formazione e la pratica regolari sono un aspetto chiave per mantenere una reale capacità di controllo e per colmare le lacune del sistema attuale.

Quadro giuridico (GEMP 2011)

È necessaria un'autorità legale appropriata per agire rapidamente per controllare la malattia. Questi includono il diritto di entrare nell'allevamento (per scopi di sorveglianza, prevenzione e controllo), macellare e distruggere animali infetti e contagiati, stabilire controlli di quarantena e movimento, identificare aree infette e limitate, fornire risarcimenti, ecc.

Concedere poteri legali richiede tempo, quindi devono essere stabiliti in "tempo di pace". Dal momento che non è possibile sviluppare una serie di regole per ogni malattia, dovrebbe esistere una serie comune di poteri legali e regolamenti che si applicano alle malattie elencate per la notifica e il controllo.

A volte diventa necessario avvalersi del sostegno della polizia e delle forze dell'ordine, ad esempio, quando si limita la circolazione del bestiame, si stabiliscono quarantene e si protegge il personale.

Nei paesi con un sistema federale, dovrebbe essere applicata una legislazione uniforme e coerente in tutto il paese. Lo stesso dovrebbe essere osservato tra i paesi nelle regioni duty-free (cioè commercio estero senza restrizioni) di animali e prodotti animali, come la Comunità economica degli Stati dell'Africa occidentale (ECOWAS), la Comunità per lo sviluppo del Sudafrica (SADC), il mercato comune per Stati dell'Africa orientale e sudafricana (SOMEBA), Comunità dell'Africa orientale (EAC), Unione economica eurasiatica (CEE) o Unione europea (UE).

Finanziamento (GEMP, 2011)

L'esperienza ha dimostrato che il ritardo nell'ottenimento dei finanziamenti è uno dei principali ostacoli alla risposta rapida a focolai imprevisti. L'applicazione immediata di importi anche modesti contribuirà ad evitare spese significative in futuro. Pertanto, la pianificazione finanziaria avanzata è una componente importante della preparazione. Il piano finanziario dovrebbe coprire sia i costi correnti (ad es. supervisione, analisi dei rischi) sia i costi che potrebbero sorgere durante un'emergenza (ad es. controllo). Tali costi dovrebbero essere inclusi nel piano di emergenza.

Il finanziamento può coprire il costo dell'intera campagna. Di norma, coprono solo le fasi iniziali, la spesa di ulteriori fondi avviene dopo una revisione della campagna e dei fondi necessari per completare l'eradicazione della malattia. In alcuni paesi, sarebbe meglio se i fondi per i programmi di emergenza contro alcune malattie fossero forniti non solo dal governo, ma anche dal settore privato (condivisione dei costi).

Comunicazione
Un aspetto importante del controllo delle malattie è la comunicazione con le parti interessate a tutti i livelli, dagli agricoltori al pubblico in generale. È meglio accordarsi su chi effettuerà il colloquio e limitare la comunicazione solo agli addetti ai lavori e alle persone addestrate.

Controllo del movimento
La diffusione della PSA è dovuta principalmente alle attività umane e non al movimento di cinghiali o altri vettori di infezione. La diffusione della malattia dovuta al movimento di animali vivi e prodotti di origine animale può essere controllata limitandone i movimenti, che dovrebbero essere sostenuti dalla legislazione. È meglio che gli stessi proprietari di animali o di prodotti di origine animale capiscano che il rispetto del requisito è nel loro interesse.

Sfortunatamente, molto spesso, quando si sospetta un'epidemia, gli allevatori di maiali si affrettano a vendere animali da macello. La vendita di carne contaminata di animali malati è un grave rischio. I suini malati, anche nel periodo di incubazione della malattia, possono diffondere la PSA, soprattutto se l'animale viene venduto vivo.

A seguito di un focolaio o di un caso sospetto in un allevamento, dovrebbe essere introdotta al più presto una quarantena rigorosa, ad es. nessun maiale, carne di maiale o materiali potenzialmente contaminati devono lasciare l'allevamento. Nessuno dovrebbe lasciare la fattoria senza cambiarsi i vestiti o disinfettare vestiti e scarpe. I maiali ruspanti dovrebbero essere condotti al chiuso e rinchiusi.

Nella zona del focolaio (zona di restrizione), le autorità devono impedire qualsiasi commercio illegale di animali morti o malati e dei loro prodotti. I confini esatti di queste aree riservate non devono necessariamente essere circolari, ma dovrebbero essere presi in considerazione e dovrebbero essere utilizzate barriere naturali e confini amministrativi e qualsiasi informazione pertinente. I confini di queste zone devono essere chiaramente contrassegnati da segnali stradali.

