Tossine (dal greco toxikon - veleno), sostanze di origine batterica in grado di inibire funzioni fisiologiche che porta alla malattia o alla morte di animali e umani. Per natura chimica, tutte le tossine sono proteine o polipeptidi. A differenza di altre sostanze tossiche organiche e inorganiche, le tossine, se ingerite, provocano la formazione di anticorpi.
In alcune malattie infettive (difterite, scarlattina), per determinare l'intensità dell'immunità e la suscettibilità dei bambini, vengono utilizzati test intradermici con l'uso di opportune tossine diluite. reazione positiva (infiammazione locale pelle nell'area di iniezione della tossina) è dovuto all'effetto tossico della tossina sui tessuti cutanei. Risultato negativo La reazione si spiega con la neutralizzazione della tossina introdotta nella pelle dalla corrispondente antitossina contenuta nell'organismo immunitario in quantità sufficiente per questo.
Le tossine sono ottenute da ceppi microbici tossigeni (diphtheria bacillus o scarlatinal streptococcus) mediante inoculazione su un mezzo nutritivo liquido (brodo a focolare aperto) seguita da filtrazione attraverso filtri batterici. Dalle tossine ottenute vengono preparate le tossine diagnostiche Shika (difterite) e Dick (scarlattina). Le tossine vengono iniettate per via intradermica, nella quantità di 0,2 ml (Shika) e 0,1 ml (Dick), nella parte centrale della superficie interna dell'avambraccio.
Le anatossine sono filtrati di colture in brodo di microrganismi tossigeni che hanno perso la loro tossicità a causa di un trattamento speciale, ma hanno conservato in larga misura le proprietà antigeniche e immunogeniche delle tossine originali.
Quando vengono introdotti nel corpo umano o animale, i toxoidi provocano la formazione di immunità antitossica, questa proprietà consente loro di essere utilizzati per la prevenzione di quelle malattie infettive, che si basano sull'azione delle esotossine rilasciate dai patogeni, nonché per l'iperimmunizzazione di animali - produttori di sieri antitossici.
Indipendentemente dal tipo di tossoide, la sua immunogenicità e antigenicità sono determinate dalle proprietà corrispondenti della tossina originale. Pertanto, nei laboratori che producono questi farmaci, viene prestata molta attenzione alla creazione di condizioni ottimali per la formazione di tossine.
Per ottenere tossine ad alta resistenza, sono necessari ceppi che si distinguono per una capacità particolarmente pronunciata di formare ctossine in condizioni artificiali. Non tutti i ceppi di batteri tossigeni possiedono queste proprietà. Ai fini della produzione vengono utilizzati ceppi adattati ad ambienti artificiali e che conservano in modo persistente la capacità di formare ctossine.
Le colture di agenti che formano tossine vengono conservate allo stato essiccato o su terreni ottimali per questo tipo di batteri. Prima di essere utilizzati per l'inoculazione di lotti di massa, i ceppi vengono passivati sul terreno utilizzato per ottenere la tossina.
A parità di altre condizioni, la forza delle tossine è determinata dalla qualità del terreno di coltura, quindi i laboratori prestano attenzione alla preparazione dei terreni di coltura. Le materie prime, i prodotti chimici e gli altri ingredienti che compongono il terreno sono sottoposti al controllo più accurato nei laboratori biochimici degli istituti di produzione.
Per la formazione delle tossine vengono utilizzati mezzi nutritivi liquidi, che includono acqua di carne e prodotti della digestione peptica (brodo di Martin, mezzo di Ramon) o triptica (mezzo di Pope) della carne.
Il processo di idrolisi della carne viene controllato determinando l'azoto amminico totale e il coefficiente di scissione proteica, che viene calcolato dal rapporto tra azoto amminico e totale. Vengono utilizzati anche caseina senza carne, mezzi semisintetici.
I carboidrati (glucosio, maltosio o una loro miscela) vengono aggiunti al mezzo nutritivo destinato alla formazione delle tossine. Quando i carboidrati vengono fermentati, vengono rilasciati un gran numero di l'energia necessaria per i processi di sintesi che avvengono in una cultura in via di sviluppo. L'aggiunta di carboidrati aumenta notevolmente la forza delle tossine prodotte nell'ambiente.
Oltre ai carboidrati, sono necessari alcuni metalli per la formazione di tossine in dosi minime. La formazione della tossina del bacillo della difterite è inibita tanto dall'eccesso di ferro nell'ambiente quanto dalla sua assenza. In presenza di quantità ottimali di ferro nell'ambiente, la formazione di tossine è notevolmente migliorata.
La formazione della tossina viene effettuata completamente a un certo pH del terreno. Nel frattempo, durante la crescita della coltura, il valore del pH cambia e può raggiungere indicatori tali da inibire la formazione della tossina.
Per eliminare questo ambiente vengono aggiunte sostanze tampone per mantenere il valore di pH desiderato. Una di tali sostanze con proprietà tampone è l'acetato di sodio, che viene aggiunto al brodo in una quantità dello 0,5-0,75%.
Dipende da caratteristiche biologiche vengono utilizzati microbi che formano tossine condizioni diverse la coltivazione e, in particolare, l'aerazione dell'ambiente è regolamentata. Il bacillo della difterite forma una tossina in condizioni di massima aerazione, al contrario, il bacillo del tetano e altri anaerobi tossigeni non hanno bisogno di ossigeno. Secondo questa è la prima volta Nel secondo caso, la coltura viene coltivata in uno strato sottile del terreno con un'ampia superficie di contatto con l'aria; nel secondo caso, il terreno viene versato in uno strato alto e vari adsorbenti di ossigeno (ovatta, eritrociti secchi) vengono aggiunto.
La temperatura di crescita e la sua durata variano per i diversi microbi. Comune al processo di formazione delle tossine è la necessità di un perfetto controllo della temperatura nell'incubatore. Le fluttuazioni di temperatura influiscono negativamente sulla forza della tossina. Pertanto, i termostati in cui si verifica la formazione di tossine sono dotati di termostati precisi.
In ogni singolo caso, la durata della coltivazione della coltura è determinata dall'intensità della formazione di tossine su una data serie di terreno. Per risolvere il problema del tempo di cessazione della coltivazione, viene determinata la forza della tossina irn del mezzo. In tempi diversi coltivazione.
