Ricevimento e registrazione del materiale biologico in ingresso. Norme per il prelievo, la consegna, la ricezione, il trattamento e la registrazione del materiale biologico. Studi clinici generali di laboratorio - Documento. I tubi alla consegna devono essere posizionati all'interno

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"Nizhny Novgorod Medical College"

(GBOU SPO NO "NMK")

Test

Argomento: "Organizzazione dell'accettazione, dell'etichettatura e della registrazione del biomateriale"

Completato:

studente del gruppo 221-IV lab.

Stepanychev M.N.

Insegnante:

Belova M.N.

N.Novgorod 2016

introduzione

1. Parte teorica

1.1 Registrazione delle indicazioni

1.2 Modalità laboratorio

1.3 Condizioni di conservazione e trasporto del materiale del laboratorio clinico

1.4 Ambito

1.5 Organizzazione del processo di trasporto del biomateriale tramite corriere e responsabilità del corriere

1.6 Accettazione del biomateriale in laboratorio

1.7 Trasferimento del biomateriale e rinvii ai reparti competenti del laboratorio

1.8 Registrazione dei buoni d'ordine da parte degli operatori

2. Parte pratica

Conclusione

introduzione

Gli studi di laboratorio sono gli indicatori più sensibili delle condizioni del paziente. Specialisti clinici diagnostica di laboratorioÈ noto da tempo che molti fattori possono influenzare i risultati dei test di laboratorio. Tra questi fattori: campioni di biomateriali correttamente consegnati e ben formati e relativa documentazione. In assenza di tali informazioni di supporto (fattori che influenzano ricerca di laboratorio) il medico può dare un'interpretazione errata del risultato ottenuto e intraprendere un'azione sbagliata nei confronti del paziente.

Lo scopo di questo controllo è quello di richiamare l'attenzione sulla necessità di rivedere le regole per l'accettazione e il trattamento della documentazione del materiale biologico. L'uso corretto delle informazioni dovrebbe portare a una riduzione delle ricerche superflue, una riduzione dei costi e una migliore comprensione dei risultati della ricerca.

Bersaglio:

Studiare l'organizzazione dell'accettazione, dell'etichettatura e della registrazione dei biomateriali.

Compiti:

1. Studio dell'assunzione di biomateriale.

2. Preparazione della relativa documentazione.

1. Parte teorica

Attualmente, i metodi di ricerca di laboratorio svolgono un ruolo chiave nella diagnosi e nel trattamento delle malattie. Quando si esaminano i pazienti Grande importanza avere aspetti organizzativi della diagnostica di laboratorio, garantendo l'accuratezza e la correttezza della ricerca di laboratorio, l'uso di metodi analitici stabili e tecnicamente affidabili e il controllo di qualità della ricerca.

Nelle istituzioni sanitarie viene utilizzato un arsenale abbastanza ampio di metodi di laboratorio e, insieme a metodi di routine unificati, viene utilizzato anche metodi moderni studi ad alta specificità e contenuto informativo.

L'introduzione di metodi di laboratorio altamente specifici per la diagnosi delle malattie nella pratica sanitaria richiede la standardizzazione in tutte le fasi del processo diagnostico.

La percentuale di errori preanalitici nel numero totale di errori di laboratorio varia dal 50% al 95%. Gli errori che si verificano nella fase preanalitica della ricerca di laboratorio svalutano l'intero ulteriore corso della ricerca di laboratorio, portano alla perdita di fondi significativi, screditano i metodi di laboratorio agli occhi del medico curante a causa dell'inaffidabilità dei risultati ottenuti.

Per tutti i tipi di ricerca di laboratorio, la fase preanalitica combina una serie di processi prima dell'effettivo analisi di laboratorio, Che consiste di:

attenta preparazione dei soggetti;

Ottenere biomateriale (sangue, urina, ecc.);

trasporto di biomateriale al laboratorio;

· prima lavorazione del biomateriale in laboratorio;

distribuzione e conservazione del biomateriale in laboratorio.

Il compito principale di queste fasi del processo preanalitico è garantire la stabilità (conservazione) dei componenti dei biomateriali presi per la ricerca e ridurre al minimo l'influenza di vari fattori che ne modificano la qualità.

A questo proposito, viene considerata la fase preanalitica.

1.1 Registrazione delle indicazioni

Quando prendi il materiale, devi compilare correttamente la direzione. Provette e documenti di accompagnamento, le etichette non devono essere confuse. La provetta è contrassegnata da un reparto e da un numero di serie. Su una provetta con sangue per determinare il gruppo e l'affiliazione Rh - inoltre il cognome del paziente.

Nella direzione per l'analisi quando si prende un biomateriale, è necessario indicare: (tutti i dati, tenendo conto dell'ordine del Ministero della Salute della Repubblica di Bielorussia del 28.09.2020).

dati del paziente - cognome, nome, patronimico, data di nascita, sesso, indirizzo, numero di anamnesi, diagnosi.

il nome del medico che ha inviato il biomateriale per l'analisi;

data e ora del prelievo del biomateriale;

· Dare breve descrizione biomateriale inviato (indicare il tipo di biomateriale), il materiale che non corrisponde a quello dichiarato non verrà esaminato - ad esempio saliva invece di espettorato, siero invece di plasma;

Caratteristiche del prelievo di biomateriale (luogo di prelievo - per sangue, per urina - volume, porzione, tempo di raccolta);

tutte le ricerche necessarie, e non solo" analisi biochimica sangue."

La direzione per l'analisi è firmata dal medico.

Evitare la duplicazione delle analisi.

1.2 Modalità laboratorio

Tutto il sangue deve provenire solo da centrifughe, provette chimicamente pulite prelevate dal laboratorio. Il sangue per la ricerca nella modalità di analisi di emergenza deve essere consegnato separatamente, non messo sul tavolo insieme alle analisi di routine senza preavviso. L'addetto al dipartimento che ha consegnato l'analisi urgente deve assicurarsi che l'analisi sia accettata dall'addetto al laboratorio.

I test urgenti vengono eseguiti entro 2 ore, solo per i pazienti in gravi condizioni, se è necessario un intervento di emergenza. Per eseguire analisi urgenti, vengono assegnati un assistente di laboratorio separato e un medico per la diagnostica di laboratorio. L'esecuzione di studi nella modalità di analisi urgente richiede un maggiore consumo di reagenti e tempo di lavoro degli specialisti e, di conseguenza, ingenti costi finanziari.

Attualmente, il laboratorio di analisi di emergenza esegue i seguenti esami del sangue in modalità di emergenza:

Determinazione della concentrazione di emoglobina

calcolo dell'ematocrito

Contare il numero di globuli rossi

Conteggio del numero di leucociti

Conteggio formula leucocitaria

Contare il numero di piastrine

L'analisi in servizio viene eseguita durante la giornata lavorativa - per i pazienti appena ricoverati o quando le condizioni del paziente peggiorano, il che non richiede un intervento di emergenza.

Nota: i valori normali dei parametri di laboratorio si riferiscono al materiale raccolto a stomaco vuoto. Pertanto, l'interpretazione dei risultati di uno studio urgente e in servizio non può essere un semplice confronto con i valori normali.

Gli studi programmati sono tutti gli studi programmati il ​​giorno prima e il materiale per il quale arriva in laboratorio dalle 7 alle 9 del mattino. Il tempo di esecuzione è fino a 6 ore, in alcuni casi è richiesta una procedura analitica più lunga.

L'esame di laboratorio dei dipendenti viene effettuato nella direzione del medico responsabile della visita medica dei dipendenti. In tutti gli altri casi è previsto un sopralluogo a pagamento.

1.3 Condizioni di conservazione e trasporto del materiale del laboratorio clinico

Al fine di prevenire l'infezione professionale, qualsiasi fluido biologico deve essere considerato un materiale potenzialmente infettivo, osservando tutte le norme pertinenti per la sua manipolazione durante il trasporto, lo stoccaggio e la manipolazione. Biomateriali da pazienti infettivi devono essere appositamente contrassegnati e maneggiati con estrema cura. Tutti i biomateriali provenienti da pazienti con infezione da HIV devono essere contrassegnati sulla direzione "codice 120" con l'indicazione obbligatoria del numero di anamnesi.

Il fluido biologico risultante deve essere consegnato al laboratorio il prima possibile. Se è necessario determinare il glucosio e gli indicatori dello stato acido-base, il sangue deve essere consegnato immediatamente al laboratorio.