È possibile creare varie zone e periodi di restrizione del movimento degli animali per prevenire la diffusione della malattia. Tali restrizioni saranno più efficaci se avranno un impatto minimo sui proprietari di animali domestici. Si raccomanda che:

1. tutti gli allevamenti di suini sono stati registrati ed è stata effettuata la registrazione di tutti gli animali;
2. tutti gli animali sensibili di queste aziende sono stati sottoposti a regolari esami veterinari;
3. gli animali sensibili (o i prodotti della loro lavorazione) non sono stati portati fuori dall'allevamento;
4. l'eccezione è la macellazione forzata sotto controllo ufficiale.

L'ispezione degli animali e l'istituzione di posti di blocco sono una parte importante del processo di attuazione del controllo del traffico. Tuttavia, i posti di blocco sulle strade principali possono causare interruzioni del traffico inaccettabili o essere proibitivi. Inoltre, i suini possono essere contrabbandati fuori dall'area riservata nascondendoli in veicoli o lungo strade secondarie non sorvegliate (GEMP, 2011).

Timbratura e smaltimento
Gli animali infetti e che muoiono attivamente sono la principale fonte di PSA. Tali animali possono anche portare a contaminazione indiretta da oggetti contaminanti (fomiti), inclusi veicoli, indumenti e, in particolare, calzature. La replicazione della PSA si interrompe quando l'animale muore. Tuttavia, le carcasse degli animali possono rimanere contaminate per un lungo periodo dopo la morte, da qui la necessità di uno smaltimento rapido ed efficiente (GEMP, 2011).

L'abbattimento include l'abbattimento degli animali infetti, più di solito tutti gli altri animali sensibili nell'allevamento e talvolta nelle aziende vicine o in contatto, ad es. coloro che sono entrati in contatto a causa del movimento di animali, persone o veicoli. È molto raro produrre macellazioni su larga scala, in particolare, anulari, unicamente sulla base della posizione geografica. La macellazione degli animali deve essere effettuata localmente e con umanità, utilizzando metodi delicati. La capacità produttiva in un simile massacro può essere sovraccaricata, quindi è necessaria un'attenta pianificazione delle risorse, delle attrezzature e del personale. Ciò è particolarmente vero quando si tratta di sopprimere grandi mandrie di suini commerciali.

Dopo lo stampaggio, le carcasse devono essere smaltite localmente, se possibile, in modo sicuro, ad es. devono essere inceneriti, compostati, riciclati o interrati per impedire l'accesso a maiali selvatici, cinghiali e altri spazzini (compresi gli esseri umani). Lo smaltimento di un gran numero di suini in tempi brevi è un grosso problema sia dal punto di vista logistico che dal punto di vista ecologico.

L'unico grosso problema con l'abbattimento è che i proprietari di maiali si oppongono alla macellazione degli animali in assenza di un indennizzo tempestivo e adeguato. Senza adeguati meccanismi di compensazione, è probabile che gli allevatori non segnalino sempre focolai di malattie e che la malattia si diffonda attraverso il movimento illegale di animali e prodotti infetti. Pertanto, nessuna campagna di abbattimento può essere applicata in assenza di un adeguato programma di compensazione.

Pulizia e disinfezione
La distruzione delle carcasse deve essere accompagnata da un'accurata pulizia e disinfezione di tutti i locali, veicoli e attrezzature. Sebbene la disinfezione con sostanze appropriate aiuti a eliminare il virus, la PSA può sopravvivere in un ambiente ricco di proteine ​​per lunghi periodi di tempo e in un'ampia varietà di condizioni.

La materia organica deve essere rimossa dai porcilai, dalle attrezzature, dai veicoli e da tutte le superfici che sono state a contatto con materiale contaminato. Le autovetture (soprattutto sottoscocca, lettiera se sono stati trasportati suini vivi, cassone) e gli addetti (scarpe, attrezzature, ecc.) devono essere puliti e poi disinfettati all'ingresso/entrata e all'uscita/uscita dagli allevamenti.

Disinfettanti di comprovata efficacia includono detergenti, ipocloriti e glutaraldeidi. VASF è sensibile all'etere e al cloroformio. Il virus viene inattivato con una soluzione di idrossido di sodio 8/1000 (30 minuti), ipocloriti - cloro 2,3% (30 minuti), formalina 3/1000 (30 minuti), ortofenilfenolo 3% (30 minuti) e composti di iodio (OIE, 2013). Sono disponibili anche prodotti commerciali efficaci. Si dovrebbe prendere in considerazione l'impatto ambientale di questi agenti. Le attrezzature difficili da disinfettare devono essere esposte alla luce solare.