Quando la forza della tossina raggiunge il suo massimo, viene separata dai corpi microbici, questo viene fatto filtrando attraverso speciali filtri batterici (microrganismi anaerobici) o normali filtri di carta (diphtheria bacillus).
La traduzione dei filtrati tossici vanatossina viene effettuata mediante esposizione prolungata alla formalina ad una temperatura di 39-40 °C. La formalina si combina con i gruppi amminici liberi degli amminoacidi, i polipeptidi e le proteine della tossina e quindi perde le sue proprietà tossiche. La transizione della tossina vanatossina avviene entro 3-4 settimane. Per una corretta formazione del tossoide, il pH della tossina è importante. La più favorevole è una reazione neutra o leggermente alcalina del mezzo.
Le anatossine sono caratterizzate da completa innocuità per gli animali. Tuttavia, con una neutralizzazione incompleta, possono rimanere residui di tossine che causano danni tardivi in \u200b\u200bun organismo sensibile. Pertanto, durante il controllo della sicurezza dei toxoidi, gli animali vengono monitorati a lungo. L'innocuità dei toxoidi è irreversibile. Nessun effetto porta al ripristino della tossicità perduta.
Le anatossine conservano quasi completamente le proprietà antigeniche delle tossine. Questo può essere verificato vari metodi in vitro (reazione di flocculazione, reazione di legame del tossoide) ed esperimenti su animali, nei quali l'introduzione del tossoide provoca la formazione di opportune antitossine e la creazione di immunità antitossica.
Le anatossine sono persistenti; tollerano ripetuti geli e disgeli, resistono alle alte temperature e sono stabili al di sotto conservazione a lungo termine.
Le anatossine contengono, oltre a specifiche proteine, anche sostanze di zavorra da cui possono essere rilasciate. metodi diversi. Si basano sulla capacità dei toxoidi di precipitare quando saturi di sali neutri, sali di metalli pesanti, acidi (cloridrico, tricloroacetico, metafosforico), nonché in presenza di alcol etilico e metilico a basse temperature. Questi metodi sono attualmente utilizzati per ottenere tossoidi concentrati purificati.
I tossoidi vengono adsorbiti su varie sostanze insolubili (sali di fosforo, idrossido di alluminio), questo viene utilizzato per preparare i tossoidi assorbiti, che sono caratterizzati da un assorbimento ritardato nel corpo, a seguito del quale si può ottenere un'immunità più intensa.
A causa della loro innocuità, elevata antigenicità e immunogenicità, i tossoidi sono il mezzo più prezioso per prevenire e curare una serie di malattie.
Attualmente sono stati ottenuti tossoidi: difterite, tetano, botulino, stafilococco, dissenteria, da tossine prodotte da agenti patogeni della cancrena gassosa, nonché dal veleno di serpente.
Le anatossine sono ottenute da esotossine dei corrispondenti patogeni trattandole con formalina allo 0,3-0,4% e conservate a 38-40°C per 3-4 settimane. Difterite, tetano e per Ultimamente tossoidi stafilococcici e colerici. Tossoidi ricevuti contro il botulismo, infezione anaerobica. Questi farmaci vengono rilasciati in forma purificata; vengono liberati dalle sostanze di zavorra e adsorbiti su ossido di alluminio idrato. Le anatossine causano la produzione di antitossine, che neutralizzano le esotossine, ma non hanno un effetto dannoso sui patogeni.
I tossoidi usati come vaccini inducono una specifica risposta immunitaria.
Immunoglobuline e sieri per il trattamento e la prevenzione delle malattie infettive
Le IMMUNOGLOBULINE (lat. immunis free, free from any + globulus ball) sono proteine sieriche e secretorie umane o animali che hanno attività anticorpale e sono coinvolte nel meccanismo di protezione contro i patogeni delle malattie infettive.
Esistono 5 classi di immunoglobuline: IgG, IgA, IgM, IgD e IgE. Normalmente, le IgG sono presenti nel siero umano ad una concentrazione di ca. 1, 2 g per 100 ml, costituisce il 70-80% di tutte le immunoglobuline e contiene la maggior parte degli anticorpi contro un numero di virus e batteri, nonché antitossine. L'IgA si trova nel siero del sangue e nei segreti (colostro, saliva, ecc.) Sotto forma di polimeri (immunoglobulina "secretoria" - slgA). Nelle IgM sono stati rilevati anticorpi contro le endotossine (lipopolisaccaridi) di batteri gram-negativi e virus. IgD e IgE sono presenti nel siero del sangue in basse concentrazioni. Nelle IgE, anticorpi del tipo di reagine coinvolte reazioni allergiche. In un certo numero di malattie, il contenuto di I. nel siero del sangue può deviare dal livello normale, che ha valore diagnostico.
Preparazioni di immunoglobuline. Nelle preparazioni di immunoglobuline, il componente principale è l'IgG. Sono in corso lavori per creare una preparazione di gamma globulina arricchita con IgM e IgA.
Per la prevenzione del morbillo, Epatite virale Oltre ad altre infezioni, così come per il trattamento dell'ipogammaglobulinemia e dell'agammaglobulinemia, viene utilizzato il farmaco "Immunoglobulina umana normale" (il nome obsoleto "Gamma globulina per la prevenzione del morbillo"), che è una soluzione al 10% del purificato frazione gamma globulinica del siero del sangue (donatore, placenta o aborto). La solita dose profilattica del farmaco è di 1,5-3 ml, viene somministrata solo per via intramuscolare. Per scopi terapeutici, una preparazione appositamente fabbricata "Immunoglobulina umana normale per somministrazione endovenosa", che viene somministrato in grandi dosi (25-50 ml).
I. specifici, contenenti anticorpi contro alcuni agenti infettivi o le loro tossine, sono ottenuti dal plasma o dal siero sanguigno di donatori immunizzati con gli antigeni appropriati. Questi farmaci includono anti-tetano, anti-stafilococco, anti-influenza, anti-encefalite, anti-pertosse e altre immunoglobuline.
Per la prevenzione malattia emolitica i neonati, causati dall'incompatibilità Rh del sangue della madre e del padre, usano l'immunoglobulina anti-Rhesus. L'immunoglobulina anti-Rhesus è ottenuta da siero umano con un alto contenuto di anticorpi contro l'antigene Rh. Questo farmaco viene somministrato durante le prime 48-72 ore dopo il parto alle donne nullipare Rh-negative che hanno partorito un bambino Rh-positivo. L'immunoglobulina anti-Rhesus lega l'antigene Rh del feto, che penetra nel sangue della madre, eliminandolo. la possibilità di malattia emolitica in una nuova gravidanza.