In tutte le fasi del trasporto e della lavorazione, il sangue deve essere conservato in provette tappate per evitare l'evaporazione e la contaminazione con microbi e varie sostanze dall'esterno.

Le provette per la consegna devono essere posizionate verticalmente, con i coperchi rivolti verso l'alto, il che contribuisce alla sicurezza dei campioni e accelera la formazione di un coagulo quando si riceve il siero, riduce l'agitazione durante il trasporto e il rischio di emolisi.

I tubi non devono essere riempiti fino all'orlo. Il sangue intero ottenuto senza anticoagulanti non deve essere refrigerato prima della consegna al laboratorio per evitare l'emolisi.

La centrifugazione viene eseguita entro e non oltre 1 ora dal prelievo del biomateriale.

1.4 Ambito

Questa procedura operativa standard (di seguito - SOP) definisce la procedura per ricevere, registrare il biomateriale che entra nel laboratorio dalla sala di trattamento (nome dell'istituzione) e da altre istituzioni servite dal laboratorio, nonché identificare le incongruenze ed eliminarle.

Questa SOP è destinata all'assistente di laboratorio e all'operatore di laboratorio.

1.5 Organizzazione del processo di trasporto del biomateriale tramite corriere e responsabilità del corriere

La temperatura nel frigorifero, che è indicata sul display nell'abitacolo dell'auto, è registrata dal corriere nel giornale "Giornale di contabilità del regime di temperatura nei frigoriferi delle auto", e anche in questo giornale il corriere indica il suo nome completo, la targa dell'auto e l'orario di partenza dell'auto per il biomateriale immediatamente prima di recarsi presso gli istituti.

Il corriere, giunto presso la struttura sanitaria, si reca all'anagrafe di tale istituto, dove ritira i contenitori con i vari biomateriali. Ogni contenitore è contrassegnato con il nome dell'istituzione e il tipo di biomateriale (sangue, urine, feci, vetrini con tamponi, raschiati). Il corriere posiziona i contenitori in posizione orizzontale nel frigorifero della macchina, come mostrato nella foto.

Il corriere è responsabile dell'integrità dei contenitori, della loro incolumità, di assicurarne la correttezza regime di temperatura nel frigorifero dell'auto (+4 - +8 o C), nonché per la sicurezza del biomateriale consegnato dalle istituzioni al laboratorio. Durante il viaggio, il corriere monitora la temperatura nel frigorifero dell'auto, che viene visualizzata sul display installato nell'auto.

1.6 Accettazione del biomateriale in laboratorio

La temperatura, che viene indicata sul display nel frigorifero dell'auto al momento della rimozione dei contenitori, il corriere annota sul giornale "Il registro del regime di temperatura nei frigoriferi delle auto" nella colonna corrispondente al numero di stato dell'auto. E sempre nello stesso registro, l'autista indica l'orario di arrivo dell'auto con il biomateriale dalle istituzioni.

Il corriere passa i contenitori contrassegnati con campioni di sangue, strisci e raschiati all'assistente paramedico-laboratorio.

In ufficio, l'assistente di laboratorio apre il coperchio del contenitore ed estrae provette con sangue, vetrini con strisci e raschiature, cartelle con indicazioni per la ricerca.

Ordina le provette del sangue separatamente in rack, in base al tipo di provette (biochimiche, ematologiche e coagulologici) e ai nomi delle istituzioni che sono indicate sui rack.

1.7 Trasferimento del biomateriale e rinvii ai reparti competenti del laboratorio

In ufficio, il paramedico - assistente di laboratorio mette i rack con provette per studi biochimici, immunologici, coagulologici in contenitori contrassegnati "per il trasferimento di biomateriali" e li porta alla centrifugazione.

Il paramedico - assistente di laboratorio chiama i reparti di ematologia e PCR affinché gli assistenti paramedici di laboratorio dei rispettivi reparti prendano il biomateriale.

Quindi trasferisce le indicazioni per la ricerca agli operatori di registrazione.

1.8 Registrazione dei buoni d'ordine da parte degli operatori

Procedura di registrazione:

- l'operatore legge il codice a barre con uno scanner incollato sul modulo di riferimento;

- quindi l'operatore inserisce nella LIS i dati del passaporto del paziente: nome completo, data di nascita, indirizzo di residenza e altri dati: fonte dell'ordine (assicurazione sanitaria obbligatoria, VHI, pagamento in contanti, visita medica), numero di istituto, dipartimento, nome completo del medico che ha ordinato lo studio, diagnosi, codice MES (standard medico ed economico).

- successivamente l'operatore inserisce nel LIS gli indicatori che il medico curante ha prescritto e salva nel LIS l'ordine generato.

2. Parte pratica

Il City Clinical Hospital n. 40 è stato aperto nel 1966 ed è attualmente l'unico complesso medico multidisciplinare di Nizhny Novgorod, che comprende: un ospedale, un ospedale per la maternità, una clinica prenatale, una clinica per bambini e per adulti. È la principale base clinica del Dipartimento di Chirurgia, il centro per la formazione avanzata e la riqualificazione professionale degli specialisti, lo Stato di Nizhny Novgorod accademia medica, che opera sulla base dell'ospedale sin dalla sua apertura. Una caratteristica funzionale dell'ospedale n. 40 è l'accoglienza di pazienti con quasi tutte le patologie in casi di emergenza 24 ore su 24. Le ambulanze trasportano più di 100 pazienti al giorno.

In ospedale e lei divisioni strutturali tutto creato le condizioni necessarie per fornire un'assistenza tempestiva ai pazienti e il loro trattamento di qualità. Qui, i metodi tradizionali vengono utilizzati e migliorati con sicurezza e le ultime tecnologie mediche vengono introdotte attivamente. Le moderne apparecchiature diagnostiche vengono padroneggiate ovunque. Negli ultimi due anni, nell'ambito del programma di ammodernamento sanitario, l'ospedale ha ricevuto 216 unità di apparecchiature mediche, tra cui moderne apparecchiature diagnostiche endoscopiche, di laboratorio ed ecografiche, che hanno permesso di eseguire interventi più complessi in epatopancreatologia, colonproctologia e flebologia .

I principali esperti partecipano attivamente ai lavori di seminari specializzati, conferenze, simposi di livello russo e internazionale. biomateriale clinico di laboratorio

City Hospital No. 40 è una base clinica generale, dove moderna sviluppi scientifici e i metodi sono applicati nella pratica. Per molto tempo e fruttuosamente, qui è stato svolto un lavoro congiunto con il Dipartimento di Chirurgia del Centro per gli studi avanzati e la riqualificazione professionale degli specialisti dell'Accademia medica statale di Nizhny Novgorod. Il suo organizzatore, il professor Igor Leonidovich Rotkov, divenne il fondatore della scuola chirurgica, frequentata da quasi tutti i chirurghi dell'ospedale e oggi continuano a sviluppare la loro esperienza accumulata, introducendo nuovi sviluppi e tecniche. Sulla base dell'ospedale è stato creato un centro flebologico cittadino. Il Dipartimento di Chirurgia Pediatrica gestisce da diversi decenni il Dipartimento Scientifico di Gastroenterologia Pediatrica come filiale dell'Istituto di Pediatria di Nizhny Novgorod. Sulla base dell'ospedale di maternità ci sono reparti di ostetricia e ginecologia per il miglioramento dei medici e la formazione degli studenti dell'NSMA. Gli specialisti di molte regioni della Russia migliorano qui le loro abilità. Il lavoro congiunto di scienziati praticanti e medici ospedalieri contribuisce alla crescita delle loro competenze e l'innovazione in vari campi della medicina consente di ottenere risultati unici nel trattamento dei pazienti.

Sui risultati dei lavori del Comune ospedale clinico Sono state difese 40, 9 tesi di dottorato e 29 di master. Sono stati ricevuti più di 70 certificati di copyright e brevetti per metodi operativi, diagnostica e modelli di utilità sviluppati dagli specialisti dell'ospedale.

Il premio della città di Nizhny Novgorod nel campo della medicina nel 2012 è stato molto apprezzato dal team di medici. Il lavoro è dedicato a uno dei problemi più urgenti e complessi della chirurgia: il trattamento della flebotrombosi. estremità più basse, per l'ultimo quinquennio di osservazione e fornitura di cure chirurgiche di emergenza e programmate a pazienti con flebotrombosi nelle condizioni del centro flebologico cittadino sulla base del GBUZ NO "City Clinical Hospital No. 40".

