DersN19. Spiroketler (treponema, borrelia, leptospira).
Spiroketler, birkaç ila birkaç yüz mikrometre uzunluğunda, hareketli, gram-negatif, kemoorganotroflar olan ince, spiral olarak sarılmış bakterilerdir. Üç ana hareket türü vardır - uzunlamasına eksen etrafında hızlı dönüş, bükülme, tirbuşon (sarmal). Treponema, Borrelia, Leptospira ve Spirillum cinsinin temsilcileri tıbbi öneme sahiptir.
cins Treponema .
Cins, 5–20 µm uzunluğunda, sıkıca bükülmüş spiral şekilli bakterilerle temsil edilir. İnsanlar için patojenik olan en iyi bilinen tür T. pallidum'dur (pallid treponema), T. pallidum pallidum alt türü etkendir frengi.
Patojenik treponemalar, aşağıdakiler için patojenite ile ayırt edilir: Çeşitli türler laboratuvar hayvanları, mannitol fermente etme, laktat kullanma ve spesifik metabolitler oluşturma yeteneği.
"Lues Venerae" - "aşk vebası" - sifilizin (lues) isimlerinden biri.
Morfoloji.
Frengi etken maddesi, aynı yükseklikte (10'dan fazla) bukleler içeren spiral bir şekle sahiptir. Hareketliliğin doğası, pürüzsüz sarmal ve bükülme hareketleridir (Treponema - Latince'den - bir bükme ipliği). Romanovsky'ye göre - Giemsa soluk pembe renkte boyanır (pallidum - lat. - soluk). Karanlık alan mikroskobu ile ve gümüş emprenye edildikten sonra kolayca tanımlanır.
Soluk treponema, yetiştirme koşullarına son derece titizdir ve besin ortamlarında uzun süre büyüyemez. Çok yavaş bir üreme hızına sahiptir. Laboratuvar koşullarında, tavşanlarda yetiştirilebilir ve onları testis içi olarak enfekte edebilir (treponema birikimi olan orşit). Yetiştirme sorunları nedeniyle biyokimyasal özellikler yeterince çalışılmamıştır ve pratikte T.pallidum'u karakterize etmek için kullanılmazlar.
antijenik özellikler.
Treponemaların diğer spiroketlerle (borrelia, leptospira) çapraz reaktif antijenleri vardır. Memeli hücrelerine benzer soluk treponemaların hücre duvarlarında fosfolipidlerin (kardiyolipin vb.) bulunması nedeniyle, vücut bu antijenlere yanıt olarak sadece sifilize neden olan ajan için spesifik değil, aynı zamanda çapraz reaktif de üretir. kardiyolipin ve insan dokularının ve sözde hayvanların diğer fosfolipidleri Wasserman antikorlar. CSC'de kardiyolipin antijeni (hayvan kalplerinden) ile tespit edilirler. Frengi etken maddesine yönelik spesifik antikorlar, RNIF ve immünoblotta tespit edilir.
Wasserman antijeni, mitokondriyal zarların (kardiyolipin) parçası olan bir fosfolipiddir. Mitokondri açısından zengin bir doku olan sığır miyokardından elde edilir. Doku fosfolipidleri ile antijenik benzerlik nedeniyle, treponem kardiyolipin antikorları doku (mitokondriyal) kardiyolipin ile reaksiyona girer. Doku kardiyolipine karşı gerçek otoantikorlar, "antimitokondriyal (antifosfolipid) sendromunda" oluşur ve kollajenozlarda (sistemik lupus eritematozus, romatizmal eklem iltihabı), cüzzam ve diğerleri şiddetli enfeksiyonlar doku hasarı, hemolitik anemi, uyuşturucu bağımlılığı ile ilişkili.
patojenik özellikler.
Frengi gelişimi iki ana mekanizma tarafından belirlenir - genelleştirme eğilimi (yüksek istilacılık) ve vücutta uzun süre devam eden bir patojenin periyodik aktivasyonu ("pusudan çıkma").
Patojenin dış ortamdaki kararsızlığı nedeniyle, enfeksiyon doğrudan temas yoluyla gerçekleşir (vakaların büyük çoğunluğunda cinsel yolla). Mukoza zarlarından ve küçük cilt lezyonlarından nüfuz eden patojen, dokulara hızla nüfuz eder, lenfojen ve ardından hematojen olarak yayılır (genelleştirme).
Hastalığın ilk belirtileri ( birincil sifiliz) bir kuluçka döneminden (ortalama 3 ila 4 hafta) sonra ortaya çıkar. Giriş yerinde (birincil istila), patojen çoğalır ve oluşur. şans- ülsere dönüşen yoğun, ağrısız, kırmızımsı bir nodül. Aynı zamanda treponema'nın lenf bezlerine girmesi sonucu gelişir. bölgesel lenfadenit ve Ötesi - poliadenit. Enfeksiyonun genelleşmesi, şans ve lenfadenitin ortaya çıkmasından önce bile gerçekleşir, yani. frengi en başından beri sistemik bir hastalıktır.
Primer sifiliz kliniği azaldıktan sonra, bir süre sonra (birkaç haftadan birkaç aya kadar), treponemaların çoklu organ replikasyonu ile ilişkili bir enfeksiyon nüksü meydana gelir ( ikincil sifiliz). Deri ve mukoza zarlarının lezyonları (çok sayıda treponema içeren sekonder sifilitler), iç organların lezyonları, lenf düğümleri, kemikler, eklemler ve diğerleri vardır. Lezyonların çeşitliliği göz önüne alındığında, ikincil sifiliz "büyük sahtekar" olarak adlandırılır.
Sekonder sifilizden sonra, bazı hastalarda tekrar gizli sifiliz gelişir (patojen yıllarca yeraltına iner), bu da taşıyıcıların yarısında dönüşebilir. üçüncül frengi. Granülomatöz inflamasyon odaklarının oluşumu ile karakterizedir - sakız az miktarda treponema içerir (neredeyse bulaşıcı değildir). Diş etlerinin çürümesi kemik ve yumuşak dokuların yıkımına ve hayati organların zarar görmesine neden olur. önemli organlar. Birincil ve ikincil sifilizden farklı olarak, üçüncül sifiliz kendi kendine asla sona ermeyen kronik bir süreçtir.
T. pallidum'un patojenite faktörleri ve uzun süre immünolojik sürveyanstan kurtulmasına izin veren mekanizmalar hakkında çok az şey bilinmektedir. Bu patojenin antibiyotiklere karşı yüksek bir duyarlılığı sürdürmesi cesaret vericidir. Modern sifiliz, süreç geri dönüşümsüz organik lezyonlara ulaşmazsa tedaviye hala iyi yanıt verir.
Laboratuvar teşhisi.
Primer ve sekonder sifilizde mikroskopi ile lezyonlarda patojen saptanabilir. Soluk treponema tespiti için daha uygun karanlık alan ve immünolüminesans mikroskopisi. İlk yöntemle, olası artefaktları (örneğin fibrin iplikleri), saprofitik treponemaların varlığını dışlamak gerekir. T. refringens dış genital organları kolonize eder, yüksek hareketlilik ve fleksiyon hareketlerinin olmaması ile karakterizedir. T. diş eti ağız boşluğunu kolonize eder, kıvrımları daha kısadır ve daha keskin bir açıyla yönlendirilir. AT ağız boşluğu insan da bulunur T. vincentii, diğer mikroorganizmalarla birlikte neden olabilir ülseratif nekrotik anjina.
Sifilize neden olan ajana ek olarak, sıcak iklime sahip ülkelerde insan lezyonlarına neden olan genetik ve antijenik olarak çok benzer olan T. pallidum'un diğer alt türlerinin treponemaları vardır ( yaws, bergel, bira bardağı).
Romanovsky - Giemsa'ya göre boyandığında T.pallidum pembe boyanır, patojenik olmayan treponemalar mavi veya mor, T.refringens fuksin ile kırmızı boyanır. Floresan teşhis, çeşitli klinik materyallerde treponemayı tespit etmek için yaygın olarak kullanılmaktadır. Patojeni saptama yöntemleri arasında PCR en yüksek duyarlılığa ve yeterli özgüllüğe sahiptir.
Temel teşhis yöntemleri - serolojik, yani serum antikorlarının tespiti. Kardiyolipin ve treponemal antijen ile RSK, flokülasyon testleri (kardiyolipin antikorları için mikroaglütinasyon testi), RNGA uygulayın. Daha spesifik ve duyarlı testler, indirekt immünofloresan (RIF), soluk treponema immobilizasyon reaksiyonu, rekombinant treponema proteinlerine dayalı ELISA'ya dayalı testlerdir.