SIERO IMMUNITARIO (lat. immunis free, risparmiato) - prodotti sanguigni di una persona o di animali contenenti anticorpi; sono usati per diagnosticare, trattare e prevenire varie malattie.
Ricezione e. basato sulla proprietà degli antigeni di provocare la formazione di anticorpi nel corpo. I sieri immuni ricevono dagli animali immunizzati e la gente, e anche dalle persone che hanno trasferito inf. una malattia, in sangue a-rykh contiene gli anticorpi corrispondenti (i sieri di convalescenti). I sieri possono contenere i cosiddetti. anticorpi normali, ad esempio alloanticorpi o isoanticorpi, formati nel corpo senza connessione con l'immunizzazione artificiale. Come risultato di immunizzazione ripetuta ricevono E. pagine, contenenti anticorpi in alta concentrazione, - sieri iperimmuni.
Distinguere tra sieri diagnostici e terapeutici e profilattici. Diagnostica e. si rivolga in vario immunol, reazioni per istituire un'occhiata, subspecie o un serotype (serovar) dell'agente causativo inf. malattie, determinazione di vari antigeni in materiali biologici. A seconda della natura reazioni immunologiche distinguere tra agglutinante, precipitante, fluorescente, emolitico, marcato con nuclidi radioattivi, enzimi e altri sieri diagnostici. In un cuneo, la pratica largamente applica sieri diagnostici per definizione di gruppo di sangue, effettuando la tipizzazione di tessuto, a trapianti allogenici e trasfusioni di sangue, per caratterizzare lo stato immunologico dell'organismo (definizione di classi di immunoglobuline, ecc.).
I sieri di trattamento e profilassi includono sieri antitossici, antibatterici, antivirali e immunoglobuline. I sieri antitossici sono ottenuti da animali iperimmunizzati (solitamente cavalli) mediante somministrazione parenterale di dosi crescenti di tossoidi (vedi Antitossine), meno spesso da donatori immunizzati con tossoide. I sieri antitossici sono utilizzati per il trattamento e la prevenzione delle infezioni tossinemiche, che si basano sull'azione delle esotossine batteriche (agenti causali di tetano, botulismo, difterite, cancrena gassosa, infezioni da stafilococco) sul corpo. Anche i sieri contenenti anticorpi contro i veleni di serpenti, ragni e veleni di origine vegetale sono antitossici. Gli anticorpi sierici antitossici neutralizzano l'azione delle tossine corrispondenti.
I sieri antibatterici sono ottenuti dal sangue di cavalli o buoi iperimmunizzati con i batteri uccisi appropriati oi loro antigeni. Questi sieri non sono stati ampiamente utilizzati a causa della disponibilità di altri agenti antimicrobici più efficaci.
I sieri antivirali sono ottenuti dal sangue di animali immunizzati con ceppi virali vaccinali o virus corrispondenti. Questi sieri vengono purificati mediante precipitazione alcolica a bassa temperatura per ottenere preparazioni di immunoglobuline o gammaglobuline (immunoglobuline eterogenee). Questi includono la gamma globulina contro encefalite da zecche, gamma globulina antirabbica, ecc.
Le immunoglobuline derivate dal sangue umano (immunoglobuline omologhe), ad eccezione delle normali immunoglobuline umane, sono prese di mira. Il vantaggio delle immunoglobuline omologhe rispetto a quelle eterogenee è la debole reattogenicità e la circolazione più lunga degli anticorpi nel corpo (per 30-40 giorni). Valore più alto in un cuneo, la pratica ha immunoglobuline con l'attività anticomplementare più ridotta, to-rye, a differenza delle preparazioni immunoglobuliniche convenzionali destinate a iniezione intramuscolare utilizzato per la somministrazione endovenosa.
Tra le immunoglobuline ad azione diretta, viene isolata l'immunoglobulina anti-Rhesus, che viene utilizzata per l'immunoprofilassi della malattia emolitica dei neonati. Viene somministrato a donne nullipare Rh-negative in periodo postpartum o dopo un aborto.
MALATTIA DA SIERO - malattia allergica sviluppandosi in risposta alla somministrazione parenterale di siero di sangue o dei suoi preparati. Il decorso della malattia dipende dalla qualità, dalla quantità, dal metodo di somministrazione del siero e dalla reattività dell'organismo. La malattia si basa sul danno ai vasi sanguigni e ai tessuti da parte degli immunocomplessi formatisi nel corpo in risposta all'introduzione di una proteina estranea. Gli immunocomplessi sono costituiti da antigene (proteina estranea), anticorpi e complemento (vedi Allergia).
Periodo di incubazione con la somministrazione iniziale di siero va da 2 a 12 (solitamente 7-12) giorni, con somministrazioni ripetute si riduce a 1-3 giorni. La malattia inizia in modo acuto: la temperatura corporea diminuisce e poi aumenta, dolore e gonfiore compaiono nel sito di iniezione del siero; regionale, e anche altri lif. i nodi aumentano di dimensione. Uno dei sintomi principali è un'eruzione cutanea. Più spesso è polimorfa, orticaria o eritematosa, riccia, a volte crostacea o scarlatta, accompagnata da prurito lancinante. Il viso del paziente è pallido e gonfio. Possibile gonfiore pericoloso, ma che passa rapidamente della laringe. A volte il dolore si sviluppa nelle articolazioni delle estremità, si nota il loro gonfiore. Si possono osservare bronchite, broncospasmo e persino enfisema polmonare acuto. La pressione sanguigna diminuisce, il polso accelera, a volte rallenta. Possibile danno miocardico, neurite, radicolite, debolezza muscolare. Nei casi più gravi, i reni sono colpiti (compaiono edema, oliguria, meno spesso albuminuria).
Un esame del sangue nel periodo prodromico rivela una leggera leucocitosi, successivamente - leucocitopenia, linfocitosi, eosinofilia, trombocitopenia. La VES inizialmente diminuisce, poi aumenta. L'ipoglicemia, la diminuzione della coagulazione del sangue sono determinate. La malattia da siero può essere limitata solo a manifestazioni locali (edema, iperemia, prurito, necrosi cutanea nel sito di iniezione del siero sanguigno). Le ricadute sono possibili a causa del ripetuto accumulo di anticorpi specifici che interagiscono con il siero del sangue iniettato che rimane nel sangue. In tali casi, la malattia può durare diverse settimane o mesi. Con la somministrazione ripetuta di siero, può svilupparsi shock anafilattico. Cuneo. quadro e trattamento dello shock anafilattico - vedi Anafilassi.