L'ospedale di maternità, che fa parte della struttura dell'ospedale, dispone di 205 posti letto ed è il più grande in Regione di Nižnij Novgorod. Attualmente svolge la funzione di centro perinatale regionale, accogliendo 4500-5000 parti all'anno. Tutto il lavoro svolto dagli ostetrico-ginecologi è finalizzato alla riduzione del numero di casi di aborto spontaneo e di ipermaturità delle donne in gravidanza, al raggiungimento del parto naturale e al miglioramento dei tassi di sopravvivenza neonatale.

Da gennaio 2010 tra le mura policlinico per adulti Funziona con successo il Centro sanitario, riconosciuto come uno dei migliori a livello regionale. La sua esperienza lavorativa è stata presentata dal capo del Centro al Forum panrusso: "Una nazione sana è la base della prosperità della Russia".

Nel 2012, al fine di aumentare la disponibilità di cure mediche in un'area remota, è stato organizzato uno studio di un medico di medicina generale che opera con successo nella struttura di un policlinico per adulti.

Più di mille dipendenti dell'istituzione, tra medici, infermieri, assistenti di laboratorio, infermieri, personale tecnico, con il loro duro lavoro, cura e calore, creano un'atmosfera di umanesimo e misericordia, caratteristica del personale di GBUZ NO "Città Ospedale clinico n. 40".

Durante la pratica, è stato padroneggiato l'intero processo di ricezione e registrazione del biomateriale.

1. accettazione del biomateriale e delle forme.

2. Studio del biomateriale

3. Registrazione dei risultati sul modulo

4. Contabilizzazione del risultato nei registri di analisi

5. Smaltimento di biomateriali

Conclusione

La principale forma di controllo sull'organizzazione dell'accettazione, dell'etichettatura e della registrazione del biomateriale sono i controlli periodici esterni e interni. Ma questa forma di controllo non può essere considerata efficace. Il problema del controllo di questa fase della ricerca di laboratorio rimane oggi uno dei problemi più gravi della moderna medicina di laboratorio.

Il passo più efficace ed efficiente è creare condizioni standard per il prelievo, il trasporto e la conservazione dei campioni biologici dei pazienti (uso del vuoto o altri sistemi). L'introduzione pratica di tali sistemi non influisce su tutte le fasi della ricerca di laboratorio e, in generale, porta l'organizzazione del laboratorio a un livello diverso. Il loro uso non solo facilita l'organizzazione e promuove in modo significativo la standardizzazione della fase preanalitica, ma crea anche le condizioni necessarie per l'introduzione di moderni sistemi di laboratorio. Se gli analizzatori sono disponibili, possono essere utilizzati come provette primarie, il che semplifica notevolmente la fase analitica di uno studio di laboratorio.

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    La selezione del materiale clinico viene effettuata da personale medico nel rispetto delle regole del regime antiepidemico, solo con strumenti sterili monouso (siringhe, apposite sonde, cytobrushes, ecc.), in guanti monouso.

    Raccogliere il materiale dal locus selezionato nel modo più completo possibile utilizzando applicatori appropriati - sonde, cytobrushes (per garantire l'adeguatezza del campione clinico).

    Conservare il materiale ottenuto (DNA/RNA di microrganismi) utilizzando mezzi di trasporto affidabili e conservanti forniti dal laboratorio PCR. Il terreno per il trasporto e la conservazione del materiale clinico garantisce la stabilità di RNA e DNA a temperatura ambiente fino a 28 giorni.

    Collocare il materiale prelevato in vacuette con EDTA (sangue), in provette Eppendorf monouso chimicamente pulite (strisci, liquido cerebrospinale, biopsia, ecc.). La condizione principale per la raccolta del materiale è impedire che DNasi e ribonucleasi entrino nel campione, poiché ribonucleasi e DNasi sono enzimi per la degradazione di RNA e DNA. Sono estremamente stabili in ambiente resistere a bolliture prolungate. La principale fonte di nucleasi è pelle, particelle di polvere. Le provette e i puntali in plastica devono essere etichettati come "DNase, RNase-free" (privi di nucleasi).

    Immediatamente dopo il campionamento, chiudere bene le provette, le fiale con materiale clinico, senza toccare la loro superficie interna e la superficie interna dei coperchi.

    Quando si lavora con materiale clinico, quando si aprono provette, fiale, non eseguire movimenti bruschi ed evitare schizzi e schizzi, che possono portare alla contaminazione dei campioni e delle superfici di lavoro.

    Per evitare la contaminazione incrociata, conservare e trasportare i campioni in un sacchetto o rack di plastica separati. Se è necessario il trasferimento del campione, utilizzare micropipette automatiche con puntali monouso sostituibili con barriere antiaerosol.

    Prima del trasporto al laboratorio PCR, il biomateriale selezionato deve essere conservato a una temperatura di 2–4 °C per non più di 48 ore. È necessario ridurre al minimo il tempo dalla raccolta del campione all'analisi PCR. Il trasporto dei campioni viene effettuato in borse termiche, contenitori termici, thermos con borse termiche, ghiaccio o ghiaccio secco.

Sangue, plasma, siero

Si consiglia di prelevare campioni di sangue utilizzando sistemi sottovuoto. L'introduzione di tali sistemi consente di standardizzare le manipolazioni con il sangue, ha un effetto positivo su tutte le fasi della ricerca di laboratorio e, in generale, trasferisce il lavoro del laboratorio a un diverso livello di qualità superiore. Il loro utilizzo garantisce la protezione del personale dalle infezioni, riduce il tempo dedicato alla procedura di prelievo del sangue, è molto meno accompagnato da emolisi, consente di mantenere la sterilità dei campioni di sangue e di trasportarli ermeticamente.

Si consiglia di eseguire la venipuntura a stomaco vuoto dalla vena cubitale in uno speciale tubo sottovuoto con un anticoagulante, dopodiché il tubo viene capovolto per la miscelazione più volte. Le provette con il sangue vengono conservate in frigorifero a +4 °С - +8 °С. La durata massima di conservazione del sangue è di 1 giorno (non congelare!). Se è necessaria una conservazione a lungo termine, prelevare 1 ml di siero o plasma sanguigno e conservarlo a una temperatura di -16o-20oC per non più di 2 settimane.

Caratteristiche dei sistemi di vuoto utilizzati per la diagnostica PCR:

    Vacuettes con EDTA (6%) - utilizzato per la ricerca qualitativa e quantitativa. L'anticoagulante EDTA fissa bene gli acidi nucleici delle cellule.

    Le vacuette con citrato di sodio (3,8%) sono utilizzate per la ricerca qualitativa e quantitativa. Non adatto per il trasporto a lungo termine, perché il citrato è un buon mezzo nutritivo per la microflora estranea.

    Vacuette senza anticoagulanti (siero del sangue) - utilizzate per la ricerca qualitativa. L'uso del siero del sangue per studi quantitativi è indesiderabile, perché. parte dell'agente infettivo si deposita in un coagulo di sangue, mentre si riduce la possibilità di determinarne il contenuto quantitativo nel sangue.

    Le vacuette con eparina non sono categoricamente adatte per le reazioni di PCR. L'eparina è un polianione, come il DNA, quindi compete con il DNA nella reazione PCR.



Il tempo ottimale per un esame del sangue è nell'intervallo da 1 a 4 ore dopo l'assunzione Nell'intervallo da 5 a 30 minuti, c'è un temporaneo adattamento delle piastrine all'anticoagulante e alla loro aggregazione, che può portare alla loro falsa diminuzione di il campione di sangue.

Non è auspicabile esaminare il sangue entro 8 ore dall'assunzione, perché. alcune caratteristiche delle cellule cambiano: il volume dei leucociti diminuisce, il volume degli eritrociti aumenta, il che alla fine porta a risultati di misurazione errati e interpretazione errata dei risultati. Solo la concentrazione di emoglobina e il numero di piastrine rimangono stabili durante il giorno della conservazione del sangue.

Il sangue non può essere congelato. Il sangue capillare con K 2 EDTA deve essere conservato a temperatura ambiente e analizzato entro 4 ore dalla raccolta.

Per garantire un risultato qualitativo della ricerca, è necessario controllare rigorosamente il tempo e le condizioni di conservazione dei campioni prima dell'analisi.