Frengi serodiagnozunda, primer sifilizin hastalığın ilk haftalarındaki seronegatifliğinin dikkate alınması gerekir. Hem kardiyolipin hem de treponemal antijenlere karşı antikorların saptanmasına dayanan bir yöntem kombinasyonuna ihtiyaç vardır. Kardiyolipin testleri, patojenin ortadan kaldırılmasından sonra (birkaç ay sonra) hızla seronegatif hale gelir, antitreponemal antikorlar çok daha uzun süre kalır. Sürecin etkinliğini belirlemek için esas olan tanımdır. antitreponemalIgM- antikorlar(konjenital sifiliz tespit edildiğinde, özellikle IgM antikorları anneden fetüse plasentayı geçmediği için; beyin omurilik sıvısı çalışmasında - nörosifiliz tanısı için vb.).
Tedavi.
Daha sıklıkla, hoşgörüsüzlük - makrolidler, tetrasiklinler, sefalosporinler ile uzun süreli etkiye sahip biriken penisilinler kullanılır.
Spesifik bir önleme yoktur.
Morfoloji ve sınıflandırma.
10'a kadar olan sarmal olumsuzluk doğru form büyük bukleler, hareketlerin dönme-öteleme doğasına sahip gram-negatif bakteriler. Anaeroblar, genellikle karmaşık kültür ortamları gerektirir.
İnsanlar için patojenik Borrelia patojenlerdir tekrarlayan ateşler (tekrarlayan ateşler) veya borrelyoz. B. yinelemeler insanlara bitler tarafından bulaşır, salgın veya korkunç tekrarlayan ateşe neden olur. Geri kalan insan borreliyozları iki bağımsız gruba ayrılır - 12'den fazla borrelyoz türünün neden olduğu argas kene kaynaklı borrelyoz (AKB) ve B.burgdorferi sensustricto, B.garinii'nin neden olduğu ixodid kene kaynaklı borrelyoz (IBD). , B.afzelii ve diğerleri.
AKB, Afrika, Asya ve Amerika'nın tropikal ve subtropikal bölgelerinde yaşayan Ornithodorus cinsi argas akarları ile ilişkilidir ve tekrarlayan ateş nöbetleri (sıtmada olduğu gibi) ile karakterize edilir. ITB'ye, esas olarak Avrasya ve Amerika'daki ormanlık bölgede dağıtılan Ixodes cinsi keneler (grup I.ricinus / I.persulcatus) neden olur.
kültürel özellikler.
Bu cinsin temsilcileri, özellikle IKB grubundan Borrelia olmak üzere, yetiştirme koşullarına titiz davranıyorlar. Fakültatif anaerobik koşullar, sıcaklık artı 33 santigrat derece, ortam 199, glikoz, albümin, sistein, tavşan serumu, jelatin ve diğer bileşenleri içeren özel ortam (BSK-2) gerektirirler.
antijenik özellikler.
Diğer spiroketlerle çapraz reaktif antijenlere, cinse ve türe özgü antijenlere sahiptirler. H- (kamçılı) flagellin antijenlerini (özgüllüğü düşüktür) ve yüzey protein antijenlerini (OspA, OspC, daha spesifik, türler arası ve türler arası tanımlama için kullanılır) tahsis edin.
Lezyonların patogenezi.
Keneyi emdikten sonra, tükürük ile Borrelia makroorganizmaya girer, enfeksiyonun giriş kapısında çoğalır, cildi (eritem) ve en yakın lenf düğümlerini (faz) etkiler. birincil adaptasyon). Deri ve lenfatik engellerin üstesinden gelen Borrelia, kan dolaşımına girerek genel bir toksik sendrom (evre) ile kendini gösteren spiroketemiye neden olur. birincil yayma). Süreç ilerledikçe, Borrelia hematodoku bariyerlerini (kan-beyin bariyeri dahil) geçer ve neden olur çeşitli organ ve sistemlerde hasar. Bazı durumlarda, enfeksiyon kronikleşerek sinir ve kardiyovasküler sistemlerde, kas-iskelet sisteminde, ikincil deri lezyonlarında vb. nörolojik belirtilerde hasara neden olur).
epidemiyoloji.
ITB - esas olarak ılıman iklimde dağılan zorunlu bulaşıcı doğal fokal enfeksiyonlar iklim bölgesi kuzey yarım küre, orman peyzaj bölgesi ve Ixodes cinsinin kenelerinin emilmesiyle ilişkilidir. ITB odakları, Avrasya'da aynı vektörlere sahip olduklarından - keneler I. reticulatus (tayga kenesi) ve I. ricinus (Avrupa orman kenesi) olduğundan, genellikle kene kaynaklı ensefalit odaklarıyla ilişkilendirilir.
Laboratuvar teşhisi.
Borrelia BSK2 ortamı kullanılarak hastalarda cilt lezyonlarının odaklarından, kandan ve beyin omurilik sıvısından (meningeal formlarda), taşıyıcılar (insanlardan alınanlar dahil) ve sıcakkanlı konakçılar (en yüksek aşılama oranı) çalışmalarında izole edilebilir. mesaneden) doğal odaklarda.
Borrelia bulunabilir ixodid kenelerışık mikroskobu (Romanovsky-Giemsa lekesi), karanlık alan ve lüminesan mikroskopi, PCR kullanılarak.
Serolojik tanılamanın ana yöntemi, IKB grubundan Borrelia'ya karşı antikorların tespit edilmesini mümkün kılan B.afzelii'nin korpüsküler antijeni ile dolaylı immünofloresan (RNIF) reaksiyonudur.
Tedavi.
Önleyici tedavi (emilen kene çalışmasının olumlu sonuçları ile) ve ITB'li hastaların tetrasiklinler, penisilinler ve sefalosporinler ile tedavisini uygulayın. Spesifik önleyici tedbirler geliştirilmemiştir.
cins Leptospira
Morfoloji.
Kültürel ve biyokimyasal özellikler.
Kemoorganotroflar, aeroblar. Leptospira tipik hidrofillerdir, nemli yüzeylerde, suda ve nemli toprakta uzun süre kalırlar. Optimum sıcaklık artı 28 ila 30 santigrat derece, pH 7.2 - 7.4'tür. Esas olarak tavşan kanı serumu (Tersky ortamı) ilavesiyle sıvı besiyerinde yetiştirilir.
antijenik özellikler.
Antijenik özelliklere dayalı olarak patojenik leptospira, serogruplara ve serovarlara ayrılır.
Ekolojik - epidemiyolojik özellikler.
Enfeksiyonun ana rezervuarları şunlardır: vahşi hayvanlar, esas olarak kemirgenler ve böcek yiyiciler (doğal odaklar, genellikle suya yakın habitatlarla ilişkilendirilir) ve ayrıca çiftlik ve evcil hayvanlar(domuzlar, sığırlar, köpekler). Hayvanlarda leptospira böbreklerde uzun süre kalır ve uzun süre idrarla dış ortama atılır. Bir kişi, doğal odaklarda (daha sık olarak tarımsal çalışma sırasında) ve ev odaklarında (daha sıklıkla banyo salgınları veya profesyonel olarak neden olunan leptospiroz vakaları) enfekte olur. Gri sıçanlar ve köpekler enfeksiyonda önemli bir rol oynar. Belirli serovar leptospires ile belirli hayvan türleri (örneğin, L.canicola - köpekler) arasında bağlantılar vardır.
Lezyonların patogenezi.
Leptospira vücuda mukoza zarlarından veya cilt hasarından (mikrotravma) girer. Patojenik leptospira, aktif hareketlilik nedeniyle koruyucu engelleri aşar, kana nüfuz eder (leptospiremi) ve başta böbrekler ve karaciğer olmak üzere çeşitli organlara girer. Özellikle önemli olanlar kılcal endotel lezyonları hemorajik sendroma kadar çeşitli şiddette kanamalar ile, karaciğer hasarı hepatosit hasarı ve kırmızı kan hücrelerinin hemolizi ile ilişkili sarılık gelişimi ile, böbrek hasarı,öncelikle böbrek tübüllerinin epiteli, kortikal ve subkortikal madde böbrek yetmezliği gelişimi ile (anüri, üremi), meningeal belirtiler.
Laboratuvar teşhisi.
Mikroskobik teşhisin ana yöntemi karanlık alan mikroskopidir.
Patojenin izolasyonu, altın hamsterler üzerinde biyoanaliz olan Tersky ortamındaki mahsuller tarafından gerçekleştirilir. İdrar, kan, beyin omurilik sıvısı, böbreğin kortikal tabakasını inceleyin.
Serolojik teşhisin ana yöntemi, ana serogrupların bir dizi Leptospira kültürü ile aglütinasyon-lizis reaksiyonudur (RAL). Yöntem spesifiktir, ancak zaman alıcıdır, çünkü tanısal bir leptospir seti sürdürmek, çalışılan serumları tüm ana serogrupların leptospireleri ile aglütine etmek ve ardından karanlık alan mikroskobu yapmak gerekir. Olumlu bir sonuçla, örümcek veya top şeklinde yapışan leptospira, ardından lizis görülür. Günümüzde ELISA ayrıca serodiagnoz için de kullanılmaktadır.