Il trattamento viene eseguito da un medico. Nelle forme lievi, può essere limitato alla somministrazione orale. antistaminici E applicazione locale mezzi volti a ridurre il prurito (bagni caldi, sfregamento con mentolo e alcool salicilico). Nei casi più gravi sono indicate iniezioni di antistaminici (suprastin, difenidramina, ecc.) E glucocorticoidi. Askorutin, gluconato di calcio sono prescritti, secondo le indicazioni: diuretici, broncodilatatori, ecc.
Prevenzione: rilevamento ipersensibilità paziente al siero. A tale scopo, 0,02 ml di siero diluito con soluzione isotonica di cloruro di sodio (1: 100) vengono iniettati per via intradermica sulla superficie interna dell'avambraccio. Il test è considerato positivo se, dopo 20 minuti, compaiono edema e iperemia nel sito di iniezione. 1-3 cm o più. In questi casi, se non ci sono indicazioni vitali, è meglio non iniettare il siero. L'introduzione di una dose terapeutica di siero viene effettuata in modo frazionato secondo il metodo di Bezredka: prima vengono iniettati 0,1 ml per via sottocutanea, dopo 20 minuti - altri 0,2 ml e dopo un'ora - per via intramuscolare il resto della dose.
Anatossine- preparati immunobiologici, ottenuti a seguito di un'appropriata lavorazione di esotossine batteriche; utilizzato per sviluppare l'immunità attiva nei vaccinati. La possibilità di utilizzare i tossoidi per prevenire l'insorgenza di morbilità è dovuta al fatto che la patogenesi di molte malattie (tetano, difterite, botulismo, cancrena gassosa, ecc.) Si basa sull'impatto sull'organismo di specifici prodotti tossici (esotossine) secreto dagli agenti causali di queste malattie.
Esotossine, insieme alla capacità di causare in vivo processi patologici avere antigenicità, cioè la capacità, se introdotta nel corpo a piccole dosi, di provocare la formazione di anticorpi specifici - antitossine in esso contenute. Dopo aver aggiunto una piccola quantità di formalina alle esotossine e averle conservate per diversi giorni a 37-40°C, perdono completamente la loro tossicità, conservando le loro proprietà antigeniche.
Le anatossine sono una delle più efficaci e farmaci sicuri utilizzato ai fini dell'immunizzazione attiva delle persone. Tali tossoidi vengono preparati come preparati purificati e concentrati adsorbiti su un gel di idrossido di alluminio. L'adsorbimento di toxoidi su vari adsorbenti minerali provoca un forte aumento dell'efficacia della vaccinazione. Ciò è dovuto al fatto che nel sito di somministrazione del farmaco adsorbito si crea un deposito di antigene e il suo assorbimento rallenta.
Con un'assunzione frazionata di antigene dal sito di iniezione, viene fornito l'effetto della somma dell'irritazione antigenica, il grado della risposta immunitaria aumenta notevolmente. Inoltre, l'agente di deposizione provoca una reazione infiammatoria nel sito di iniezione, che, da un lato, impedisce l'assorbimento dell'antigene e ne potenzia l'effetto di deposizione e, dall'altro, funge da stimolante non specifico che migliora reazioni plasmacitiche nei tessuti linfatici del corpo che sono coinvolti nell'immunogenesi. I preparati adsorbiti vengono agitati prima dell'uso per garantire una distribuzione uniforme del principio attivo, che si trova nel sedimento insieme all'adsorbente, in tutto il loro volume. In pratica, i tossoidi difterici, tetanici e botulinici sono i più utilizzati.
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Nota
Le informazioni su questo sito sono fornite a scopo di riferimento e didattico e non devono essere utilizzate come guida al trattamento. In ogni caso, è necessario consultare un medico.
Anatossine - si tratta di preparati immunobiologici ottenuti a seguito di un'adeguata elaborazione di esotossine batteriche e utilizzati per sviluppare l'immunità attiva nei vaccinati.
La possibilità di utilizzare i toxoidi per la prevenzione è dovuta al fatto che la patogenesi di molte malattie (tetano, difterite, botulismo, cancrena gassosa) si basa sull'impatto sul corpo di specifici prodotti tossici secreti dagli agenti causali di queste malattie - esotossine .
Insieme alla capacità di causare processi patologici in un organismo vivente, le esotossine hanno una proprietà molto importante: l'antigenicità, ad es.
Anatossine
la capacità, se introdotta nel corpo a piccole dosi, di provocare la formazione di anticorpi specifici - antitossine. Dopo l'aggiunta di piccole quantità di formalina e la conservazione per alcuni giorni ad una temperatura di 37-40°C, le esotossine perdono completamente la loro tossicità, pur mantenendo le loro proprietà antigeniche. I preparati così ottenuti dalle tossine furono chiamati anatossine da Ramon. I toxoidi sono uno dei farmaci più efficaci e sicuri utilizzati ai fini dell'immunizzazione attiva delle persone.
I tossoidi destinati all'immunizzazione umana sono preparati sotto forma di preparazioni purificate e concentrate adsorbite su un gel di idrossido di alluminio. L'adsorbimento di toxoidi su vari adsorbenti minerali (compreso l'idrossido di alluminio) provoca un forte aumento dell'efficacia della vaccinazione. Ciò è dovuto alla creazione di un deposito di antigene nel sito di iniezione del farmaco adsorbito, nonché al suo lento assorbimento: l'assunzione frazionata di antigene dal sito di iniezione fornisce l'effetto di sommatoria dell'irritazione antigenica, aumenta notevolmente la risposta immunologica. Inoltre, la sostanza depositante provoca una reazione infiammatoria nel sito di iniezione. Da un lato impedisce l'assorbimento dell'antigene e potenzia l'effetto di deposizione dell'antigene e, dall'altro, essendo uno stimolante non specifico, potenzia le reazioni plasmacitiche nei tessuti linfatici del corpo coinvolti nell'immunogenesi.
I preparati adsorbiti devono essere agitati prima dell'uso per garantire una distribuzione uniforme del principio attivo su tutto il volume, che si trova nel sedimento insieme all'adsorbente prima dell'agitazione. In pratica, i tossoidi difterici, tetanici e botulinici più utilizzati.