Se è necessario condurre un'analisi ritardata (trasporto su lunghe distanze, malfunzionamento tecnico del dispositivo, ecc.), i campioni di sangue vengono conservati in frigorifero (4 o - 8 o C) ed esaminati entro 24 ore. Tuttavia, si dovrebbe tenere conto del fatto che le cellule si gonfiano e cambiano i parametri associati al loro volume. Nelle persone praticamente sane, questi cambiamenti non sono critici e non influenzano i parametri quantitativi, ma in presenza di cellule patologiche, quest'ultimo può cambiare o addirittura crollare entro poche ore dal momento del prelievo di sangue.

Immediatamente prima dello studio, il sangue deve essere accuratamente miscelato per diversi minuti per diluire l'anticoagulante e distribuire uniformemente gli elementi formati nel plasma. La miscelazione costante a lungo termine dei campioni fino al momento della loro ricerca non è raccomandata a causa di possibili lesioni e decadimento delle cellule patologiche.

Un esame del sangue su un analizzatore automatico viene eseguito a temperatura ambiente. Il sangue conservato in frigorifero deve prima essere riscaldato a temperatura ambiente, poiché la viscosità del sangue aumenta a basse temperature e le cellule del sangue tendono ad aderire, il che a sua volta porta a una miscelazione ridotta e a una lisi incompleta. Lo studio del sangue freddo può causare la comparsa di "segnali di allarme" dovuti alla compressione dell'istogramma leucocitario.

Quando si eseguono studi ematologici a una distanza considerevole dal luogo del prelievo di sangue, sorgono inevitabilmente problemi associati a condizioni di trasporto sfavorevoli. L'impatto di fattori meccanici (scuotimento, vibrazione, miscelazione, ecc.), le condizioni di temperatura, la probabilità di fuoriuscita e contaminazione dei campioni possono influire sulla qualità delle analisi. Per eliminare questi motivi, durante il trasporto di provette per il sangue, si consiglia di utilizzare provette di plastica sigillate ermeticamente e speciali contenitori di trasporto isotermici. Durante il trasporto non è consentito il contatto del campione (con materiale autoctono) e del modulo di rinvio, in accordo con le norme di sicurezza biologica.

^ 4.3. Ricezione e registrazione di materiale biologico

Le provette con campioni di sangue venoso vengono consegnate al laboratorio il giorno del prelievo in rack in apposite borse per la consegna di materiale biologico, in cui le provette devono essere in posizione verticale e, se trasportate a distanza, in appositi contenitori .

L'addetto al laboratorio che riceve il materiale deve controllare:

La correttezza dell'invio: il modulo di invio indica i dati del soggetto (cognome, nome e patronimico, età, anamnesi o numero tessera ambulatoriale, reparto, diagnosi, terapia);

Etichettatura delle provette con campioni di sangue (devono essere contrassegnate con il codice o cognome del paziente, identico al codice e cognome nel modulo per l'invio del materiale per lo studio). L'assistente di laboratorio deve registrare il materiale consegnato, annotare il numero di provette.

^ 4.4 Calcolo della composizione cellulare del sangue su un analizzatore ematologico

Il calcolo della composizione cellulare del sangue su un analizzatore ematologico deve essere eseguito in stretta conformità con le istruzioni per il dispositivo.

Quando si lavora su un analizzatore ematologico, è necessario:

Utilizzare sangue stabilizzato con K-2 EDTA nella proporzione consigliata per il sale specifico e provette ematologiche monouso (semplici o sottovuoto);

Prima dell'analisi, miscelare accuratamente ma accuratamente la provetta con il sangue (si consiglia di utilizzare un dispositivo per la miscelazione dei campioni di sangue - rotomix per questo scopo);

Utilizzare i reagenti registrati nel modo prescritto; quando si cambiano i reagenti con prodotti di un altro produttore, controllare e impostare la calibrazione dello strumento;

Avviare il dispositivo, osservando tutte le fasi del lavaggio, ottenendo valori zero (di sfondo) degli indicatori per tutti i canali;

Prestare attenzione ai messaggi dello strumento su possibili errori sistematici: ricordare che l'aumento di MCHC è maggiore valori normali, solitamente il risultato di un errore di misurazione;

Se viene rilevato un errore, è imperativo eliminare la causa, non lavorare su un dispositivo difettoso;

Eseguire la procedura di controllo qualità secondo il programma appropriato. con una valutazione del risultato;

Lavora in modo significativo, confrontando i risultati ottenuti con caratteristica clinica campioni di pazienti;

Al termine delle misurazioni, risciacquare accuratamente l'analizzatore;

Quando il dispositivo viene arrestato per lungo termine assicurarsi di eseguire tutte le procedure di conservazione (se possibile, insieme a un tecnico dell'assistenza);

In caso di problemi tecnici, è necessario richiedere l'aiuto di un tecnico dell'assistenza di un'azienda autorizzata a Manutenzione; Non affidare il lavoro a personale non addestrato.

Quando si inizia a lavorare su un analizzatore ematologico, si dovrebbe tener conto dei limiti di linearità della misurazione dei parametri analizzati. La valutazione di campioni con valori dei parametri analizzati che eccedono il limite di linearità della misurazione può portare a risultati errati. Nella maggior parte dei casi, quando si analizzano campioni con ipercitosi, l'analizzatore visualizza una "D" (diluito) invece del valore del parametro misurato, che indica la necessità di diluire il campione e rimisurare. La diluizione deve essere eseguita fino ad ottenere risultati finali simili alle due diluizioni successive.

^ PRI me R ─ Nella tabella è presentata l'analisi di un campione di un paziente con iperleucocitosi su tre diversi analizzatori ematologici.

Tabella 3

¦Risultati del conteggio dell'iperleucocitosi eseguiti su tre diversi analizzatori ematologici


^ Analizzatori ematologici

Tasso di diluizione del campione

Valore finale

^ Sangue intero

1:1

1:3

1:4

GB

1

D

274,5

274,5

143,1

715,5

2

322,6

253,2

177,7

141,8

709,0

3

D

D

168,3

139,1

695,5

La tabella mostra che durante l'analisi del sangue intero, solo un analizzatore (2 °) ha fornito un valore digitale per il numero di leucociti, gli altri due hanno indicato la necessità di diluire il campione. La successiva misurazione graduale del campione in tre diluizioni ha consentito di ottenere risultati finali ravvicinati su tutti i dispositivi solo con una diluizione di 1:3 e 1:4. Pertanto, il numero totale di leucociti era 700,0 - 710,0 x 10 9 /l, che è più di 2 volte superiore al valore iniziale ottenuto nel sangue intero sul 2° analizzatore e 1,5 - a una diluizione di 1:1 sul 1° e 2° analizzatori.

  1. ^ Taratura di analizzatori ematologici
Di conseguenza, la calibrazione si riferisce alla procedura per la regolazione dell'analizzatore

Che raggiunge l'uguaglianza a zero della componente sistematica dell'errore (zero bias) o conferma che il bias è zero, tenendo conto dell'errore di calibrazione. La calibrazione degli analizzatori ematologici può essere eseguita principalmente in due modi:

Per sangue intero;

Basato su campioni di sangue stabilizzato con valori certificati.

^ 5.1 Calibrazione del sangue intero

La calibrazione del sangue intero può essere eseguita per confronto con un analizzatore di riferimento, la cui calibrazione è stata verificata e può essere presa come l'originale.

Per la calibrazione per confronto con l'analizzatore di riferimento vengono utilizzati 20 campioni di sangue venoso di pazienti, selezionati casualmente dal programma di ricerca giornaliero del laboratorio che possiede l'analizzatore di riferimento. Il sangue deve essere prelevato in provette sottovuoto con anticoagulante K 2 EDTA. Dopo l'analisi sull'analizzatore di riferimento, le provette del sangue vengono consegnate al laboratorio per l'analisi sul dispositivo da calibrare. Il tempo tra le misurazioni sull'analizzatore di riferimento e calibrato non deve superare le 4 ore. L'analisi dei campioni di calibrazione sullo strumento da calibrare deve essere eseguita allo stesso modo dell'analisi dei campioni dei pazienti. I risultati ottenuti vengono inseriti in una tabella nella forma riportata nell'Appendice 1. Questi risultati vengono utilizzati per determinare i corrispondenti fattori di calibrazione, che sono numericamente uguali ai coefficienti della pendenza delle rette di calibrazione passanti per l'origine sul grafico.