Tedavi.
Antibiyotikler (penisilinler, tetrasiklinler) kullanılır.
frengi
bulaşıcı cinsel hastalık, aranan Treponema pallidum ciltte, iç organlarda, kemiklerde hasar ile karakterizedir, gergin sistem. Edinilmiş ve doğuştan sifiliz vardır.
Frengi. Taksonomi.
Soluk treponema aileye aittir. Spirochaetaceae, Bölüm gracilicutes.
Frengi. Morfoloji.
Düşük renk yeteneği. 4-14 mikron uzunluğunda, tek tip küçük buklelere sahip, spiral şekilli ince bir bakteri son derece hareketlidir. Romanovsky-Giemsa'ya göre zayıf boyandı pembe renk.
Frengi. Yetiştirme
Zorunlu anaerob, özel olarak zayıf gelişir. çukur ortamları.
Frengi. Antijenik yapı.
Hayvan ve insan dokularının lipoidlerinin yanı sıra diğer triponemlerle antijenik bağlarla karakterize edilir. Kedilerden biri olan patojende birkaç AG bulundu. Lipoid AG - sığır kalbi lipoid özütünün aynısıdır.
Frengi. direnç.
zayıf dirençli çevre, 55'te 15 dakika içinde ölür, kurumaya, ışığa, cıva tuzlarına, bizmut, arsenik, penisiline duyarlıdır. Kuruyana kadar ev eşyalarının üzerinde kalır, bir cesedin dokusunda iyi korunur.
Frengi. epidemiyoloji.
Enfeksiyonun kaynağı hasta bir kişidir. Enfeksiyon cinsel yolla, nadiren ev eşyaları yoluyla bulaşır, enfeksiyon öpüşme, emziren anne sütü ve kan nakli yoluyla mümkündür.
Frengi. Patogenez ve klinik.
Vücuda deri veya mukoza zarlarından nüfuz eder, organlara ve dokulara yayılarak bunların zarar görmesine neden olur. Kuluçka süresi 3-4 haftadır. Kuluçka döneminden sonra birincil, ikincil ve üçüncül dönemler şeklinde döngüsel olarak ilerler.
Giriş bölgesinde (cinsel organlarda, dudakta), birincil bir lezyon belirir - sert bir şans - yüzeyde ülserli bir mühür.
İkincil dönem 3-4 yıl sürer, döküntü ile karakterizedir, bozulmuş Genel durum organizma.
Üçüncül dönem - ciltte hasar, mukoza zarları, iç organlar, kemikler, sinir sistemi, çürümeye yatkın oluşumlar, tezahürler ortaya çıkar.
Frengi. Bağışıklık.
Steril olmayan gelişir, tedaviden sonra devam etmez, tekrarlayan hastalıklar mümkündür.
Frengi. Laboratuvar teşhisi.
Karanlık alan mikroskobu kullanılır. 1. ve 2. periyotların sonunda Wasserman serolojik nehirleri ve tortul Kahn reaksiyonları kurulur. Kitle muayenelerinde cam üzerinde damla kan ile mikroreaksiyon ve özel AG kullanılmaktadır. Ayrıca immobilizasyonu kullanın.
Frengi. Tedavi.
Penisilin antibiyotikleri ve bizmut, iyot müstahzarları.
Frengi. Önleme.
Belirli bir tane yok. Spesifik olmayan: hijyen kurallarına uyulması, cinsel ilişki sırasında korunma, genel nitelikte bir dizi sıhhi ve hijyenik önlem.
makalenin içeriği
Soluk treponema
Morfoloji ve fizyoloji
T.pallidum spiral bir şekle, 8-12 tur halinde bükülmüş protoplastik bir silindire sahiptir. 3 periplazmik kamçı hücrenin uçlarından uzanır. Soluk treponema, anilin boyalarını iyi algılamaz, bu nedenle Romanovsky-Giemsa boyası ile boyanır. Bununla birlikte, en etkili yöntem, onu karanlık alan veya faz kontrast mikroskobunda incelemektir. Mikroaerofil. Yapay besin ortamlarında gelişmez. T. pallidum, iyi çoğaldığı ve özelliklerini tamamen koruduğu ve hayvanda orşite neden olduğu tavşan testis dokusunda yetiştirilir. antijenler. T. pallidum'un antijenik yapısı karmaşıktır. Dış zar proteinleri, lipoproteinler ile ilişkilidir. İkincisi, insanlarda ve sığırlarda yaygın olan çapraz reaktif antijenlerdir. Frengi serodiagnozu için Wassermann testinde antijen olarak kullanılırlar.Patojenite ve patogenez
Treponema pallidum virülans faktörleri, toksik özelliklerini hücreden salındıktan sonra sergileyen dış zar proteinlerini ve LPS'yi içerir. Aynı zamanda, görünüşe göre, treponema'nın bölünme sırasında dokuların derinliklerine nüfuz ederek ayrı parçalar oluşturma yeteneği de virülans faktörlerine bağlanabilir. Frengi patogenezinde üç aşama vardır. Birincil sifilizde, birincil bir odak oluşumu gözlenir - enfeksiyonun giriş kapısı bölgesinde sert bir şans, daha sonra patojenin çoğaldığı ve biriktiği bölgesel lenf düğümlerine nüfuz etme. Birincil sifiliz yaklaşık 6 hafta sürer. İkinci aşama, patojenin kana nüfuz etmesi ve dolaşımının eşlik ettiği enfeksiyonun genelleşmesi ile karakterize edilir. Deri döküntüleri. Tedavi edilmeyen hastalarda sekonder sifilizin süresi 1-2 yıl arasında değişmektedir. Üçüncü aşamada, iç organlarda ve dokularda lokalize olan enfeksiyöz granülomlar (çürümeye yatkın diş etleri) bulunur. Tedavi edilmeyen hastalarda bu dönem birkaç yıl sürer ve merkezi sinir sisteminde hasar (ilerleyici felç) veya omurilik(sırt püskülü).dokunulmazlık
Frengi ile hümoral ve hücresel bir bağışıklık tepkisi vardır. Ortaya çıkan antikorların koruyucu özellikleri yoktur. Hücresel bağışıklık tepkisi, patojenin sabitlenmesi ve granülomların oluşumu ile ilişkilidir. Bununla birlikte, treponemanın vücuttan atılması gerçekleşmez. Aynı zamanda, olumsuz çevre koşulları, duvarda lokalize olan treponemalar ile kistlerin oluşumuna neden olur. kan damarları. Bunun, hastalığın remisyon aşamasına geçişini gösterdiğine inanılmaktadır. Kistlerle birlikte treponemalar L-şekilleri oluşturur. Frengi ile, öldürülmüş treponema süspansiyonu ile cilt alerjisi testi ile tespit edilebilen HRT oluşur. Üçüncül sifiliz döneminin tezahürünün HRT ile ilişkili olduğuna inanılmaktadır.Ekoloji ve epidemiyoloji
Frengi tipik bir antroponotik enfeksiyondur. Sadece doğada enfeksiyon rezervuarı olan insanlar hastalanır. Enfeksiyonun bulaşması cinsel yolla ve çok daha az sıklıkla - iç çamaşırı ve diğer nesneler yoluyla gerçekleşir. İçinde dış ortam(hava) treponema hızla ölür.Frengi ve diğer treponematozlar
Frengi, bir kişinin kronik enfeksiyöz zührevi bir hastalığıdır, döngüsel ilerleyici bir seyri vardır, cildi, mukoza zarlarını etkiler, iç organlar ve sinir sistemi. Hastalığın etken maddesi Treponema pallidum'dur Frengi gelişiminde üç ana dönem vardır, yöntemler laboratuvar teşhisi kendi özelliklerine sahip olan. AT erken periyot hastalığı, laboratuvar teşhisi için materyal, sert bir şanstan izolasyondur, noktalı Lenf düğümleri, roseol ile kazıma, frengi benzeri. İkincil ile ve üçüncül dönemler kan serumu ve beyin omurilik sıvısını inceleyin.Sıradan saf treponema kültürlerinin izolasyonu nedeniyle bakteriyolojik laboratuvarlar imkansız, hastalığın birincil döneminde (nadiren daha sonra), bakteriyoskopik bir teşhis yöntemi gerçekleştirilir. Sekonder dönemden itibaren ağırlıklı olarak serolojik yöntemler kullanılmaktadır.Bakteriyoskopik araştırma