Data aggiunta: 2015-02-06 | Visualizzazioni: 697 | Violazione del copyright
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Anatossine. Ricevuta. Applicazione. Vantaggi
I toxoidi sono utilizzati per la prevenzione specifica delle malattie infettive, i cui agenti patogeni producono esotossina. L'anatossina è un'esotossina, priva di proprietà tossiche, ma che conserva proprietà antigeniche. Il metodo per ottenere il tossoide fu proposto nel 1923 dallo scienziato francese Ramon. A differenza dei vaccini, che, se usati negli esseri umani, formano immunità antimicrobica, con l'introduzione dei toxoidi, si forma l'immunità antitossica, poiché inducono la sintesi di anticorpi antitossici - antitossine.
Attualmente utilizzati: difterite, tetano, botulino, tossoidi stafilococcici, tossoide colerogeno. Sono ottenuti mediante coltivazione profonda in fermentatori di agenti patogeni di tetano, difterite, botulismo e altri microrganismi, a seguito dei quali le tossine si accumulano nel fluido di coltura. Dopo la separazione delle cellule microbiche mediante separazione, il liquido di coltura (tossina) viene neutralizzato con formalina a una concentrazione di 0,3=0,4% a 37˚C per 3-4 settimane. Tossina neutralizzata - l'anatossina che ha perso tossicità, ma ha mantenuto l'antigenicità, è sottoposta a purificazione e concentrazione, standardizzazione e confezionamento. Ai tossoidi purificati vengono aggiunti un conservante e un coadiuvante. Tali tossine sono chiamate adsorbite purificate. Il tossoide viene dosato in unità antigeniche (EC - unità di legame, LF - unità di flocculazione).
La titolazione dei tossoidi nella reazione di flocculazione (secondo il metodo Ramon) viene effettuata utilizzando siero antitossico flocculante standard, in cui è noto il numero di Unità antitossiche internazionali (UI) in 1 ml.
I toxoidi sono disponibili come preparati singoli e come parte di vaccini associati destinati all'immunizzazione contro diverse malattie.
I preparati destinati all'immunizzazione contro un'infezione sono chiamati monovaccini, contro due malattie infettive - divaccini, contro tre - trivaccini, contro diverse infezioni - polivaccini.
I vantaggi dei toxoidi sono che, in linea di principio, non possono causare una malattia infettiva e possono essere utilizzati per vaccinare bambini indeboliti, bambini con malattie croniche e bambini con immunodeficienze.
Sieri immuni. Classificazione. Ricezione, pulizia, applicazione. Sieri antitossici.
Anatossine. Ottenere e utilizzare
Ottenimento, purificazione, titolazione, applicazione, complicazioni durante l'uso e loro prevenzione
I preparati immunitari sierici includono sieri immuni e immunoglobuline.
Questi farmaci forniscono l'immunità passiva ai patogeni delle malattie infettive. I sieri immuni sono ottenuti dal sangue di animali iperimmunizzati (intensamente immunizzati) (cavalli, asini, conigli) con il vaccino appropriato o dal sangue di persone immunizzate (viene utilizzato sangue di donatore, placentare, abortivo). Per rimuovere le proteine \u200b\u200bdella zavorra da esse e aumentare la concentrazione di anticorpi, vengono sottoposti i sieri immuni nativi pulizia utilizzando vari metodi fisici e chimici (alcool, enzimatico, cromatografia di affinità, ultrafiltrazione).
Vengono chiamate preparazioni di siero immunitario derivate dal sangue degli animali eterologo, e dal sangue delle persone - omologo. L'attività delle preparazioni sieriche è espressa in titoli anticorpali: antitossine, emoagglutinine, leganti del complemento, neutralizzanti del virus, ecc.
I preparati immunitari sierici sono utilizzati per il trattamento specifico e la profilassi di emergenza. Il principale meccanismo di azione terapeutica e profilattica è ridotto al legame e alla neutralizzazione di batteri, virus e loro antigeni, comprese le tossine nel corpo, da parte degli anticorpi. A questo proposito si distinguono i preparati di siero immunitario antivirali, antibatterici e antitossici.
I preparati sierici vengono somministrati per via intramuscolare, sottocutanea, a volte per via endovenosa. L'effetto della somministrazione del farmaco si verifica immediatamente dopo la somministrazione e dura 2-3 settimane. (anticorpi eterologhi) fino a 4-5 settimane. (anticorpi omologhi). Per escludere il verificarsi di una reazione anafilattica e malattia da siero, i farmaci vengono somministrati secondo il metodo Bezredka.
Le preparazioni sieriche omologhe sono ampiamente utilizzate per la prevenzione e il trattamento dell'epatite virale, del morbillo, per il trattamento del botulismo, del tetano, dello stafilococco e di altre infezioni. Le preparazioni sieriche eterologhe hanno rigorosamente uso limitato a causa del rischio di complicanze allergiche durante la somministrazione.
Recentemente sono state ottenute preparazioni immunitarie basate su anticorpi monoclonali. Tuttavia, non hanno ancora trovato ampio uso terapeutico e profilattico, ma sono ancora utilizzati per scopi diagnostici.
Sieri antitossici contengono anticorpi contro le esotossine. Sono ottenuti mediante iperimmunizzazione di animali (cavalli) con tossoide. L'attività di tali sieri è misurata in AU (unità antitossiche) o IU (unità internazionali) - questa è la quantità minima di siero che può neutralizzare una certa quantità (di solito 100 DLM) di una tossina per animali di un certo tipo e un certo peso.
Attualmente, i seguenti sieri antitossici sono ampiamente utilizzati in Russia: antidifterico, antitetanico, anticancrenoso, antibotulinico e l'uso di sieri antitossici nel trattamento di infezioni rilevanti è obbligatorio.
La titolazione dei sieri antitossici può essere effettuata con tre metodi: Erlich, Roemer, Ramon. Metodo di Ehrlich: prima della titolazione dei sieri, viene determinata una dose letale condizionale (sperimentale) della tossina. Si considera dose sperimentale di tossina (Lt) quella quantità che, miscelata con 1 UI di siero standard, provoca la morte del 50% degli animali prelevati nell'esperimento. Nella seconda fase della titolazione, una dose sperimentale di tossina viene aggiunta a varie diluizioni del siero in esame, la miscela viene conservata per 45 minuti e somministrata agli animali. Sulla base dei risultati ottenuti, viene calcolato il titolo del siero antitossico testato.