I fattori di calibrazione vengono calcolati su un computer utilizzando il programma EXCEL incluso nel pacchetto Microsoft OFFICE di qualsiasi versione. Per calcolare i fattori di calibrazione in questo programma, viene costruito un grafico a dispersione, in cui i valori misurati vengono tracciati lungo l'asse X, i valori di riferimento vengono tracciati lungo l'asse Y e una linea di regressione viene impostata attraverso l'origine. Il programma disegna una linea di calibrazione e ne determina la pendenza, che è il fattore di calibrazione desiderato. Se vengono rilevati errori grossolani - punti che sono significativamente separati dalla linea di calibrazione sul grafico, devono essere rimossi dal calcolo (eliminare l'intera linea nella tabella EXCEL). Il fattore di calibrazione risultante è inserito nella tabella dell'Appendice 1 e viene utilizzato per regolare manualmente la calibrazione del dispositivo secondo le sue istruzioni operative.


    1. ^ Calibrazione contro campioni di sangue stabilizzato con valori certificati
Questo metodo di calibrazione si basa su materiali commerciali di calibrazione e controllo, che sono una miscela artificiale di eritrociti umani stabilizzati e cellule umane o animali fissate che imitano i leucociti e le piastrine. A causa della significativa differenza delle proprietà biologiche dei componenti di questi materiali dal sangue naturale, i valori certificati dei parametri ematologici dipendono dal tipo specifico di analizzatore.

Quando possibile, dovrebbero essere utilizzati calibratori appositamente progettati dal produttore per calibrare un particolare tipo di analizzatore. Gli errori di setpoint nei moderni calibratori ematologici generalmente soddisfano i requisiti medici. Tuttavia, non tutti i tipi di analizzatori dispongono di tali calibratori. Inoltre, a causa della limitata durata di conservazione (solitamente non superiore a 45 giorni), non sempre è possibile ottenere campioni non scaduti.

I materiali di controllo non sono destinati dal produttore a scopi di calibrazione: le tolleranze per i valori sono molto più ampie, i metodi di validazione e controllo della produzione non sono così rigidi come per i calibratori. Durante la calibrazione, i materiali di controllo possono essere utilizzati solo come una delle fonti di informazioni sulle proprietà metrologiche del dispositivo.

Tuttavia, va tenuto presente che quando vengono utilizzati sia materiali di controllo che calibratori per scopi di calibrazione, le caratteristiche della preparazione del campione e il funzionamento degli analizzatori hanno un impatto significativo sulle componenti dell'errore sistematico. Questi fattori di influenza non possono essere presi in considerazione durante la calibrazione con materiali commerciali. Di conseguenza, in tutti i casi, la calibrazione eseguita deve essere verificata analizzando la statistica dei risultati ottenuti nei campioni dei pazienti (indici eritrocitari, intervalli dei valori normali).

5.2.1 Intervalli di calibrazione per analizzatori ematologici

I requisiti dell'intervallo di calibrazione si trovano solitamente nel manuale di istruzioni dell'analizzatore. Di norma, la calibrazione è necessaria dopo una riparazione o quando viene rilevata una deriva significativa nelle procedure di controllo qualità interne.

5.2.2 Procedura di calibrazione

La procedura di calibrazione viene eseguita in conformità con il manuale di istruzioni dell'analizzatore.

5.2.3 Controllo del risultato della calibrazione

Questo controllo consiste nell'analisi del campione di calibrazione subito dopo la calibrazione. La calibrazione eseguita è accettata se i risultati dell'analisi corrispondono ai valori di calibrazione, tenendo conto della variazione analitica dell'analizzatore.

5.2.4 Verifica della calibrazione utilizzando gli indici RBC

Questo metodo di verifica e perfezionamento della calibrazione utilizza il fatto che i valori medi degli indici eritrocitari - MCHC, MCH e MCV per i pazienti hanno una variazione piuttosto piccola e quindi possono essere efficacemente utilizzati per il controllo della calibrazione e un ulteriore controllo di qualità. Il numero consigliato di campioni per la determinazione della media è 20. Qualsiasi campione di paziente può essere utilizzato per determinare l'MCHC medio, mentre i pazienti con anemia devono essere esclusi dall'MCHC e dall'MCV medi.

Molti moderni analizzatori ematologici dispongono di programmi integrati per il calcolo delle medie correnti, il che semplifica notevolmente l'elaborazione dei dati.

I valori target degli indici eritrocitari, mediati su 20 campioni di pazienti di età compresa tra 18 e 60 anni, indipendentemente dal sesso, sono riportati nella Tabella 4.

Tabella 4

Valori target degli indici eritrocitari

Se i valori medi ottenuti sono al di fuori della tolleranza di controllo, significa che la calibrazione MCV o Hgb o RBC deve essere corretta.

Nel determinare i motivi di una calibrazione insoddisfacente dallo studio dei parametri degli eritrociti quando si utilizzano materiali di calibrazione / controllo commerciali, è necessario tenere conto della seguente valutazione dell'affidabilità dei valori certificati dei materiali:

Il parametro più accurato e stabile nel tempo è la concentrazione di eritrociti;

Hgb è un parametro stabile, ma può dipendere dai reagenti utilizzati (ad esempio cianuro o senza cianuro);

Il parametro più instabile è MCV. Il valore MCV tende a variare durante l'intera shelf life del materiale in un intervallo di valori abbastanza ampio. Nell'affinare la calibrazione MCV, i dati ottenuti dall'analisi delle medie degli indici eritrocitari hanno la precedenza sui valori certificati nei campioni di sangue stabilizzato.

Supponendo che la calibrazione RBC sia corretta, la Tabella 5 indica possibili ragioni uscita dei valori medi degli indici oltre la tolleranza di controllo.

Tabella 5

Ragioni per andare oltre i valori medi degli indici eritrocitari


Indici eritrocitari

Valore indice medio

Valore indice medio

Valore indice medio

Valore indice medio

MCHC

Sotto il confine

Sopra il confine

Sopra il confine

Sotto il confine

MCH

all'interno della tolleranza

all'interno della tolleranza

Sopra il confine

Sotto il confine

MCV

Sopra il confine

Sotto il confine

all'interno della tolleranza

all'interno della tolleranza

Causa

MCV troppo caro

MCV sobrio

Alta Hgb

Hgb basso

Istruzioni per la raccolta, lo stoccaggio e il trasporto

materiale biologico per la ricerca di laboratorio

Il materiale biologico deve trovarsi in provette etichettate (contenitori) e accompagnato da un referto individuale compilato in una copia.

E' necessario compilare in modo accurato e leggibile la richiesta, indicando le seguenti informazioni: data, numero di provetta, nome della struttura sanitaria che ha inviato il biomateriale in esame, nome del medico che ha prelevato il materiale; Nome, età e sesso del paziente, diagnosi preliminare; durante la gravidanza - età gestazionale.

Accettazione di materiale biologico:

PCR e esami del sangue immunochimici- Con 09:00 Prima 18:00 esclusi i fine settimana e i giorni festivi.

Studi batteriologici- Con 09:00 Prima 11:00 esclusi venerdì, fine settimana, prefestivi e festivi.

per la rilevazione di agenti patogeni mediante PCR

1.1.1. Il biomateriale viene prelevato dall'habitat previsto dei microrganismi e dallo sviluppo dell'infezione.

1.1.2. La quantità di materiale raccolto dovrebbe essere piccola. Lo scarico in eccesso, il muco e il pus influiscono negativamente sulla qualità dell'estrazione del DNA e contribuiscono alla degradazione del DNA durante la conservazione e il trasporto.

1.1.3. Quando si introduce un biomateriale prelevato da un paziente con una sonda con un batuffolo di cotone o uno spazzolino in una provetta Eppendorf con una soluzione tampone, è necessario:

Osservare la sterilità;

Prima di immergere nella soluzione il biomateriale raccolto sul tampone (pennello), spalmarlo sulla parete asciutta della provetta, quindi inumidire il tampone (pennello) nella soluzione e, ruotando la sonda, lavare accuratamente tutto il materiale dalla parete della provetta e del tampone (pennello);


Se possibile, schiacciare il tampone contro la parete della provetta, rimuovere la sonda con il tampone (pennello) e chiudere la provetta.