Patolojik materyali almadan önce, yağlı plak ve kontamine mikroflorayı çıkarmak için önce sifilitik ülseri pamuklu çubukla silin. Daha sonra sert şansın tabanı bir neşter veya metal bir spatula ile tahriş edilir veya yara eksüdasını çıkarmak için lastik bir eldiven içinde parmaklarla ülser yanlardan kuvvetlice sıkılır. küçük bir miktar ile temiz sıvı%0,85'lik bir sodyum klorür çözeltisi damlasına eklenebilir. Şansın dibinden materyal almak mümkün değilse (fimozis, ülserin skarlaşması vb.), bölgesel lenf düğümleri karanlık görüş alanı (daha iyi!) veya faz-kontrast veya anoptral mikroskop kullanılarak delinir. Karanlık görüş alanındaki soluk treponema, dik düzgün yuvarlak birincil bukleler ile hafif parlak, ince, narin bir spiral gibi görünür. Hareketler pürüzsüzdür, bu nedenle açılı olarak bükülür. Ancak, özellikle onun özelliği olan sarkaç benzeri salınımlar. Frengiye neden olan ajan, daha kalın, daha pürüzlü, düzensiz büyük bukleleri olan ve aktif düzensiz hareketleri olan ancak bükülmeyen Treponema refringens'ten (dış genital bölgeyi kolonize eden) ayırt edilmelidir. Fusosp-irochetous simbiyoz treponemaları ince bir model, yumuşak kıvrımlar ve düzensiz hareket ile ayırt edilir.Oral sifiliz teşhisi konulurken, soluk treponema da dental treponemalardan, özellikle T. dentium'dan ve ayrıca T. buccalis'ten ayırt edilmelidir. Bunlardan birincisini sifilitikten ayırt etmek genellikle zordur. Doğru, daha kısa, 4-8 keskin buklesi var, sarkaç hareketi yok. T. buccalis daha kalındır, kaba ilk buklelere ve düzensiz harekete sahiptir Herhangi bir şüphe durumunda, soluk olanların aksine tüm saprofitik treponemaların anilin boyalarla iyi lekelendiği akılda tutulmalıdır. Lenf düğümlerine nüfuz etmezler, bu nedenle delinmelerin incelenmesi büyük bir tanısal değere sahiptir. Lenf düğümlerinin noktalarında tipik treponemaların saptanması, sifiliz tanısını sorgusuz sualsiz doğrular. Avantajları, malzemenin hızlı bir şekilde incelenebilmesi ve canlı durumdaki treponemaların morfolojisinin en karakteristik olmasıdır. Burri yöntemine göre mürekkep lekeleri artık kullanılmamaktadır. çeşitli metodlar boyama Soluk treponema, anilin boyalarını iyi algılamaz. Önerilen birçok renklendirme yönteminden En iyi skorlar Romanovkim-Giemsa boyası kullanılarak elde edildi. Yapılan smear'lar metil alkol veya Nikiforov'un karışımı ile sabitlenir. Preparata Romanovsky-Giemsa boyası döküldüğünde berrak sonuçlar elde edilir. Bunu yapmak için, kibrit parçaları bir Petri kabına konur, üzerlerine lekeli bir slayt yerleştirilir ve lekeyi ıslatana kadar boya dökülür. Boyama süresi iki katına çıkar. Mikroskop altında soluk treponemalar soluk pembe bir renge sahipken, diğer treponema türleri maviye veya mavi-mora döner Morozov'un gümüşleme yöntemi de kullanılabilir. Treponemalar morfolojik özelliklerini tamamen korurlar ve mikroskop altında kahverengi veya neredeyse siyah görünürler. Ancak gümüş kaplama müstahzarları uzun süre saklanmaz. AT son zamanlar treponema boyama yöntemleri nadiren kullanılır Frengi kemoterapi ilaçları ile tedavi edilirse, karanlık bir görüş alanı yardımıyla bile patolojik materyallerde patojeni tanımlamak neredeyse imkansızdır. alındıktan sonra negatif analiz tekrarlanması gerekiyor.Sifilizin serolojik tanısı
Serolojik reaksiyonlar yürütülürken, şu anda Ukrayna'da birleştirilmiş aşağıdaki araştırma yöntemleri kullanılmaktadır: kompleman fiksasyon reaksiyonu (RCC), immünofloresan (RIF), treponema immobilizasyonu (PIT), çökeltme mikroreaksiyonu (MPR) ve enzim immünolojik testi (ELISA). ana ve en yaygın reaksiyon, tamamlayıcı sabitleme reaksiyonu veya Wasserman reaksiyonu (РВ, RW) olarak kabul edildi. Ayarı için sifilizli bir hastanın kan serumu ve sinir sistemine zarar gelmesi durumunda beyin omurilik sıvısı kullanılır Wasserman reaksiyonunu ayarlama yöntemi, RSC yürütme tekniğinden farklı değildir. Tek fark, RO için sadece spesifik bir treponemal değil, spesifik olmayan bir kardiyolipin antijeninin kullanılmasıdır.Kubital venden aç karnına veya yemekten en geç 6 saat sonra 5-10 ml kan alınır. olan hastalardan kan almayınız. yükselmiş sıcaklık, alkollü ve yağlı yiyecekler içtikten sonra, hamilelerde doğumdan 10 gün önce ve doğum yapan kadınlarda. Kandan ekstrakte edilen serum kendi komplemanını inaktive etmek için 56°C sıcaklıkta 30 dakika ısıtılır. RO zorunlu olarak iki antijenle ayarlanır: spesifik ve spesifik olmayan Spesifik ultrason treponemal antijeni, test tüplerinde büyütülen ve ultrasona maruz bırakılan soluk treponema (Reiter suşu) kültürlerinden hazırlanır. Dondurularak kurutulmuş toz halinde üretilir. Spesifik olmayan kardiyolipin antijeni, bir sığır kalbinden lipitlerin alkol ekstraksiyonu ve 2 ml'lik ampullerde paketlenmiş balast karışımlarından saflaştırılmasıyla hazırlanır. Antijeni RO'ya sokmak için bu talimatlara göre titre edilir. RV'yi kurmadan hemen önce, kompleman titrasyonu ve hemolitik serum, RSK'deki ile aynı şemaya göre gerçekleştirilir. Wasserman reaksiyonu hem niteliksel hem de niceliksel olarak ortaya konur. Olağan şemaya göre iki antijen içeren üç test tüpünde kalitatif bir reaksiyon gerçekleştirilir.Reaksiyon sonuçları 4 artı bir sisteme göre değerlendirilir: pozitif reaksiyon - hemolizde tam veya önemli bir gecikme olduğunda (4 +, 3) +); zayıf pozitif reaksiyon - hemolizin kısmi gecikmesi (2 +); şüpheli reaksiyon - hemolizde hafif bir gecikme (1 +). Tam hemoliz durumunda RO negatif kabul edilir.Pozitif kalitatif reaksiyon veren her serum ayrıca 1:10'dan 1:640'a kadar sıralı dilüsyonu ile kantitatif bir yöntemle araştırılmalıdır.tam (4+) veya rozet olarak gelir (3+) hemoliz gecikmesi. RO ayarının kantitatif yöntemi, önem Frengi tedavisinin etkinliğini değerlendirmek için. Reagin titresinde hızlı bir düşüş, başarılı bir tedaviyi gösterir. Serum titresi uzun süre düşmezse, bu, kullanılan ilaçların etkinliğinin bulunmadığını ve tedavi taktiklerinin değiştirilmesi gerektiğini gösterir.Seronegatif primer sifiliz için pilori veya gizli, üçüncül veya konjenital, konması önerilir. aynı şemaya göre soğukta Wasserman reaksiyonu. Nörosifilizden şüphelenilmesi durumunda RO yapılır. Beyin omurilik sıvısı, kendi tamamlayıcısını içermediği için devre dışı bırakılır. Seyreltilmemiş beyin omurilik sıvısı reaksiyona 1:2 ve 1:5 dilüsyonlarında verilir.Wasserman reaksiyonu, sert bir şansın ortaya çıkmasından 2-3 hafta sonra pozitifleşir. Sekonder sifilizde, vakaların% 100'ünde, üçüncül -% 75'inde pozitiftir.Ayrıca, serolojik reaksiyonlar kompleksinde (CSR), tarama testi olarak kan plazması veya inaktive serum ile mikro çökeltme reaksiyonu kullanılır.Yağış mikroreaksiyonu
Kardiyolipin antijeni ile çökeltme mikro reaksiyonu. Reaksiyonun prensibi, sifilizli bir hastanın kan plazmasına veya serumuna bir kardiyolipin antijen emülsiyonu eklendiğinde, pul şeklinde çökelen bir çökelti (antijen-antikor kompleksi) oluşmasıdır. Beyaz renk. Bu tekniği kullanırlar: üç damla plazma (veya inaktive edilmiş serum) plakanın kuyusuna pipetlenir, ardından bir damla standart kardiyolipin antijeninin emülsiyonu eklenir. Reaksiyon bileşenleri, plakayı 5 dakika çalkalayarak karıştırılır, ardından üç damla %0.9'luk sodyum klorür çözeltisi eklenir ve 5 dakika daha oda sıcaklığında bırakılır. Zayıf pozitif kan serumu ile zorunlu kontrol. Sonuçlar yapay bir ışık kaynağı üzerinden çıplak gözle değerlendirilir. Kuyuda büyük pullar göründüğünde, reaksiyon pozitif (4 +, 3 +), orta ve küçük - zayıf pozitif (2 +, 1 +) olarak kabul edilir. -de olumsuz sonuçÇökelti oluşmaz Çökeltme mikroreaksiyonu, çökelen antikorların titresini belirlemek ve bu temelde tedavinin etkinliğini değerlendirmek için kantitatif bir yöntemle de gerçekleştirilebilir. Plazma ile serumdan daha yüksek MRP titreleri elde edilir. Yurt dışında, hasta serumu ile MRP'nin bir analoğu VDRL'dir (Zührevi hastalık araştırma laboratuvarı) ve plazma - RPR'dir (Hızlı plazma reaktifi).İmmünofloresan reaksiyonu (RIF)