Secondo il metodo Roemer, il siero antidifterico è titolato.
Assicurati di testare la sensibilità a una proteina estranea, poiché il siero antitossico è eterogeneo. Se il test è positivo, viene eseguita una desensibilizzazione preliminare (in presenza di un medico), quindi viene somministrata la dose richiesta di siero sotto la copertura di corticosteroidi. Il siero può causare varie complicazioni, la più pericolosa delle quali è lo shock anafilattico. La malattia da siero può svilupparsi nella seconda settimana di malattia. Esiste un'alternativa al siero antitossico - plasma omologo nativo (iniettato 250 ml 1-2 volte al giorno).
Sieri antitossici: antidifterici, antitetanici. I seguenti sono ampiamente utilizzati: anti-cancrenoso, anti-botulinico. L'uso di sieri antitossici nel trattamento di infezioni rilevanti è obbligatorio.
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ANATOSSINE (anatoxina; Greco ana- - contro + tossine) - tossine batteriche che hanno perso le loro proprietà tossiche a seguito di un trattamento speciale, ma hanno mantenuto le loro proprietà antigeniche e immunogeniche. Solitamente le tossine vengono neutralizzate dall'esposizione alla formalina e al calore (35-38°). Gli agenti causali delle infezioni tossinemiche - difterite, tetano, cancrena gassosa, botulismo e altri - producono esotossine molto forti con proprietà antigeniche.
Nel 1909, E. Löwenstein scoprì accidentalmente un rapido calo della tossicità della tossina del tetano sotto l'influenza di raggi ultravioletti e formalina. Successivamente, Eisler (M. Eisler, 1912) e Levenshtein scoprirono che dopo aver aggiunto lo 0,1-0,3% di formalina alla tossina del tetano e aver mantenuto temperatura elevata la tossina è disintossicata. L'introduzione di una tale tossina induce l'immunità negli animali.
Dieci anni dopo, G. Ramon sviluppò un metodo per preparare toxoidi adatti all'immunizzazione umana, che riferì il 10 dicembre 1923 all'Accademia delle scienze francese. Ramon ha scoperto che quando la formalina e il calore vengono applicati alla tossina difterica, si forma un composto neutralizzato che ha proprietà antigeniche e immunogeniche. Mentre studiava la reazione di flocculazione della tossina difterica con l'antitossina, usò la formalina come antisettico per preservare la tossina. L'aggiunta di formalina alla tossina non ha impedito il fenomeno della flocculazione (vedi), anche se questa tossina è stata esposta a calore moderato in un termostato. Senza influire sulla capacità della tossina di floccularsi, la formalina ha ridotto drasticamente le sue proprietà tossiche, come una serie di altri prodotti chimici e Proprietà fisiche. La reazione di flocculazione delle tossine con antitossine ha giocato grande ruolo nello sviluppo di un metodo per la preparazione di tossoidi. Con l'aiuto di questa reazione è stato facile controllare il cambiamento delle proprietà antigeniche dei toxoidi durante la neutralizzazione delle tossine con la formalina. Prima dell'applicazione di questa reazione, non era possibile stabilire se la tossina conserva proprietà antigeniche quando le proprietà tossigeniche vengono perse.
Alcuni toxoidi possono essere allergeni e causare problemi generali e reazioni locali, non correlato a tossicità specifica. Le anatossine sono caratterizzate da stabilità e irreversibilità: durante la conservazione a lungo termine a diverse temperature, mantengono la loro innocuità e proprietà antigeniche. Le proprietà antigeniche dei tossoidi sono determinate dalla reazione di legame delle antitossine (vedi), espressa in unità di legame (EU), o dalla reazione di flocculazione con le antitossine. Le proprietà immunogeniche dei tossoidi sono determinate dall'immunizzazione degli animali ( porcellini d'India, topi) ed espressa in unità immunizzanti (UI), cioè nella capacità di una certa quantità di tossoidi di proteggere gli animali dall'introduzione delle corrispondenti tossine.
I principi per la produzione di tossoidi sviluppati dall'Area hanno costituito la base per la produzione di tossoidi in molte parti del mondo. Ciò ha permesso l'avvio dell'immunizzazione di massa contro la difterite e il tetano, che ha portato a una forte diminuzione dell'incidenza di queste infezioni.
Il processo di disintossicazione da formalina è considerato come un danno irreversibile alla struttura del centro attivo della tossina dovuto alla reazione con la formalina dei gruppi funzionali che compongono la tossina. Nelle prime fasi, la disintossicazione procede molto rapidamente (di norma, nel 1-4 ° giorno di incubazione con formalina, si osserva una diminuzione della tossicità dell'80-90%) e la completa innocuità si ottiene solo dopo 2-4 settimane o Di più. Per ottenere tossoidi innocui e stabili dopo la neutralizzazione, deve trascorrere del tempo per la "maturazione" dei tossoidi. La neutralizzazione delle tossine batteriche senza violare le loro proprietà antigeniche avviene in un ambiente neutro. Un ambiente acido impedisce l'interazione della formalina con i gruppi amminici della tossina, rallenta o interrompe completamente il processo di neutralizzazione. Se la formalizzazione delle tossine avviene in ambiente alcalino, allora la tossina viene resa innocua rapidamente, ma con una significativa perdita delle sue proprietà antigeniche. La quantità ottimale di formalina per la disintossicazione di tutte le tossine è consigliata dallo 0,3 allo 0,8%; all'interno di questa quantità, la formalina dovrebbe essere aggiunta ad alcune tossine con un metodo frazionato, questo contribuisce a una più rapida neutralizzazione della tossina senza una FORTE perdita delle proprietà antigeniche. Per neutralizzare la tossina Grande importanza la temperatura alla quale è contenuta la tossina. Un aumento della temperatura porta ad una più rapida disintossicazione di tutte le tossine con una significativa perdita di proprietà antigeniche. I tentativi di sviluppare un metodo accelerato per la neutralizzazione delle tossine batteriche aggiungendo l'1% o più di formalina a t ° 36-40 ° hanno portato a una perdita di tossicità dopo 6-8 giorni di incubazione con una forte diminuzione delle proprietà antigeniche. Un aumento della quantità di formalina durante la disintossicazione non è giustificato anche perché, indipendentemente dalla quantità di formalina assunta, solo certa parte interagisce con la tossina. La quantità di formalina legata dipende dalla composizione del terreno su cui viene preparata la tossina, dal contenuto di azoto amminico, da Composizione chimica tossina.