1.2. Metodi per prelevare biomateriali per la ricerca mediante PCR

1.2.1. Raschiature. Per i raschiamenti vengono utilizzate sonde sterili monouso che hanno un batuffolo di cotone con maggiore adsorbimento o "spazzole", meno spesso cucchiai Volkmann, cucchiaini per le orecchie o strumenti simili con bordi leggermente smussati. Movimenti raschianti per raccogliere materiale. Il materiale di prova dovrebbe contenere il maggior numero possibile di cellule epiteliali e una quantità minima di muco, sangue e impurità dell'essudato. Trasferire il materiale in una provetta Eppendorf sterile con soluzione tampone (vedere sezione 1.1.).

Raschiando dal canale cervicale: prima di eseguire un raschiamento, è necessario rimuovere il muco in eccesso con un batuffolo di cotone sterile, trattare la cervice con soluzione salina sterile. Inserire la sonda nel canale cervicale per una profondità di 0,5-1,5 cm, evitando il contatto con le pareti della vagina, e raccogliere il materiale con un movimento raschiante (non sangue). Un piccolo numero di globuli rossi nel campione non influisce sul risultato dell'analisi. In presenza di erosione cervicale, il materiale viene prelevato dal bordo di tessuto sano e alterato.

Raschiando dall'uretra: inserire la sonda nell'uretra (negli uomini - ad una profondità di 2-4 cm) e raccogliere il materiale con diversi movimenti rotatori. Alla vigilia prima di prendere il materiale è consentita una provocazione (cibo piccante, alcol, ecc.). Si raccomanda di astenersi dall'urinare per 1-2 ore prima del prelievo. In presenza di abbondante secrezione purulenta raschiare deve essere assunto entro e non oltre 15 minuti dopo la minzione.

Raschiando dalla congiuntiva assumere, dopo aver precedentemente anestetizzato l'occhio con una soluzione allo 0,5% di dicaina. Dopo aver ruotato la palpebra, utilizzare una sonda con un batuffolo di cotone (o un bisturi oculare) per raccogliere le cellule epiteliali dalla congiuntiva.

Raschiando dal retto: inserire la sonda nell'ano per una profondità di 3-4 cm e raccogliere il materiale con un movimento rotatorio.

1.2.2. Colpi. Utilizzando una sonda sterile monouso con un batuffolo di cotone o uno spazzolino, prelevare una piccola quantità di secrezione (dalle volte della vagina, dalla faringe, nasofaringe, ecc.) e trasferirla in una provetta Eppendorf sterile con una soluzione tampone (vedere paragrafo 1.1.).

1.2.3. Sangue. Per il test PCR, il sangue deve essere nativo(non rannicchiato).

Raccogliere il sangue in modo asettico, mediante prelievo venoso - in una provetta di marca (2-3 ml) con anticoagulante EDTA ( l'eparina non deve essere usata come anticoagulante!), mescolare delicatamente capovolgendo delicatamente la provetta.

Il sangue con EDTA è un biomateriale per seguenti gruppi ricerca:

- ricerca genetica(il momento del prelievo di sangue non ha importanza).

- rilevamento di agenti infettivi(i più informativi sono i campioni prelevati durante i brividi, temperatura elevata, cioè presumibilmente durante viremia o batteriemia).

1.2.4. Urina. In un contenitore sterile vuoto con tappo a vite ermetico, raccogliere la prima o la porzione intermedia di urina del mattino in una quantità di almeno 10 ml. Se il prelievo delle urine viene effettuato durante il giorno, prima il paziente non deve urinare per 1,5-3 ore.

1.2.5. Espettorato. Igienizzare al mattino cavità orale e gola (sciacquare con una soluzione bere soda). Raccogliere l'espettorato in una fiala vuota sterile a bocca larga.


1.2.6. Biopsia. Il materiale deve essere prelevato dalla zona della presunta ubicazione dell'agente infettivo, dal tessuto danneggiato o dall'area confinante con il danno. Posizionare la biopsia in una provetta Eppendorf sterile con soluzione tampone.

1.2.7. Saliva, succo gastrico, liquido cerebrospinale, liquido sinoviale. Saliva (1-5 ml), succo gastrico (1-5 ml), liquido cerebrospinale (1-1,5 ml) - mettere in una provetta sterile vuota (contenitore).

1.2.8. Succo prostata. Dopo il massaggio prostatico, il succo viene raccolto in una quantità di 0,5-1 ml in una provetta sterile vuota (contenitore). Se è impossibile ottenere il succo, subito dopo il massaggio, la prima porzione di urina viene raccolta in una quantità non superiore a 10 ml (questa porzione contiene succo prostatico).

1.2.9. Lavaggi, lavaggio broncoalveolare(PALLA). Con un batuffolo di cotone sterile e 5-7 ml di soluzione fisiologica, si esegue un lavaggio, ad esempio, dalla punta di un endoscopio o di un broncoscopio e si inseriscono 0,5-5 ml di lavaggio in una provetta sterile vuota (contenitore).

1.2.10. Feci. Una sonda con un batuffolo di cotone viene posta all'interno delle feci e leggermente ruotata, catturando una piccola quantità di materiale. Quindi il materiale viene posto in una provetta Eppendorf sterile con una soluzione tampone.

1.3. Regole per la conservazione del materiale biologico per la ricerca PCR

1.3.1. Tamponi, raschiati:

In frigorifero (+4ºС - +8ºС) fino a 7 giorni;

Nel congelatore (-20ºС) fino a 14 giorni (è consentito un solo scongelamento!).

1.3.2. Urina: in frigorifero (+4ºС - +8ºС) non più di 1 giorno;

1.3.3. Sangue con EDTA: in frigorifero (+4ºС - +8ºС) - per determinare agenti infettivi - non più di 1 giorno; Per ricerca genetica- fino a 4 giorni. Il congelamento non è soggetto.

1.3.4. Espettorato

1.3.5. Biopsie:

In frigorifero (+4ºС - +8ºС) non più di 1 giorno,

Nel congelatore (-20ºС) fino a 2 settimane.

1.3.6. succo di prostata: in frigorifero (+4ºС - +8ºС) non più di 1 giorno.

1.3.7. liquido sinoviale: in frigorifero (+4ºС - +8ºС) non più di 1 giorno.

2. Regole per il prelievo, la conservazione e il trasporto del sangue

per la ricerca immunochimica

2.1.1. Alla vigilia del prelievo di sangue, escludere attività fisica, situazioni stressanti, procedure fisioterapiche, assunzione di farmaci (ad eccezione dei casi trattamento farmacologico prescritto da un medico), contraccettivi orali, alcool e cibi grassi. Non fumare immediatamente prima dello studio.

2.1.2. Quando si esamina la funzione ghiandola tiroidea durante il periodo di trattamento con farmaci contenenti ormoni tiroidei, lo studio viene effettuato 24 ore dopo l'ultima dose del farmaco; 2-3 giorni prima del prelievo di sangue, escludere l'uso di farmaci contenenti iodio.

2.1.3. Quando si esamina il PSA una settimana prima dell'analisi, escludere eventuali manipolazioni con la ghiandola prostatica.

2.1.4. Il sangue viene prelevato al mattino, a stomaco vuoto (per evitare chileness, cioè torbidità del siero), in condizioni di riposo fisiologico. Prima di prelevare il sangue, il paziente deve riposare per 15 minuti.

2.1.5. Il prelievo di sangue viene effettuato nella sala di cura della struttura medica, nella posizione del paziente "seduto" o "sdraiato", dalla vena cubitale nel rispetto delle regole di asepsi e antisepsi. Il sangue viene raccolto in una provetta sterile, monosiringa o sistema di raccolta del sangue (Vacutainer®, Vacuette®).

2.1.6. Per siero sangue deossigenato stare in piedi fino alla completa riduzione. Dopo la formazione di un coagulo di fibrina, quest'ultimo viene separato dalle pareti con una bacchetta di vetro sterile, rigorosamente individuale per ogni campione, la provetta viene centrifugata a 3000 rpm per 15 minuti * .

* I sistemi monosiringa e prelievo sangue (Vacutainer®, Vacuette®) vengono sottoposti a centrifugazione senza manipolazioni preventive.

2.1.7. Supernatante colore giallo(siero) viene accuratamente pipettato in una provetta vuota con tappo (5 ml).

2.2. Regole per la conservazione del sangue e del siero del sangue per studi immunochimici

2.2.1. Afossato: in frigorifero (+40C - +80C) per 1 giorno.

2.2.2.Sierosangue:

In frigorifero ad una temperatura di +40C - +80C per 4 giorni;

Nel congelatore a -200C per 2 settimane.