Sifilizin serolojik tanısında yaygın olarak kullanılan spesifik reaksiyonlar grubu, dolaylı bir immünofloresan reaksiyonunu içerir. Bir antijen olarak, enfeksiyondan sonraki 7. günde tavşan testislerinin parankiminden Nichols suşunun patojenik soluk treponema süspansiyonunu kullanır. Reaksiyon iki modifikasyona tabi tutulur: RIF-ABS ve RIF-200. İlk varyantta, bir antikor sorbent (sonicat) kullanılır - CSC için bir ultrasonik treponemal antijen. Kaunas şirketi tarafından bakteri preparatlarının üretimi için üretilmiştir (Litvanya). RIF-200 seçeneği ile, grup antitreponemal antikorların etkisini ortadan kaldırmak için hastanın serumu 200 kat seyreltilir.RIF-ABS, yağı iyice alınmış ince cam lamlar üzerine kurulur. Cam kesici ile camların arka tarafında 0,7 cm çapında 10 daire işaretlenir Daire içinde cama bir antijen - soluk treponema süspansiyonu - 50- olacak şekilde uygulanır. 60 tanesi görüş alanında. Lekeler havada kurutulur, alev üzerinde sabitlenir ve 10 dakika aseton içinde tutulur. Ayrı bir tüpe 0,2 ml sorbent (sonikat) ve 0,5 ml hasta kan serumu ekleyin, iyice karıştırın. Karışım, eşit şekilde kaplayacak şekilde bir lekeye (antijen) uygulanır, 3-7 ° C'de nemli bir odada 30 dakika inkübe edilir (reaksiyonun II. fazı). Daha sonra smear fosfat tamponu ile yıkanır, kurutulur ve üzerine antishobulin fluoresan serum sürülerek 30 dakika 37°C nemli odaya alınır (Faz II). Preparat tekrar fosfat tamponu ile yıkanır, kurutulur ve floresan mikroskop altında incelenir. olumlu tepki soluk treponemalar altın yeşili bir ışık yayarlar, negatif olanla parlamazlar RIF-200'ü ayarlama tekniği RIF-ABS ile aynıdır, sadece hastanın kan serumu önceden fosfat tamponu ile 200 kez seyreltilir. Sinir sistemi sifilizli bir hastanın beyin omurilik sıvısı ile bir immünofloresan reaksiyonu yürütürken, RIF-c ve RIF-10 kullanılır, yani. likör reaksiyona inaktive edilmemiş ve seyreltilmiş veya 1:10 oranında seyreltilmiş olarak dahil edilir.Treponema pallidum immobilizasyon testi (PIT)
Soluk treponemaların immobilizasyon reaksiyonu (PIT), anaerobiyoz koşulları altında hasta serumunun ve tamamlayıcısının immobilize edici antitreponemal antikorlarının varlığında hareketliliklerinin kaybı olgusuna dayanır. Reaksiyonda bir antijen olarak, bir laboratuvar Nichols suşu ile enfekte olmuş bir tavşanın testis dokusundan soluk treponema süspansiyonu kullanılır. Süspansiyon, görüş alanında 10-15 spiroket olacak şekilde %0,85'lik steril sodyum klorür çözeltisi ile seyreltilir.Reaksiyonu gerçekleştirmek için 0,05 ml hasta kan serumu, 0,35 ml antijen ve 0,15 ml kompleman kullanılır. steril bir test tüpünde karıştırıldı. Deneyime serum, antijen ve kompleman kontrolleri eşlik eder. Tüpler anaerostat içine yerleştirilir, anaerobik koşullar oluşturulur ve 35 °C sıcaklıkta 18-20 saat termostatta tutulur. Daha sonra her tüpten basınç damlaları hazırlanır, en az 25 treponema sayılır ve kaç tane onlar hareketli ve kaç tanesi hareketsiz. Soluk treponemaların spesifik immobilizasyon yüzdesi, aşağıdaki formülle hesaplanır: x = (AB) / B * 100, burada X, immobilizasyon yüzdesidir, A, kontrol tüpündeki mobil treponema sayısıdır, B, mobil sayısıdır test tüpünde treponemalar. Reaksiyon, immobilizasyon yüzdesi 50 veya daha fazla, zayıf pozitif - 30'dan 50'ye, şüpheli - 20'den 30'a ve negatif - 0'dan 20'ye olduğunda pozitif olarak kabul edilir. Ovchinnikov. Deneyin anaerobik koşulları, reaksiyona giren karışımın (serum, antijen, kompleman) her iki ucu lastik halka ile kapatılmış melanjörlere yerleştirilmesiyle oluşturulur. Melangerin tekniği, anaerobiyoz oluşturmak için karmaşık ekipman ve aparatlardan vazgeçmeyi mümkün kılar, ancak klasik mikroaneurostatik teknik için mevcut olmayan sonuçlar verir Treponema immobilizasyon ve immünofloresan reaksiyonları, sifilizin serolojik tanısında en spesifik olarak kabul edilir. Yine de, PIT, özgüllüğüne rağmen, kurulumun karmaşıklığından dolayı geniş pratikte kullanılması önerilmez.Enzim immunoassay (ELISA)
Frengi tanısını doğrulayan hem kadriolipin antijeni (spesifik olmayan, tarama reaksiyonu) hem de treponemal (spesifik reaksiyon) ile enzim bağlantılı immünosorbent testi (ELISA) gerçekleştirilir. Prensip dolaylı yöntem ELISA, test serumunun, tabletin oyuklarında katı faz üzerinde adsorbe edilmiş antijene eklenmesi gerçeğinden oluşur. Treponemaya karşı antikorlar içeriyorsa, bir antijen-antikor kompleksi oluşur (faz II). Bağlanmayan spesifik olmayan antikorların yıkanmasından sonra, kuyucuklara bir enzimle (çoğunlukla yaban turpu peroksidazıyla) konjüge edilmiş antiglobulin serumu eklenir. Konjugat, antijen-antikor kompleksine sıkıca bağlanır (faz II) Bağlanmamış konjugat yıkandıktan sonra, OFD boyama substratı - ortofenilendiamin (faz III) kuyucuklara eklenir. Peroksidaz reaksiyonu sülfürik asit eklenerek durdurulur. Kontrol için, aynı numuneleri pozitif ve açıkça negatif serumlarla koyarlar Analiz sonuçlarının muhasebesi, iki dalga modunda (492 nm ve 620 nm) optik yoğunluğu belirleyen bir fotometre kullanılarak gerçekleştirilir. Bir fotometreye ek olarak, bir enzim antikor reaksiyonu oluşturmak için polipropilen uçlu bir ve sekiz kanallı otomatik pipetler ve uygun tanısal test sistemleri setleri gereklidir.ELISA yöntemi, sifilizin serolojik tanısında yaygın olarak kullanılmaktadır. Hastalıkları tespit etmede eşit derecede etkilidir. kuluçka süresi(enfeksiyondan 1-2 hafta sonra), hastalığın klinik belirtileri ve gizli formları ile. ELISA, özellikle kan transfüzyon istasyonlarında, popülasyonun tarama incelemelerinde sıklıkla kullanılır.Laboratuvar pratiğinde bazen immün adezyon reaksiyonu (RIP) ve indirekt hemaglütinasyon reaksiyonu (RNHA) da kullanılır. Bunlardan ilki, Nichols suşunun patojenik testiküler treponemalarının, kompleman ve insan eritrositleri varlığında hasta serumu ile karıştırıldığında kırmızı kan hücrelerinin yüzeyine yapışması gerçeğine dayanmaktadır. RNHA, metodolojik basitliği nedeniyle sifiliz teşhisinde yaygın olarak kullanılmaktadır. Enfeksiyondan üç hafta sonra pozitifleşir. Olumlu sonuç reaksiyonlar iyileşmeden sonra yıllarca kalır. Bu reaksiyonun yurtdışındaki bir benzeri TRHA'dır (Treponema pallidum haemoaglütinasyon).Treponema paladyumu; T. bağırsak
Morfoloji: 8-12 bobinli tipik treponemalar, motor aparatı - hücrenin her kutbunda 3 periplazmik flagella. Romanovsky-Giemsa'ya göre gram lekesi algılanmıyor - hafif pembe, gümüş emprenye edilerek tespit ediliyor.
kültürel özellikler: evcil hayvan üzerinde öldürücü tür. besiyeri üremez, tavşanın testislerine bulaşarak kültür birikimi oluşur. Virülan suşlar, beyin ve böbrek dokusu içeren ortamlarda yetiştirilir.