Risarcimento (GEMP, 2011)

La politica di compensazione è la pietra angolare di qualsiasi politica di controllo delle malattie che richieda l'abbattimento di animali o la distruzione di proprietà. Il risarcimento è fondamentale per garantire che gli agricoltori informino tempestivamente le autorità di un focolaio. Mentre il risarcimento può essere considerato costoso da alcuni, l'incentivo che crea per un allarme tempestivo e rapido ridurrà il costo complessivo della gestione di un focolaio. Tutto sommato, questa è un'opportunità molto probabile per risparmiare denaro.

La compensazione può assumere molte forme, che sono state e sono ampiamente discusse. Per attuare un'accurata strategia retributiva, tutti gli aspetti devono essere attentamente analizzati, tenendo conto del contesto locale e con la partecipazione di tutti gli stakeholder. Il risarcimento può essere in contanti o beni, come animali sostitutivi. Ma indipendentemente dal tipo di indennizzo - contanti o animali, gli allevatori dovrebbero essere consultati, se possibile, prima che si verifichi un focolaio. Il vantaggio del contante è che permette agli allevatori di scegliere il tipo e il numero di animali che vogliono acquistare e, non da ultimo, la tempistica. Tuttavia, il pagamento in contanti può portare a corruzione e furto.

Dovrebbero essere corrisposti indennizzi per tutti gli animali macellati nell'ambito della macellazione obbligatoria, indipendentemente dal fatto che fossero infetti o macellati per una possibile esposizione all'infezione o per il benessere degli animali, come talvolta accade. In realtà, il governo compra gli animali e poi li uccide. Devono essere risarciti anche i beni ei beni distrutti durante la campagna di abbattimento obbligatorio. Dato che l'indennizzo ha principalmente lo scopo di incoraggiare gli allevatori a segnalare i focolai in modo tempestivo, non dovrebbe essere corrisposto per gli animali morti o macellati dal produttore prima della conferma del focolaio.

Il risarcimento è effettivo solo quando viene pagato poco dopo le perdite subite. Pertanto, è necessario pianificare in anticipo le modalità di pagamento dell'indennizzo a coloro che ne hanno diritto.

Gli importi dell'indennizzo dovrebbero basarsi sull'equo valore di mercato degli animali al momento della macellazione e, ove possibile, sul loro pieno valore di mercato. Tuttavia, alcuni esperti raccomandano che la compensazione sia appena inferiore al valore di mercato, sostenendo che anche gli agricoltori dovrebbero contribuire, ad esempio, al 10%. Meccanismi retributivi inadeguati o eccessivamente generosi possono favorire comportamenti lesivi del sistema di controllo.

La mancanza di un indennizzo adeguato e tempestivo per la macellazione degli animali può comportare:

1. che il focolaio non sarà segnalato;
2. macellazione di animali da parte di allevatori per autoconsumo o vendita;
3. nascondere animali o spostarli in altri locali;
4. smaltimento improprio della carcassa di un animale in luoghi accessibili ai suini domestici o selvatici.

Un risarcimento troppo generoso può incoraggiare allevatori disonesti che fanno affidamento sul fatto che se gli animali si infettano, riceveranno un risarcimento.

I produttori subiscono le perdite più gravi a causa delle perdite di produzione durante l'epidemia, non a causa di animali morti o restrizioni alla circolazione (ad esempio, perché non sono in grado di vendere animali). Tuttavia, queste perdite non sono prevedibili perché dipendono dalla durata complessiva e dalla gravità dell'epidemia. Pertanto, sono necessari altri meccanismi di sostegno (ad es. finanziario e sociale, oltre alla compensazione) che dovrebbero essere inclusi nel piano per assistere gli agricoltori interessati.

Rifornimento del bestiame

Una volta debellata la malattia, il passo successivo nel sistema di gestione della PSA è il ripristino della produzione nell'azienda agricola o nella regione. Dopo una massiccia epidemia, alcuni proprietari non sono disposti a rifornire o continuare ad allevare animali da fattoria. Ma la maggior parte degli agricoltori vuole ancora tornare allo stile di vita tradizionale e ricostituire il numero di maiali.