La precipitazione frazionata con varie concentrazioni di solfato di ammonio è stata utilizzata per purificare i tossoidi dalle proteine di zavorra. Attualmente, questo metodo viene utilizzato solo in determinate fasi di purificazione e concentrazione di piccoli volumi di toxoidi.
All'estero, per la depurazione e la concentrazione del tossoide difterico e tetanico, si utilizza il metodo dell'ultrafiltrazione attraverso filtri reniformi rivestiti con membrana di parlodina all'8%. Il precipitato dopo dissoluzione in acqua viene frazionato con solfato ammonico a varie percentuali di saturazione. Il tossoide difterico purificato contiene 1800-2500 Lf per 1 mg di azoto totale (Lf - abbr. Inglese, limite di flocculazione - soglia di flocculazione).
In URSS, la precipitazione acida viene utilizzata per purificare e concentrare tossoidi botulinici, agenti patogeni della cancrena gassosa e tossoidi difterici e tetanici. Prima dell'acidificazione, per aumentare la forza ionica della soluzione, il 10-30% di cloruro di sodio viene sciolto in toxoidi. Quindi abbassare il pH dei tossoidi a 3,5 aggiungendo HCl; il precipitato viene separato dal liquido e sciolto in 1/20 della soluzione isotonica di cloruro di sodio dal volume del tossoide originale. Il risultante concentrato di tossoidi viene sottoposto ad ulteriore purificazione mediante riprecipitazione con acetone. Nella precipitazione acida del tetano e di altri tossoidi, alcuni laboratori utilizzano l'esametofosfato per migliorare la forza ionica della soluzione del tossoide. Le tossine batteriche e le anatossine possono essere eliminate mediante assorbimento da parte di fosfato di alluminio, ossido di alluminio idrato, fosfato di calcio e altri assorbenti inorganici con la successiva eluizione (vedi); inoltre, sono sempre più utilizzati metodi di cromatografia a scambio ionico e gel filtrazione attraverso sephadex di varie marche (vedi Gel filtrazione, Cromatografia).
Per l'immunizzazione contro le infezioni tossinemiche si utilizzano tossoidi depositati su ossido di alluminio idrato e fosfato di alluminio; l'allume di alluminio-potassio per la deposizione viene utilizzato solo in pratica veterinaria. L'elevata immunogenicità dei tossoidi depositati è spiegata dall'azione adiuvante del sorbente e dal riassorbimento ritardato dal deposito dell'antigene. Di conseguenza, si verifica un'assunzione a lungo termine di piccole quantità di toxoidi nel corpo, che porta allo sviluppo di un'immunità tesa. L'uso di tossoidi difterici e tetanici assorbiti su idrossido di alluminio per l'immunizzazione di massa delle persone in URSS ha dato un forte calo incidenza di difterite e tetano.
L'immunizzazione dei bambini contro la difterite, il tetano e la pertosse viene effettuata con un vaccino associato, tra cui la difterite assorbita, il tossoide tetanico e il vaccino contro la pertosse corpuscolare.
Nel 1959 fu proposta una polianatossina anaerobica concentrata adsorbita, comprendente il tossoide del tetano, diversi tipi di tossoidi cancrenosi e botulinici (7 antigeni in totale), con buone proprietà immunogeniche. Vedi anche Immunizzazione, Tossine.
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Tossoide AC
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KI MATVEEV
Anatossine (da an - negazione, toxo - veleno) - preparazioni ottenute da esotossine batteriche, completamente prive di proprietà tossiche, ma che conservano proprietà antigeniche e immunogeniche. Il metodo per ottenere il tossoide fu proposto nel 1923 dallo scienziato francese Ramon.
Per la preparazione di tossoidi le colture di batteri che producono esotossine vengono coltivate in terreni nutritivi liquidi per accumulare veleno e quindi filtrate attraverso filtri batterici per rimuovere i corpi microbici. La soluzione di formalina allo 0,3-0,4% viene aggiunta al filtrato e posta in un termostato a una temperatura di 37-40 ° C per 3-4 settimane fino alla completa scomparsa delle proprietà tossiche. Il tossoide risultante viene testato per la sterilità, l'innocuità e l'immunogenicità.
Tali farmaci sono chiamati tossoidi nativi, poiché contengono una grande quantità di sostanze del mezzo nutritivo, che sono zavorra e possono contribuire allo sviluppo di reazioni indesiderate del corpo quando viene somministrato il farmaco. Pertanto, attualmente vengono utilizzati principalmente tossoidi purificati, per i quali i tossoidi nativi vengono elaborati con vari metodi fisici e chimici (cromatografia a scambio ionico, precipitazione acida, ecc.) Al fine di liberarli da tutte le sostanze di zavorra e concentrare il farmaco in un volume minore . Tuttavia, la diminuzione della dimensione delle particelle del tossoide ha reso necessario adsorbire il farmaco sugli adiuvanti. Pertanto, i toxoidi applicati vengono adsorbiti preparati concentrati altamente purificati. L'attività specifica del tossoide è determinata nella reazione di flocculazione, nelle cosiddette unità di flocculazione, o nella reazione di legame del tossoide, espressa in unità di legame (EC).
Titolazione dei tossoidi nella reazione di flocculazione (secondo il metodo Ramon) sono prodotti secondo il siero antitossico flocculante standard, in cui è noto il numero di Unità Antitossiche Internazionali (UI) in 1 ml. Un'unità antigenica di tossoide è designata Limes flocculationis (Lf - soglia di flocculazione); questa è la quantità di tossoide che è completamente legata a un'unità antitossica dell'antitossina.
Le proprietà antigeniche dei tossoidi sono anche indicate in unità di legame. Per determinare la CE, sono necessari il preparato di tossoide di prova, siero antitossico standard (con un contenuto di 0,1 UI in 1 ml), una dose sperimentale di tossina (titolata a 0,1 UI di siero standard) e topi bianchi.