Biyokimyasal özellikler : mikroaerofil
antijenik yapı: tuzlu, spesifik protein ve lipoid antijenlere sahiptir, ikincisi, sığır kalbinden ekstrakte edilen kardiyolipin (difosfadilgliserin) ile aynı bileşime sahiptir.
Patojenite faktörleri: adezinler bağlanma sürecinde yer alır, lipoproteinler immünopatolojik süreçlerin gelişiminde yer alır.
direnç: kurumaya, güneş ışığına karşı hassastır, kuruyana kadar nesnelerin üzerinde kalır. Olumsuz koşullarda L formuna geçerek kistleri oluşturur.
patogenez: Frengi diyorlar. Treponemalar, giriş kapısının bulunduğu yerden, çoğaldıkları bölgesel lenf düğümlerine girerler. Ayrıca T. kan dolaşımına girerek endoteliyositlere yapışarak endarterite neden olarak vaskülite ve doku nekrozuna yol açar. Kanla birlikte T. vücuda yayılır, organları tohumlar: karaciğer, böbrekler, kemik, kardiyovasküler ve sinir sistemleri.
Bağışıklık: koruyucu bağışıklık gelişmemiştir. Patojen antijenlere yanıt olarak, HRT ve otoimmün süreçler gelişir. Hümoral bağışıklık, T.'nin lipid antijenine karşı üretilir ve bir IgA ve IgM titresidir.
mikroskobik muayene. Sert bir şansın ortaya çıkması sırasında birincil sifiliz ile gerçekleştirilir. Araştırma malzemesi: karanlık bir alanda "ezilmiş" bir damla preparasyonunun hazırlandığı ve incelendiği bölgesel lenf düğümlerinin içerikleri. Olumlu bir sonuçla, 6-14 mikron uzunluğunda, doğru şekle sahip 10-12 tek tip küçük bukleye sahip ince bükülmüş iplikler görünür. Soluk treponema, sarkaç benzeri ve öne doğru esneme hareketleriyle karakterizedir. Sekonder sifiliz ile ağız mukozasında lezyonların gelişmesi ve ayrıca ağız boşluğunda sert bir şansın lokalizasyonu ile, soluk treponemayı normal mikrofloranın temsilcileri olan saprofitik treponemalardan ayırmak gerekir. Bu durumda belirleyici olan teşhis değeri bölgesel lenf düğümlerinin punktatında tipik treponema tespitine sahiptir.
Serodiagnostik. Wasserman reaksiyonu, 2 antijenle aynı anda ayarlanır: 1) spesifik, patojen antijeni içeren - ultrasonla yok edilen treponema; 2) spesifik olmayan - kardiyolipin. İncelenen serum 1:5 oranında seyreltilir ve genel kabul görmüş yönteme göre RSK yerleştirilir. Pozitif bir reaksiyon ile hemolizde bir gecikme gözlenir, negatif bir reaksiyon ile eritrositlerin hemolizi meydana gelir; reaksiyonun yoğunluğu buna göre (+ + + +) ila (-) arasında tahmin edilir. Frenginin ilk dönemi seronegatiftir ve negatif bir Wasserman reaksiyonu ile karakterizedir. Hastaların% 50'sinde reaksiyon, sert bir şansın ortaya çıkmasından en geç 2-3 hafta sonra pozitif hale gelir. Frenginin ikinci ve üçüncü dönemlerinde pozitif reaksiyonların sıklığı %75-90'a ulaşır. Tedavi sürecinden sonra Wasserman reaksiyonu negatif olur. Wasserman reaksiyonuna paralel olarak, spesifik olmayan bir kardiyolipin antijeni ve incelenen inaktive kan serumu veya plazma ile bir mikro çökeltme reaksiyonu gerçekleştirilir. Pleksiglas plaka (veya normal cam) üzerindeki kuyucuğa 3 damla serum damlatılır ve 1 damla kardiyolipin antijeni eklenir. Karışım iyice karıştırılır ve sonuçlar dikkate alınır. Sifilizli bir hastanın kan serumu ile pozitif reaksiyon, pul oluşumu ve kaybı ile karakterize edilir. farklı boyutlar; negatif bir sonuçla, tekdüze ışık opaklığı gözlenir.
RIF - dolaylı immünofloresan reaksiyonu - sifiliz tanısında spesifiktir. Antijen olarak bir doku treponema süspansiyonu kullanılır. RIF_200 reaksiyonu kullanılır. Hastanın serumu, Wassermann reaksiyonunda olduğu gibi inaktive edilir ve 1:200 oranında seyreltilir. Antijen damlaları cam slaytlara uygulanır, kurutulur ve 5 dakika aseton içinde sabitlenir. Daha sonra hastanın serumu ilaca sürülür, 30 dakika sonra yıkanır ve kurutulur. Bir sonraki adım, preparasyonun insan globülinlerine karşı floresan serumla işlenmesidir. Preparasyonu bir flüoresan mikroskobu kullanarak inceleyin ve treponema lüminesans derecesini not edin.
Treponema immobilizasyonunun RIT reaksiyonu da spesifiktir. Canlı bir treponema kültürü, bir tavşan testisinde kültivasyon yoluyla elde edilir. Testis, treponemaların hareketli kaldığı özel bir ortamda ezilir. Reaksiyon şu şekilde kurulur: doku (hareketli) treponema süspansiyonu test serumu ile bir test tüpünde birleştirilir ve taze kompleman eklenir. Test serumu yerine bir kontrol tüpüne serum eklenir. sağlıklı kişi, bir başkasında - taze bir tamamlayıcı yerine, etkisizleştirilmiş - aktif olmayan bir tamamlayıcı eklenir. Anaerobik koşullarda (anaerostat) 35 °C'de bekletildikten sonra, tüm test tüplerinden “ezilmiş” bir damla preparatı hazırlanır ve karanlık bir alanda hareketli ve hareketsiz treponema sayısı belirlenir.
Tedavi: Penisilinler, tetrasiklinler, bizmut içeren ilaçlar.
PATOJENİK SPİROKETLER
Spiroketler, bakterilerin aksine, daha az yaygın bir mikroorganizma grubudur.
Tüm spiroketler spor veya kapsül oluşturmaz. Gram (gram-negatif) göre boyanmazlar. Besleyici ortamlarda yetiştirmek zordur. Spiroketler - saprofitler, organik atık bakımından zengin rezervuarlarda, alüvyonda, ağız boşluğunda ve insan bağırsaklarında bulunur. Kendi başlarına morfolojik özellikler patojenik spiroketler üç gruba ayrılır.
- Treponema, düzenli bir spiral şeklindedir. Buna spiroket sifiliz dahildir.
- Kıvrımlı ve daha geniş bukleli kıvrımlı bir iplik şeklinde olan Borrelia. Bu grup spiroketleri içerir tekrarlayan ateş ve Vincent'ın spiroketi.
- Çok sayıda küçük bukleleri ve karakteristik kanca şeklindeki uçları olan Leptospira (leptospira bulaşıcı sarılık).
SİFİLİS SPİROKETİ
Frengiye neden olan ajan, ilk kez 1905'te F. Shaudin ve E. Hoffmann tarafından tanımlanan soluk spiroket Spirochaeta pallida'dır. 2 yıl önce, D.K. Zabolotny maymunlar üzerinde deneyler yaparak frengi spiroketini keşfetti.
Morfoloji ve tentür özellikleri. Soluk bir spiroket, ışığı küçük, düzgün, düzenli kıvrımlarla zayıf bir şekilde kıran çok hassas, ince bir ipliktir (ek parçada Şekil 104 ve 105).
Pirinç. 104. Karanlık alanda Treponema pallidum.