Prima di iniziare questo processo, dovresti assicurarti che l'agente patogeno nella fattoria sia distrutto. Ciò può essere ottenuto mediante pulizia e disinfezione, che dovrebbero essere eseguite due volte. Inoltre, è auspicabile migliorare il sistema di biosicurezza in allevamento prima del ripopolamento. Dopo la pulizia e la disinfezione dei locali vuoti devono trascorrere almeno 40 giorni, ma questo periodo dipende sempre dalla situazione e può essere stabilito solo dopo un'analisi dei rischi. Se vengono introdotti maiali indicatori (sentinelle), che è altamente raccomandato, allora la condizione degli animali dovrebbe essere osservata (clinicamente e sierologicamente) per identificare possibili reinfezioni. Se non si osservano segni di infezione dopo 40 giorni, questi maiali sentinella possono essere utilizzati come parte di un programma di ripopolamento.

I maiali per il ripopolamento, se possibile, dovrebbero essere acquistati nella stessa zona o nelle vicinanze. Tali animali sono adattati alle condizioni locali e gli agricoltori di solito conoscono molto bene le loro esigenze. Acquistare da più fonti significa acquistare animali con salute e stato immunitario diversi. Mescolare diversi animali crea una situazione stressante e può portare a infezioni incrociate.

Controllo degli acari

L'eradicazione degli acari Ornithodoros dai maiali infestati è un compito difficile, specialmente negli edifici più vecchi, a causa della longevità degli acari, della loro robustezza e della loro capacità di nascondersi in fessure che gli acaricidi non possono penetrare. La distruzione dell'habitat delle zecche (ad esempio, trattando le fessure in cui le zecche si nascondono o costruendo nuove strutture con materiali che non presentano fessure) contribuisce a ridurne il numero e la possibilità di trasmissione. I locali infestati non devono essere utilizzati come porcilai. Devono essere isolate in modo tale che i maiali non possano entrarvi, oppure distrutte e ricostruite in qualche altro luogo. Se gli agricoltori sono in grado di ricostruire locali precedentemente contaminati, allora dovrebbe essere fatto. Questo è anche un momento opportuno per considerare il miglioramento della biosicurezza.

Acaricidi e altri pesticidi possono essere applicati per disinfettare le lettiere o, a seconda del prodotto, direttamente sulla pelle dei suini.

Poiché gli insetti succhiatori di sangue possono diffondere meccanicamente la PSA in un allevamento, si raccomanda di eseguire programmi di controllo degli insetti nei locali infestati.

Gestione della fauna selvatica

Non ci sono misure realistiche che possono essere prese per prevenire la trasmissione della PSA nelle popolazioni di suini selvatici e zecche Ornithodoros. L'unica opzione è attuare misure preventive per proteggere i suini domestici dall'infezione. In alcune parti dell'Africa meridionale e orientale, dove si verifica il ciclo di infezione forestale, la costruzione di recinti adeguati o alloggi permanenti per i maiali domestici ha dimostrato con successo una protezione completa per oltre un secolo. Recinzioni e muri dovrebbero essere profondi almeno 0,5 m nel terreno per impedire l'accesso ai cinghiali africani che scavano nel terreno. L'altezza consigliata della recinzione è di 1,8 metri. Inoltre, in Sud Africa, nelle aree in cui si verifica il ciclo forestale di infezione, il controllo delle zecche Ornithodoros nei cinghiali africani e nelle tane viene effettuato lungo il perimetro degli allevamenti.

Se la PSA colpisce una popolazione di cinghiali o di suini selvatici, un controllo efficace diventa molto più difficile. La strategia consiste nel ridurre al minimo il contatto tra cinghiali e maiali domestici recintando i porcili, limitando il numero di maiali ruspanti o selvatici e garantendo un corretto smaltimento dei rifiuti di cucina e delle carcasse. Esistono opinioni diverse sul modo migliore per controllare la PSA nelle popolazioni di cinghiali. La rimozione delle carcasse di cinghiale durante un'epidemia e la successiva bonifica di queste aree, sebbene costosa, è stata ampiamente utilizzata con successo nell'Europa orientale. La caccia intensa può essere controproducente in quanto può spingere i cinghiali a spostarsi in altre zone. L'alimentazione può mantenere il cinghiale all'interno di un'area nota e ben definita, limitando così la dispersione dei cinghiali e la diffusione del virus. Tuttavia, l'alimentazione promuoverà anche uno stretto contatto tra gli animali, facilitando così la trasmissione delle malattie. Recintare aree aperte per evitare il movimento della fauna selvatica è difficile e costoso, non solo in termini di costruzione, ma anche di manutenzione. Ciò interferisce con il movimento e la migrazione in natura e la sua efficacia è discutibile in quanto i maiali selvatici saranno in grado di orientarsi sotto o sopra la recinzione. Anche l'uso di deterrenti è problematico. I cacciatori ei club di caccia, così come i servizi forestali, sono partner importanti nella sorveglianza e nel controllo della PSA nelle popolazioni di cinghiali.