È consentito un solo sbrinamento!

ATTENZIONE! Il siero che non contiene impurità di eritrociti, crescite batteriche, chilosi, emolisi è oggetto di ricerca. In presenza di uno qualsiasi di questi segni, il siero viene distrutto e viene prescritto un prelievo di sangue ripetuto.

2.3. Regole per il prelievo e la conservazione del sangue per lo studio del lupus anticoagulante

E studi sulla coagulazione

2.3.1. Il sangue viene prelevato al mattino a stomaco vuoto dalla vena cubitale nel rispetto delle regole di asepsi e antisepsi del giorno dello studio. Per prevenire l'attivazione della coagulazione del sangue, la compressione della vena non deve superare 1 minuto .

2.3.2. Se lo studio è prescritto sullo sfondo dell'assunzione di farmaci che influenzano la coagulazione del sangue, dovrebbe essere notato nella direzione.

2.3.3. Il sangue viene raccolto in un tubo speciale contenente citrato di sodio, fino al segno. Se questa regola non viene rispettata, il rapporto sangue/anticoagulante cambia, il che può influire negativamente sull'accuratezza del risultato.

2.3.4. Entro 1 ora dal prelievo di sangue, la provetta deve essere centrifugata a 3000 rpm per 15 minuti.

2.3.5. Conservazione del plasma: fino a 6 ore a +40C - +80C o fino a 2 settimane a -200C.

2.4. Regole per il prelievo e la conservazione del sangue per lo studio dell'emoglobina glicata (glicosilata).

2.4.1. Il sangue viene prelevato al mattino a stomaco vuoto dalla vena cubitale, osservando le regole dell'asepsi e dell'antisepsi.

2.4.2. Il sangue viene raccolto in una provetta speciale contenente EDTA, delicatamente miscelato. Non centrifugare!

2.4.3. Consegna al Laboratorio il giorno del prelievo.

2.4.4. Stoccaggio: fino a 2 settimane a -200C.

2.5. Regole per lo screening prenatale

2.5.1. Tempismo ottimale conduzione dello studio: I trimestre - 10-13 settimane di gravidanza; II trimestre - 16-18 settimane di gravidanza.

2.5.2. Quando si fa riferimento allo studio, viene compilata una direzione speciale, in cui è necessario indicare i dati individuali della donna incinta: età (data / mese / anno), peso, risultati ecografici (KTR, BDP, numero di feti, età gestazionale all'ecografia (settimane + giorni); se disponibile - dati sulla dimensione della piega del collo - NT) con l'indicazione obbligatoria della data dell'ecografia e del nome del medico che ha eseguito l'ecografia; ulteriori fattori di rischio (fumo, diabete, fecondazione in vitro), etnia.

2.5.3. Per lo screening del secondo trimestre di gravidanza si possono utilizzare i dati di un'ecografia eseguita nel primo trimestre.

3. Norme per il prelievo, lo stoccaggio e il trasporto del biomateriale

per la ricerca batteriologica

3.1. Il biomateriale viene prelevato prima dell'applicazione del ciclo di terapia antibiotica o non meno di una settimana dopo il suo completamento.

3.2. Per prevenire la contaminazione del campione da parte di microrganismi dall'ambiente esterno, il biomateriale prelevato viene trasferito in un contenitore vuoto o provetta con un mezzo di trasporto conforme alle regole standard di sterilità: il tappo della provetta (contenitore) viene aperto/ chiusa in modo che l'interno del tappo rimanga sterile, la vetreria sterile non viene tenuta aperta a lungo.

3.3. Prendendo biomateriale per il rilevamento micoplasmi e ureaplasmi, Trichomonas, gonococchi, microflora non specifica, colture di batteri anaerobici prodotto in provette di marca con terreno di trasporto del carbonio:

Aprire la confezione nel luogo indicato secondo lo schema;

Rimuovere e aprire la provetta, eliminare il tappo;

Utilizzare una sonda per eseguire un raschiamento/tampone, una biopsia o immergere la sonda in un fluido biologico;

Posizionare la sonda con il biomateriale immediatamente nella provetta (il manico della sonda è il tappo della provetta);

Numerare la provetta, indicare il numero nella direzione.

3.4. Tipi di materiale biologico da portare nell'ambiente di trasporto del carbone: strisci / raschiati, succo prostatico, liquido cerebrospinale, liquido sinoviale, biopsia.

3.5. Conservazione del biomateriale in provette con mezzo di trasporto per il rilevamento micoplasmi e ureaplasmi, microflora aspecifica fino al momento del trasporto -

Consegna al Laboratorio entro un giorno.

3.6. Conservazione del biomateriale in provette con mezzo di trasporto per il rilevamento Trichomonas, gonococchi, colture di batteri anaerobi fino al momento del trasporto - a temperatura ambiente.

3.7. Biomateriale nativo: espettorato, succo prostatico, liquido sinoviale da 1 a 10 ml per rilevare microflora non specifica, micoplasmi e ureaplasmi vengono raccolti in un contenitore sterile vuoto.

È necessario avvisare il Laboratorio la vigilia o il giorno del prelievo del biomateriale entro le ore 11:00.

Stoccaggio di biomateriale nativo fino al trasporto - nel vano frigorifero (+4ºС - +8ºС).

Consegna al Laboratorio il giorno del prelievo.

3.8. Urina per testare il grado di batteriuria(porzione media mattutina, 10-20 ml) viene raccolto in un contenitore sterile vuoto con coperchio dopo un'accurata toilette dei genitali esterni.

È necessario avvisare il Laboratorio la vigilia o il giorno del prelievo del biomateriale entro le ore 11:00.

Stoccaggio del biomateriale fino al trasporto - nel vano frigorifero (+4ºС - +8ºС).

Consegna al Laboratorio il giorno stesso del prelievo del biomateriale.

3.9. Sangue per la sterilità.

Il più informativo è il campione di sangue prelevato durante l'aumento della temperatura.

Il sangue viene raccolto in flaconi di marca con un mezzo di trasporto a due fasi (flacone per adulti, flacone per bambini). Aprire con cautela il tappo di plastica della bottiglia, pulire la parte del tappo di gomma che è apparsa con alcool al 70%. In condizioni sterili, prelevare il sangue da una vena con una siringa e iniettare attraverso un tappo di gomma in una fiala (4 ml - in una fiala per adulti, 2 ml - in una fiala per bambini).

È necessario avvisare il Laboratorio la vigilia o il giorno del prelievo del biomateriale entro le ore 11:00.

Conservazione del sangue fino al trasporto - a temperatura ambiente.

Consegna al Laboratorio il giorno stesso del prelievo del biomateriale.

3.10. Latte materno per identificare la microflora non specifica, viene prelevato da ciascun seno in una tazza sterile separata ermeticamente sigillata. Firma le coppe: "seno sinistro", "seno destro".

Prima di raccogliere il biomateriale, lavare il torace acqua calda con sapone, pulire con un asciugamano pulito, trattare con cura i capezzoli e l'area intorno ai capezzoli con un batuffolo di cotone inumidito con una soluzione di etanolo al 70%, asciugare con un panno sterile (ogni ghiandola viene trattata con un tampone separato). I primi 10-15 ml di latte espresso non vengono utilizzati per l'analisi. Esprimi la seconda porzione di latte da ciascun seno nella tazza segnata nella quantità di ~ 10 ml.

È necessario avvisare il Laboratorio la vigilia o il giorno del prelievo del biomateriale entro le ore 11:00.

Consegna al Laboratorio entro 2 ore dal giorno del prelievo del materiale.

3.11. Feci per dysbacteriosis.

Prima di prelevare il campione, è vietato bere alcolici per 3 giorni e assumere antibiotici per 2 settimane. La sedia deve essere ottenuta senza clisteri e lassativi. I bambini con stitichezza possono usare una saponetta per un effetto irritante. Le feci vengono raccolte in una singola nave, lavate dal disinfettante. Con un cucchiaio sterile si prelevano 3-5 g di una porzione media di feci e si pongono in un contenitore sterile.

È necessario avvisare il Laboratorio la vigilia o il giorno del prelievo del biomateriale entro le ore 11:00.