Ortalama olarak 6 ila 14 mikron uzunluğa ve 0,25 mikron kalınlığa sahiptir. Anilin boyalarıyla zayıf boyama ve canlı durumda zayıf görünürlük nedeniyle soluk adını aldı. Bu özellikler, spiroket gövdesindeki düşük nükleoprotein içeriği ve lipoidlerin zenginliğinden kaynaklanmaktadır. Lekelemek için Romanovsky yöntemini (Şek. 105) kullanın veya daha önce bir tür mordana maruz bırakarak lekeleyin. en iyi yöntem pallidum spirochete tespiti karanlık görüş alanında yapılan bir çalışmadır. Taze malzemede, karanlık bir görüş alanına sahip bir ultramikroskopta incelendiğinde, soluk spiroket uzunlamasına eksen etrafında aktif hareketlerin yanı sıra öteleme ve dönme hareketlerini sergiler.
Yetiştirme Sıradan besin ortamlarında, sifiliz spiroketi çoğalmaz. V. M. Aristovsky ve A. A. Geltser, bir parça beyin dokusu eklenmiş tavşan serumundan oluşan sıvı bir besin ortamını başarıyla kullandılar. Ekimden sonra besiyerinin yüzeyi vazelin ile doldurulur. Kültürlerde spiroketler daha kaba, daha kısadır ve polimorfizm bakımından farklılık gösterir. Ortaya çıkan kültürler patojenik özelliklerden yoksundur ve patojenik özellikleri koruyan "doku"nun aksine "kültürel" olarak adlandırılır.
özellikler ve laboratuvarlarda tavşanlar üzerindeki pasajlarla desteklenmektedir.
direnç. Soluk spiroket kurumaya karşı çok dirençli değildir ve Yüksek sıcaklık. 45-48°'ye kadar ısıtmak onu bir saat içinde, 55°'ye kadar 15 dakikada öldürür. İle Düşük sıcaklık daha az hassas 10 ° 'de, birkaç güne kadar canlı kalır. Dezenfektanlar zararlıdır. Kimyasallardan %1-2 fenol çözeltisi en güçlü etkiye sahiptir.
Hayvanlar için patojenite. I. I. Mechnikov ve D. K. Zabolotny ilk kez büyük maymunlarda deneysel frengi elde etmeyi başardılar. Tavşanlar, patolojik materyalin korneaya, gözün ön kamarasına, deriye, mukoza zarına vb. girmesiyle enfekte olabilir. Bu durumda hayvanlar, bölgede tipik skleroz (şankr) şeklinde bir birincil lezyon geliştirir. aşılama.
Sifilizin patogenezi ve kliniği. Tek enfeksiyon kaynağı sifilizli bir kişidir. Hastalık hem doğrudan temas yoluyla (çoğunlukla cinsel) hem de sifilitik salgılarla kontamine olmuş nesneler yoluyla bulaşabilir. Ortak kaplardan yemek yemek, kaşık paylaşmak vb. (dolaylı temas) ev frengisinin yayılmasına katkıda bulunabilir.
Soluk spiroket vücuda hasarlı mukoza zarları ve deri yoluyla girer. 3-4 hafta sonra, giriş kapısının yerinde birincil skleroz belirir - sifilizin birincil dönemini karakterize eden sert bir şans (yoğun kenarları ve tabanı olan bir ülser - bu nedenle sert şans adı verilir).
Gelecekte mikrop, lenfatik ve dolaşım yollarından vücuda girer ve tüm vücuda yayılır - ikinci dönem başlar. Bu dönem, üzerinde roseolas, papüller, veziküller ve püstüllerin - sifilizlerin göründüğü cilt ve mukoza zarlarında hasar ile karakterizedir. İkinci dönem 2-3 aydan birkaç yıla kadar sürer. Frengi yeterince tedavi edilmediyse üçüncü dönem başlar - sakızlı. Gummalar (granülomlar), lenfositler, epiteloid ve Plazma hücreleri. Derinin kalınlığında, mukoza zarlarında, iç kısımda olabilirler.
organlar vb. Gummalar bazen ulaşır büyük bedenler, yanlarındaki küçük damarlar lümende yavaş yavaş azalır ve sonunda kapanır. Bu bağlamda, sakız hücrelerinin beslenmesi bozulur ve herhangi bir doku ve organda ülser ve yara oluşumu ile derin yıkımları meydana gelir.
Bazı durumlarda, sifiliz, ilerleyici felç ve sırt tablaları şeklinde merkezi sinir sistemi lezyonları ile karakterize edilen dördüncü döneme geçer. Sifilizin klinik belirtileri, çoğu durumda ortaya çıkan cilt ve mukoza zarlarının lezyonlarının ağrısız olması, tıbbi müdahale olmadan bile kaybolması, tekrarlaması ve sonunda ortaya çıkmasıyla ayırt edilir. şiddetli lezyonlarüçüncü ve dördüncü dönemler.
Bağışıklık. doğuştan bağışıklık insanlarda frengi görülmez. Aktarılan hastalık, bulaşıcı hastalıkların çoğunu karakterize eden kazanılmış bağışıklık türünü de bırakmaz. Sifilizli bir hastanın sekonder enfeksiyonu durumunda, spiroketler ölmezler, ancak devam ederler ve birincil enfeksiyonun kalan spiroketleri ile birlikte organları ve dokuları enfekte ederek vücutta yayılırlar. Bununla birlikte, sifiliz ile ikincil enfeksiyonda, birincil reaksiyon şekli yoktur - şans. Bu immünolojik duruma "chanker bağışıklığı" denir.
Sifilizdeki "bağışıklık" ile, patolojik değişikliklerin doğasının ve klinik tablonun kendisinin değişmesiyle bağlantılı olarak vücudun immünolojik yeniden yapılandırılması anlaşılır. Bu "bağışıklık" mekanizmasına gelince, hastaların serumunda antikorlar (lizinler, aglütininler) bulunmasına rağmen, bu hümoral faktörlere bağlı değildir.
Laboratuvar teşhisi. Sifilizin ilk döneminde, karanlık bir alanda bakteriyoskopik inceleme veya sert bir şanstan alınan lekeli materyalin lekelenmesi ile tanı konur.
Araştırma için daha fazla sayıda spiroket içeren lezyonun derin kısımlarından doku sıvısının alınması gerekir. Bunun için önce saline batırılmış steril bir bezle şankrın yüzeyi iyice silinir, ardından ülserin alt kısmından hafifçe sıkılarak az miktarda doku sıvısı sıkılır. Bu başarısız olursa, ülserin tabanı bir neşter veya keskin bir kaşıkla hafifçe kazınarak tahriş edilir. Ortaya çıkan sıvı bir Pasteur pipeti ile emilir.
Bir sıvı damlası en iyi şekilde, parlak bir şekilde aydınlatılmış spiroketlerin morfolojisinin ve karakteristik hareketlerinin açıkça görülebildiği karanlık bir alanda incelenir.
Cinsel organlarda ve ağız boşluğunda (cinsel organlarda - Sp. refringens, ağız boşluğunda - Sp. microdentium) bulunan saprofitik spiroketler, morfolojileri ve hareketin doğası bakımından soluk spiroketlerden farklıdır. sp. refringens daha kaba bir gövdeye sahiptir ve büyük halkalara sahiptir, ileri hareketi yoktur, Sp. microdentium, hareketinin doğası gereği soluk spiroketten farklıdır.
Grimsi beyaz spiroketlerin şeklinin ve girdaplarının siyah bir arka plan üzerinde açıkça görülebildiği Burri mürekkep lekeleri de (bkz. sayfa 51) hazırlanabilir.
Boyalı müstahzarı incelemek için ince smear'lar hazırlanır: bir cam lam üzerine bir damla sıvı koyarak, ikinci camın kenarıyla yüzeye yayın (tıpkı bir damla kandan smear hazırlamak gibi). Smearlar havada kurutulur, metil alkolde sabitlenir ve Romanovsky'ye göre 12-15 saat boyanır (s. 52): soluk spiroket pembeye döner, bu da onu maviye dönen diğer saprofitik spiroketlerden ayırt etmeyi mümkün kılar (bkz. Şekil .105).
Pirinç. 105. Şans akıntısında soluk spiroket. Romanovsky'ye göre boyama.
Preparatın bu kadar uzun bir şekilde renklendirilmesi, soluk spiroketin anilin boyalarını iyi algılamaması ile açıklanmaktadır.
Sifilizin ikinci döneminde, ciltte ve mukoza zarlarında sifiliz ortaya çıktığında, etkilenen bölgelerden doku suyu da alınır ve spiroket varlığı açısından incelenir.
Enfeksiyon başlangıcından 4-5 hafta sonra, sifiliz teşhisi için en yaygın yöntem olan serolojik bir test yapılabilir.
Frengi serodiagnozu, Wasserman reaksiyonu ve tortul reaksiyonların formülasyonuna dayanır.
Wasserman reaksiyonu. Wassermann reaksiyon tekniği, komplement fiksasyon reaksiyon tekniğinden farklı değildir. Önemli bir fark, antijenlerin hazırlanma yöntemi ve ayrıca titrasyonlarıdır.