Zonizzazione e compartimentazione

Quando una malattia è presente solo in una parte di un paese, la suddivisione in zone diventa un'importante strategia per l'eradicazione graduale e l'eradicazione del virus senza ostacolare il commercio dalle zone indenni da malattia. Per applicare la suddivisione in zone, le autorità nazionali devono definire zone infette e zone indenni da malattia e applicare controlli rigorosi sui movimenti di suini e prodotti tra di esse. La compartimentalizzazione è un altro approccio basato sulla creazione di una sottopopolazione con una propria catena di approvvigionamento nell'ambito di un sistema comune di gestione della biosicurezza. Queste sottopopolazioni sono chiaramente definite e separate da altre sottopopolazioni, con uno status diverso o potenzialmente diverso. La compartimentalizzazione è molto adatta per gli allevamenti di suini commerciali e consente di continuare l'attività aziendale anche nella zona infetta. I costi e la responsabilità dei compartimenti sono a carico del fabbricante e dei suoi fornitori, ma il controllo e l'autorizzazione restano di competenza delle autorità veterinarie competenti.

Peste suina africana (PSA)

(brevi informazioni di riferimento per dirigenti e dipendenti di aziende di allevamento di suini, nonché cittadini che allevano maiali in cortili privati)

AFRICANO peste suina (Febbre africana , Peste dell'Africa orientale , malattia di Montgomery) particolarmente pericoloso altamente contagiosomalattia virale dei suini domestici e selvatici, caratterizzata da rapida diffusione, elevata mortalità degli animali colpiti ed elevato danno economico.

La peste suina africana non rappresenta un pericolo per la vita e la salute umana!

Situazione epizootologica in Russia

Dal 2007 ad oggi, ASF è stata registrata sul territorio di 21 entità costituenti della Federazione Russa. Da allora sono stati individuati 235 punti sfavorevoli e 25 oggetti infettati dal virus. Nel 2011, la PSA è stata rilevata per la prima volta nelle regioni di Leningrado, Murmansk, Arkhangelsk, Tver, Kursk, Nizhny Novgorod, Kostroma, Saratov, Oreburg, nella Repubblica di Kalmykia. Situazione particolarmente acuta per PSAè ancora conservato nel territorio di Krasnodar e nella regione di Rostov. Nel 2011, circa 67.000 maiali sono stati distrutti a Kuban a causa della PSA, il danno è stimato in 1 miliardo di rubli.

Fonti del patogeno

Le fonti dell'agente eziologico della malattia sono maiali malati e guariti. Il trasporto del virus nei singoli animali dura fino a 2 anni o più. Il virus viene escreto dal corpo di animali infetti con sangue durante il sanguinamento nasale e di altro tipo, feci, urina, secrezioni delle mucose della cavità nasale e saliva. Gli animali si infettano principalmente mangiando mangime contaminato dal virus. L'infezione è possibile anche per via respiratoria, attraverso la pelle danneggiata e attraverso i morsi di zecche infette - portatori e serbatoi del virus della PSA, in cui il virus persiste per molti anni.

Il virus si diffonde tramite animali portatori infetti, compresi quelli nel periodo di incubazione, nonché attraverso vari oggetti infetti. Di particolare pericolo sono i prodotti della macellazione dei suini infetti (carne, prodotti a base di carne, lardo, sangue, ossa, pelli, ecc.)

Il cibo infetto da virus e i rifiuti del macello utilizzati per nutrire i maiali senza una cottura completa sono la causa principale dell'infezione da peste suina africana. Gli animali sani si infettano quando sono tenuti insieme a malati e portatori di virus, nonché quando si trovano in stanze e veicoli infetti. Il virus può essere diffuso da persone, vari tipi di animali domestici e selvatici, insetti, roditori che si trovavano nelle aree infette.

Resistenza al virus della PSA

Il virus è resistente a fattori fisici e chimici. A una temperatura di 5°Cdura fino a 7 anni, 18°C ​​- fino a 18 mesi, 37°C - 30 giorni, 50°C - 60 minuti, 60°C - 10 minuti, a temperature sotto lo zero - diversi anni. L'etere distrugge il virus entro 15 minuti. I farmaci contenenti formalina, fenolici e cloro distruggono rapidamente il virus. L'agente patogeno persiste nei cadaveri dei maiali fino a 10 settimane, nella carne di animali malati - fino a 155 giorni, nel prosciutto affumicato - fino a 5 mesi, nel letame - fino a 3 mesi.