Stoccaggio fino al momento del trasporto - conservare il contenitore con biomateriale da tenere al caldo avvolto in ovatta e carta.

Consegna al Laboratorio il giorno stesso del prelievo del biomateriale.

4. Regole per il prelievo, lo stoccaggio e il trasporto del biomateriale

per esami microscopici

4.1. Da ogni paziente 2 bicchieri(un bicchiere è di riserva). Su ogni bicchiere 3 punti: vagina ( v), canale cervicale ( CON), uretra ( U). Applica i tratti in modo che la superficie opaca sia a sinistra, in alto e da essa - da sinistra a destra: v, c, u.

4.2. Il segno (N.) sul vetro non deve dissolversi nell'alcool (puoi segnare sulla parte smerigliata del vetro con una semplice matita). Gli strisci devono essere fissati mediante asciugatura all'aria (30-60 min).

4.3. Gli occhiali devono essere contrassegnati, piegati con sbavature tra loro, confezionati in un sacchetto individuale con l'apposita scritta di accompagnamento (struttura sanitaria, nome completo del paziente, n. sul vetro).

4.4. Il pacco e il referto compilato vengono inviati al Laboratorio.

5. Regole per il prelievo, lo stoccaggio e il trasporto del biomateriale

5.1. Entro 24 ore prima dello studio, è necessario escludere il douching, l'uso della terapia intravaginale e i rapporti sessuali. Non puoi prendere il materiale durante le mestruazioni. I più informativi sono i campioni prelevati 14-20 giorni dopo l'inizio delle mestruazioni.

5.2. Il materiale viene prelevato prima di uno studio bimanuale, vari test diagnostici, prima di prelevare il materiale per la PCR. Il materiale viene prelevato senza trattamento preliminare della mucosa vaginale.

5.3. Una raschiatura dalla mucosa vaginale/cervicale viene prelevata con una spazzola Cervex-Brush in nylon, una spatola o un altro strumento e distribuita uniformemente sul vetrino, lasciando pulita un'estremità del vetrino (per la marcatura). Viene preso un punto sul bicchiere, duplicato per un altro bicchiere di riserva (solo due bicchieri per punto). Gli strisci devono essere fissati mediante asciugatura all'aria (30-60 min).

5.4. Gli occhiali devono essere marcati (n. e nome completo del paziente), piegati con strisci tra loro, confezionati in un sacchetto individuale con l'apposita scritta di accompagnamento (HCI, nome completo del paziente, n. sul vetro).

5.5. Gli strisci essiccati possono essere conservati fino a 6 giorni a temperatura ambiente.

5.6. Il pacco e il referto compilato (un referto per ogni punto indicante la tipologia di biomateriale) vengono trasferiti al Laboratorio.

Non mettere la direzione nel sacchetto di vetro, non avvolgere il vetro nella direzione!

Dipartimento di Diagnostica Clinica di Laboratorio con il corso di FPC e PC

L'elenco delle sezioni sulla disciplina della diagnostica clinica di laboratorio per preparare lo svolgimento delle prove in aula nella sessione invernale di esami di laboratorio da parte degli studenti del 6° anno della didattica a distanza.

1. Struttura organizzativa del laboratorio diagnostico clinico.

2. Studi clinici generali di laboratorio.

3. Studi di laboratorio ematologici.

4. Metodi di laboratorio per la valutazione dell'emostasi.

5. Ricerca di laboratorio biochimica.

6. Controllo di qualità della ricerca di laboratorio.

L'elenco delle domande di controllo sulla disciplina della diagnostica clinica di laboratorio per preparare lo svolgimento delle prove in aula nella sessione invernale di laboratorio da parte degli studenti del 6° anno della didattica a distanza.

    Organizzazione strutturale del laboratorio diagnostico clinico.

    Documenti normativi e ordini del Ministero della Salute della Repubblica di Bielorussia, che regolano il lavoro del laboratorio diagnostico clinico.

    Attrezzature di laboratorio di diagnostica clinica.

    Le principali apparecchiature di misurazione e analisi del laboratorio diagnostico clinico.

    Fondamenti di precauzioni di sicurezza e regole del regime sanitario ed epidemiologico quando si lavora in un laboratorio diagnostico clinico.

    Norme per il prelievo, la consegna, la ricezione, il trattamento e la registrazione del materiale biologico.

    Ricerca clinica generale di laboratorio.

    Preparazione del paziente per lo studio, la raccolta, la conservazione e l'elaborazione del materiale per analisi generale urina.

    Proprietà fisiche dell'urina: colore, trasparenza, odore, pH, densità relativa dell'urina.

    Proprietà chimiche delle urine, metodi per la determinazione delle proteine ​​totali (metodi qualitativi e quantitativi, metodi di "chimica secca").

    Determinazione del glucosio nelle urine mediante cartina indicatrice e metodo della glucosio ossidasi.

    Regole per la preparazione di un preparato nativo di sedimento urinario.

    Determinazione quantitativa degli elementi del sedimento urinario organizzato.

    Determinazione degli elementi di sedimento non organizzato.

    Tipi di precipitazioni non organizzate.

    Analisi clinica generale del sangue.

    Caratteristiche dei metodi definizioni di VES, concentrazione di emoglobina, conteggio degli eritrociti, indice di colore, leucociti e formula leucocitaria.

    Regole per la preparazione di un paziente, campionamento, conservazione e lavorazione del materiale per un esame del sangue clinico generale.

    Valori normali e limiti delle fluttuazioni fisiologiche del livello di eritrociti e leucociti nel sangue periferico.

    Regole per preparare la preparazione e il conteggio nella camera di Goryaev.

    Metodo per la determinazione dell'emoglobina nel sangue mediante il metodo dell'emoglobina cianidrica.

    Concetto moderno di emopoiesi del midollo osseo.

    Percentuale di leucociti nel sangue periferico. Valore diagnostico formula leucocitaria.

    Studi di laboratorio che caratterizzano il sistema di coagulazione del sangue.

    Il concetto del sistema di coagulazione del sangue.

    emostasi primaria. Metodi di laboratorio per lo studio dell'emostasi primaria.

    Fasi dell'emostasi della coagulazione.

    fibrinolisi.

    sistema anticoagulante.

    Metodi di laboratorio per la valutazione dell'emostasi secondaria.

    Studi di laboratorio che caratterizzano i parametri biochimici del sangue.

    Indicatori di laboratorio che caratterizzano il metabolismo delle proteine. Determinazione delle proteine ​​totali nel siero del sangue con il metodo del biureto.

    Azoto residuo e suoi componenti. Metodi per la determinazione di urea, creatinina, acido urico.

    Metodi per lo studio degli enzimi. Valore clinico e diagnostico della determinazione dell'attività degli enzimi.

    Il ruolo biologico dei carboidrati. Determinazione del contenuto di glucosio mediante metodo enzimatico.

    Lipoproteine ​​plasmatiche. Indicatori di laboratorio del metabolismo lipidico.

    Formazione e metabolismo dei pigmenti biliari. Significato clinico e diagnostico dello studio degli indicatori del metabolismo dei pigmenti.

    Affidabilità analitica e controllo di qualità degli studi clinici di laboratorio.

    Valutazione analitica dei risultati di laboratorio. Tipi di errori, loro caratteristiche.

    Controllo di qualità intralaboratorio. Metodi di monitoraggio della riproducibilità dei risultati della ricerca. Controllo della correttezza dei risultati dello studio.

Clasciando una conclusione di laboratorio analitico.

La conclusione del laboratorio analitico è redatta secondo le condizioni del problema situazionale.

Sulla base della loro analisi dei dati di laboratorio proposti, è necessario rispondere alle seguenti domande:

Il principio alla base del metodo analizzato;

Equipaggiamento necessario;

Regole per la preparazione del materiale di prova e le principali fonti di errori possibili durante l'esecuzione di questo metodo;

Unità;

Il concetto di valori referenziali. Valore clinico e diagnostico del metodo analizzato.

Abilità pratiche:

Organizzazione del posto di lavoro per la ricerca di laboratorio;

Preparazione dei reagenti nella concentrazione richiesta;

Ricevimento, etichettatura e stoccaggio di materiale biologico;

Esecuzione di un esame del sangue generale;

Esecuzione di un'analisi delle urine generale;

Esecuzione di uno studio emostasiologico;

Esecuzione di studi biochimici;

registrazione dei risultati delle ricerche di laboratorio;