La reazione di legame viene effettuata come segue: in una serie di provette con lo stesso volume di siero antitossico standard, vengono aggiunte varie diluizioni del tossoide in esame. La miscela legante viene mantenuta in un termostato per 45 minuti, quindi viene aggiunta una dose sperimentale di tossina a ciascuna provetta e nuovamente lasciata in un termostato per 45 minuti. Successivamente, la miscela (siero + anatossina + tossina) di ciascuna provetta viene iniettata in 2-4 topi e la loro condizione viene monitorata per 4 giorni. Se tutto il tossoide aggiunto al siero è legato da esso, allora l'aggiunta della tossina e la successiva somministrazione della miscela ai topi ne portano alla morte. Se non c'è abbastanza tossoide per legare tutto il siero, la tossina aggiunta viene neutralizzata dal siero e i topi non muoiono.
I tossoidi sono usati per prevenire e, meno comunemente, curare le infezioni da tossine (difterite, cancrena gassosa, botulismo, tetano e alcune malattie causate da stafilococchi). I toxoidi sono disponibili come preparati singoli e come parte di vaccini associati destinati all'immunizzazione contro diverse malattie.
Vengono chiamati i preparati destinati all'immunizzazione contro qualsiasi infezione singoli vaccini, contro due malattie infettive - divaccini, contro tre - trivaccini, contro diverse infezioni - polivaccini. I vaccini associati sono preparati contenenti una miscela di antigeni di vari batteri e toxoidi. L'uso di vaccini associati, come DTP o TABte, consente di creare immunità contro diverse infezioni e ridurre il numero di vaccinazioni.
I vaccini polivalenti sono generalmente chiamati farmaci che includono diverse varietà o tipi sierologici di agenti patogeni di un'infezione (ad esempio antinfluenzale, leptospirosi, ecc.).
Anatossine Anatossine
(toxoidi) - immunopreparazioni utilizzate per l'immunoprofilassi attiva delle infezioni tossinemiche. L'immunità indotta da A. neutralizza le esotossine, ma non influenza i batteri che producono questa tossina e le loro endotossine. A. è costituito da esotossine: l'esotossina viene trattata con formalina (0,3 - 0,8% della concentrazione finale) in mezzo neutro a 35 -40 °C per 3 - 4 settimane. Come risultato di tale trattamento, le tossine perdono completamente e irreversibilmente le loro proprietà tossiche, ma conservano le loro proprietà antigeniche e immunogeniche. Successivamente, l'alluminio viene purificato dalle sostanze di zavorra, concentrato e adsorbito su idrossido di alluminio o altri assorbenti. Dopo aver verificato la sterilità, l'innocuità e l'attività del farmaco risultante, A. viene utilizzato per l'immunizzazione. L'attività di A. è determinata in flocculazione(vedi) reazioni, che si esprimono in ME, o nella reazione di legame (neutralizzazione) dell'antitossina. Per stabilire il pH, lo stesso volume di A. viene miscelato con diverse dosi di s-ki antitossico standard con una quantità nota con precisione di EC (unità di legame) e incubato in un termostato. Dopo l'incubazione, a ciascuna miscela viene aggiunta una dose titolata di tossina (che provoca la morte dei topi), viene nuovamente incubata e le miscele vengono somministrate ai topi. Se A. ha completamente legato l'antitossina, la tossina non viene neutralizzata dall'antitossina e provoca la morte degli animali. Ora vengono sviluppati i metodi basati sul confronto della forza A. con gli standard di immunogenicità. In pratica adsorbito purificato tossoide difterico(AD), adsorbito purificato tossoide tetanico(AS), adsorbito purificato tossoide stafilococcico, adsorbito tossoide difterico-tetanico(ADS e ADS-M). Il tetano e la difterite A. fanno parte del DTP associato, il tossoide colerogeno fa parte del vaccino contro il colera.
(Fonte: Glossario dei termini di microbiologia)
Guarda cosa sono le "Anatossine" in altri dizionari:
Anatossine- sono esotossine batteriche neutralizzate dall'esposizione prolungata alla formalina a temperature elevate. I tossoidi hanno una reattogenicità relativamente bassa ... Fonte: ORDINE DI DISTRUZIONE DI VACCINI NON IDONEI ... ... Terminologia ufficiale
toxoidi- Esotossine batteriche esotossine, inattivate con formalina (soluzione 0,3-0,5%) o calore (38-40 °C), ma conservano proprietà antigeniche. [Arefiev VA, Lisovenko LA inglese russo Dizionario termini genetici 1995 407s.] ... Manuale del traduttore tecnico
Le anatossine sono tossoidi. Esotossine batteriche
ANATOSSINE- (Anatoxinum, dal greco Ana back e toxikón poison), innocui derivati di tossine che ne hanno conservato le proprietà antigeniche e immunogeniche. A. si ottiene neutralizzando la tossina con una soluzione di formaldeide a t 3740 ° C in neutro o ... ... Veterinario Dizionario enciclopedico
- (lat. vaccinum cow, da vacca cow) un farmaco ottenuto da microrganismi (batteri, rickettsie, virus) o dai loro prodotti metabolici e utilizzato per l'immunizzazione attiva (Vedi Immunizzazione) di persone e animali con ... ...
- (lat. vaccinus bovine) preparazioni ottenute da microrganismi o loro prodotti metabolici; sono utilizzati per l'immunizzazione attiva di persone e animali con profilassi e scopi terapeutici. I vaccini consistono in un principio attivo di uno specifico ... Enciclopedia medica
- (dal greco toxikon veleno) sostanze di origine batterica, vegetale o animale, capaci di inibire le funzioni fisiologiche, che portano alla malattia o alla morte degli animali e dell'uomo. Per natura chimica, tutte le proteine T. o ... ... Grande enciclopedia sovietica
Processi che forniscono resistenza biologica attiva o passiva dell'organismo a determinati malattie infettive. Stimolazione artificiale dell'immunizzazione attiva sistema immunitario introducendo un vaccino o un tossoide (neutralizzato ... ... Enciclopedia Collier
I prodotti biologici sono un gruppo di prodotti medici di origine biologica, inclusi vaccini, emoderivati, allergeni, cellule somatiche, tessuti e proteine ricombinanti. La composizione dei preparati biologici può includere zuccheri, ... ... Wikipedia
FERITA INFEZIONE ANAEROBICA- Miele. Anaerobico infezione della ferita infezione con necrosi rapidamente progressiva e decadimento dei tessuti molli, solitamente accompagnata dalla formazione di gas e grave intossicazione; più formidabile e complicazione pericolosa ferite di qualsiasi origine. Eziologia Patogeni ... Manuale di malattia