Patolojik veya normal dokulardan alınan lipid özleri, Wasserman reaksiyonu için antijen olarak kullanılır. Sifilitik organlardan hazırlanan sözde spesifik antijenler daha aktiftir, bu nedenle titreleri genellikle mililitrenin binde birine ulaşır (titre 0.007, 1 ml'de 0.05, vb.). Spesifik olmayan antijenler daha az aktiftir, bu nedenle titreleri daha düşüktür ve mililitrenin yüzde biri içindedir (örneğin, 1 ml'de titre 0.01, 0.02).
Wasserman reaksiyonunu ayarlarken 3 antijen kullanılır (No. 1, 2 ve 3 kardiyolipin). 1'e özgü antijen. Frengi ile enfekte olmuş bir tavşanın testis dokusundan ekstraksiyon yoluyla elde edilen sifilitik spiroketin lipidlerini içerir. 2 ve 3 numaralı antijenler spesifik değildir ve normal doku lipitlerini içerir (% 0.25-0.3 kolesterol ilavesiyle sığır kalp kaslarının alkol özleri). Kardiyolipin antijeni saflaştırılmış bir preparasyondur, hızlı bir şekilde seyreltilmelidir ve seyreltmeden sonra hafif yanardöner olmalı, ancak bulanık olmamalıdır. Antijen titresi, 1 ml salinde olması gereken ve hemolitik sistem ve kompleman varlığında hemolizi geciktirmeyen miktarı ifade eder.
Örneğin, ampul üzerinde 0,05 ml'lik bir antijen titresi belirtilmişse, bu, işlem sırasında antijenin, bir ml sıvı içinde 0,05 ml antijen olacak şekilde salinle seyreltilmesi gerektiği anlamına gelir.
Antijenler çeşitli antikomplementer özelliklere sahip olabildiği için, Wasserman reaksiyonundan önce kompleman sadece saf halde değil, aynı zamanda antijen varlığında da titre edilir. Wasserman reaksiyonu 3 antijen ile ayarlandığından, tamamlayıcı her bir antijenle ayrı ayrı titre edilmelidir.
Wasserman reaksiyonunun modifikasyonu - Grigoriev-Rapoport reaksiyonu (Tablo 25). Bu reaksiyon, test edilen serumun tamamlayıcı aktivitesinin kullanımına dayanmaktadır. Reaksiyon, hastanın aktif (ısıtılmamış) serumunu kullanır (aldıktan sonra en geç 36 saat içinde). Reaksiyonun gerçekleşmesi için antijenlere, hemolitik seruma ve iki kat gazlı bezden süzülmüş defibrine, yıkanmamış koyun kanına ihtiyaç vardır.
Reaksiyon şeması Grigoriev - Rapoport
Malzemeler (ml olarak) | test tüpleri | ||
Aktif test serumu | |||
salin | |||
| Antijene özgü, titre ile seyreltilmiş | |||
Antijene özgü olmayan, titre ile seyreltilmiş | |||
Oda sıcaklığı 22° 25 dakika |
|||
Hemolitik sistem | |||
Oda sıcaklığı 22° 25 dakika. |
|||
Serum kontrolünde hemolizin olmadığı durumlarda reaksiyon tekrarlanır ve 0,2 ml test serumuna 0,2 ml açıkça aktif negatif serum eklenir ve bu nedenle eklenen fizyolojik solüsyonun hacmi buna göre azalır.
Deneyin sonuçları, antijen içeren ilk iki test tüpünün okumalarına dayalı olarak reaksiyonun bitiminden hemen sonra dikkate alınır. Pozitif bir sonuç, hemolizde tam bir gecikme ile karakterize edilir, negatif bir sonuç, tam hemoliz ile karakterize edilir. Serum kontrolü (antijensiz 3. tüp) tam hemolize sahip olmalıdır.
Bu reaksiyonlara ek olarak, özü inaktive edilmiş hastanın serumunun antijen ile etkileşimi olan ve bunun sonucunda test tüpünde bir çökeltinin çökeldiği tortul reaksiyonlar yaygın olarak sifiliz serodiyagnozu için kullanılır. Bunlardan Kahn ve Sachs-Vitebsky reaksiyonları en büyük uygulamaya sahiptir.
Kahn'ın tepkisi. Kahn reaksiyonunu oluşturmak için aşağıdaki bileşenler gereklidir: 1) hasta bir kişinin inaktif kan serumu, 2) özel bir Kahn antijeni ve 3) fizyolojik salin.
Kana antijeni, kolesterol eklenmiş koyun kalp kasından elde edilen bir lipid özütüdür. Deneyden önce, etikette belirtilen titreye bağlı olarak, antijen aşağıdaki gibi seyreltilir. Temiz ve kuru bir test tüpüne antijen, diğerine etikette belirtilen miktarda (1-1.1-1.2) fizyolojik solüsyon dökülür. Daha sonra ikinci tüpten alınan fizyolojik solüsyon antijeni içeren birinci tüpe hızlı bir şekilde dökülür (tersi olmaz). Ortaya çıkan karışım karıştırılır, test tüpünden test tüpüne 6-8 kez boşaltılır ve olgunlaşması için oda sıcaklığında 10 dakika bekletilir.
Deneyimi kurmak. Altı aglütinasyon tüpü bir rafa yerleştirilir. İlk üç tüp (1., 2. ve 3.) deneysel, sonraki üç tüp (4., 5. ve 6.) kontrol (antijen kontrolü). Olgunlaşmasından sonra seyreltilmiş antijen, bir mikropipet ile 3 deney ve 3 kontrol tüpüne verilir. Antijen içeren mikropipet, duvarlarına dokunmadan kuru test tüpünün dibine indirilmelidir - bu, antijen ölçümünün doğruluğunu sağlar. 1. tüpe 0,5 ml, 0,025 ve 3. - 0,0125 ml antijen - 3 kontrol tüpüne sırasıyla aynı miktarda antijen dökülür. Tüm deney tüplerine 0,15 ml test serumu, kontrol tüplerine ise aynı miktarda salin eklenir. Test tüplerinin bulunduğu raf, serumun antijenle karışması için 3 dakika kuvvetlice çalkalanır ve 10 dakika 37°'deki termostata yerleştirilir. Termostattan çıkardıktan sonra birinci deney ve birinci kontrol tüplerine 1 ml fizyolojik solüsyon, ikinci ve üçüncü deney, kontrol tüplerine 0,5 ml fizyolojik solüsyon ekleyin. Test tüplerinin içeriği tekrar çalkalanır ve reaksiyonların sonuçları dikkate alınır (Cahn reaksiyon şeması Tablo 26'da sunulmaktadır).
Not. Test edilen herhangi bir sayıda serumla, antijenin bir kontrolü yerleştirilir. Pozitif reaksiyon vakalarında, bir serum kontrolü yerleştirilir. Bu amaçla 0,1 ml miktarında deney tüpüne boşaltılır, 0,3 ml salin eklenir ve üç dakika çalkalanır.
Reaksiyon, bir büyüteç veya bir aglütinoskop kullanılarak çıplak gözle kaydedilir.
Tablo 26
Cahn reaksiyon şeması 
Çıplak gözle reaksiyon dikkate alındığında, her test tüpü raftan çıkarılır ve hafifçe eğilerek ışık kaynağının önünde göz hizasının biraz üzerinde tutulur. Test serumu ile test tüplerinde pulların (çökelti) çökelmesi, pozitif Kahn reaksiyonunun bir göstergesidir ve artılarla gösterilir. Keskin bir pozitif reaksiyon, dört artı (+ + + +) ile gösterilir - tüm test tüplerinde açıkça görülebilen pulların çökelmesi ve hafif yanardöner bir sıvı ile karakterize edilir. Pozitif bir reaksiyon, üç artı (+ + +) ile gösterilir ve tüm test tüplerinde daha az belirgin topaklanma ile karakterize edilir. İki artı (+ +) ile gösterilen zayıf pozitif bir reaksiyon, daha zayıf tortulaşma ve bulutlu bir sıvıda küçük parçacıkların varlığı ile karakterize edilir. Bulanık bir sıvıda çok küçük asılı parçacıkların oluşumu bir artı (+) ile gösterilir. Sıvıda tortu ve serbestçe asılı kalan parçacıkların olmaması, negatif bir reaksiyonun göstergesidir ve eksi (-) ile gösterilir. Kontrol tüplerinde pullanma görülmemelidir.
SİTOKOLİK SEDIMANTER REAKSİYON (Tablo 27), Zaks-Vitebsky. Bu reaksiyon için inaktive edilmiş test serumu ve kolesterol ilave edilen sığır kalp kaslarından elde edilen bir lipoid özü olan Sachs-Vitebsky sitokol antijenine sahip olmak gerekir.
Tablo 27
Sachs - Vitebsky'nin sitokolik reaksiyonunun şeması