Mikrobiologická diagnostika yersiniózy. Yersiniová enterokolitída a črevná yersinióza Mikrobiológia yersiniózy

Rod Yersinia patrí do čeľade Enterobacteria a zahŕňa niekoľko druhov: Yersinia pestis – pôvodca moru; Yersinia pseudotuberculosis - pôvodca pseudotuberkulózy, Yersinia enterocolitica atď.

Yersinia enterocolitica je v prírode široko rozšírená. Zvyčajne žijú v tele hlodavcov, ktoré sa často vyskytujú u domácich zvierat.

Morfológia. Malé gramnegatívne tyčinky so zaoblenými koncami. Priemerná veľkosť 0,8-1,2 × 0,3-0,7 µm, ale v starých kultúrach môže byť dlhší a vyzerať ako vlákna. Mobilné. Spor nevzniká.

pestovanie. fakultatívne anaeróby. Rastú dobre na jednoduchých živných médiách. Najpriaznivejšia teplota pre rast je 22-28 ° C.

Na MPA tvoria malé lesklé bezfarebné kolónie (kvapky rosy), ktoré sa zväčšujú s predlžujúcim sa časom rastu (pri 22-25°C). Pri kultivácii pri 37 °C sú kolónie nepriehľadné, majú nerovnomerne vrúbkovaný okraj a konvexný stred.

Môžu rásť pri vysokom obsahu chloridu sodného v médiu (až 4%).

Enzymatické vlastnosti. Rozkladajú glukózu bez tvorby plynov, nefermentujú sacharózu. Nevzniká sírovodík, tvorba indolu nie je konštantná.

tvorba toxínov. Obsahuje endotoxín. Niektoré kmene produkujú exotoxín.

Antigénna štruktúra. Y. enterocolitica má O-, K- a H-antigény. O-somatický antigén je lipopolysacharid. Pôvodcovia ľudských chorôb patria najčastejšie medzi sérovary O9, O3, O5.

Odolnosť voči faktorom životné prostredie . Zasiahnuť vysoká teplota nestabilné. Pri 100 ° C zomrú okamžite, keď sa zahrejú na 60-80 ° C - po 15-20 minútach. Sú dobre konzervované pri nízkych teplotách (-15 -20 ° C), pri 4-14 ° C nielen pretrvávajú, ale sa aj množia. Priame slnečné svetlo ich zabíja do 30 minút, rozptýlené - po 6-8 hodinách.Pri sušení rýchlo odumierajú. V potravinárskych výrobkoch môžu pretrvávať dlhú dobu a dokonca sa množiť.

Roztoky dezinfekčných prostriedkov (chlorid ortutnatý, chlóramín, fenol) zabijú Yersinia za pár minút.

Vnímavosť zvierat. Laboratórne zvieratá sú na Y. enterocolitica prakticky necitlivé. IN vivo môžu spôsobiť vážnych chorôb hlodavce, ošípané, mačky, psy, často smrteľné.

Zdroje infekcie. Častejšie choré zvieratá, menej často ľudia.

Prenosové cesty. Jedlo.

Patogenéza. Dostať sa cez ústa do gastrointestinálneho traktu, Yersinia sa množia. Niekedy prenikajú do epiteliálnych buniek čreva a množia sa v nich. Endotoxín a toxické látky produkované Yersinia spôsobujú akútnu gastroenterokolitídu. S prenikaním patogénov do krvi sa vyvíja bakteriémia a generalizovaný proces, pri ktorom sú ovplyvnené rôzne orgány: pečeň, slezina atď.

Prevencia. Hygienická kontrola skladovania a spracovania potravinárskych výrobkov. Dodržiavanie sanitárneho a hygienického režimu v podnikoch Stravovanie a pravidlá osobnej hygieny.

Špecifická profylaxia neprítomný.

Liečba. Antibiotiká a symptomatická liečba.

Mikrobiologický výskum

Účel štúdie: izolácia a identifikácia Yersinia z patologického materiálu.

Výskumný materiál

1. Pohyb čriev.

2. Zvracanie a výplach žalúdka.

5. Hlien z hrdla a nosa, výtok z rany.

6. Sekčný materiál.

Hlavná metóda výskumu

Mikrobiologické

Pokrok vo výskume

Druhý deň výskumu

Pozrite si plodiny na médiu Endo, EMS. Vyberte si malé okrúhle lesklé kolónie. Prideľte sa kombinovanému prostrediu Russell alebo Olkenitsky. Doštičky sa nechajú pri 20-28° C. Obohacovacie médium sa naočkuje na Endo alebo EMS médium.

Tretí deň výskumu

Prezrite si taniere s plodinami. Vyberte väčšie kolónie (0,1-0,2 mm), okrúhle s hladkým okrajom, lesklé s ružovkastým nádychom. Priraďte k médiu Russell alebo Olkenitsky. Misky s kultúrami z obohacovacieho média sa prezerajú, kolónie opísané vyššie sa vyberú a izolujú na médiu Russell alebo Olkenitsky.

Pozrite si plodiny v prostredí Russella a Olkenitského. Urobte šmuhy a nafarbite ich podľa Grama. V prítomnosti malých gramnegatívnych tyčiniek (niekedy polymorfných), ktoré nefermentujú laktózu, nefermentujú glukózu a močovinu a netvoria sírovodík, sa vykoná opätovný výsev na stanovenie pohyblivosti (pri 18 – 20 °C a 37 °C ) a v Hiss médiu (manitol, maltóza, sacharóza, ramnóza, želatína, citrát).

Štvrtý deň výskumu

Opakujte zobrazovacie platne a kombinované médiá. Berú sa do úvahy výsledky rastu na Hiss médiu, pohyblivom agare a želatíne.

Pri izolácii gramnegatívnych tyčiniek, ktoré nerozkladajú laktózu, ramnózu, netvoria sírovodík, fermentujú glukózu, manitol, sacharózu, sú mobilné pri 22 °C a nepohyblivé pri 37 °C, dajú odpoveď: „Yersinia enterocolitica má bol izolovaný."

Kontrolné otázky

1. Aké sú vlastnosti Yersinia enterocolitica?

PrednáškaN 18. Francisella a Yersinia

Rod Francisella

Zástupcovia tohto rodu sú súčasťou čeľade Brucellacea Hlavným druhom je F.tularensis - pôvodca tularémia- prirodzená fokálna infekcia, ktorej rezervoárom sú mnohé druhy prevažne malých voľne žijúcich stavovcov (zástupcovia štyroch hlavných čeľadí - myšovitý, zajac, veverička a jerboa). Na území Ruska sú hlavnými prenášačmi myšovité hlodavce – vodné potkany, ondatry, rôzne druhy hrabošov. Okrem F. tularensis do tohto rodu patrí F. novicida, ktorej patogenita pre človeka nebola dokázaná.

Morfológia.

Francisella sú malé kokoidné alebo elipsoidné polymorfné tyčinky, nepohyblivé, gramnegatívne, netvoriace spóry.

kultúrne vlastnosti.

Prísne aeróby, optimálna teplota je okolo +37 stupňov Celzia, pH je blízke neutrálnemu. Kultivované na agarovom a žĺtkovom médiu komplexného zloženia s prídavkom cysteínu, glukózy, krvi. Rast je pomalý. Tvoria malé kolónie pripomínajúce kvapky rosy, okrúhle s hladkým okrajom, konvexné, lesklé, s modrastým odtieňom.

biochemické vlastnosti.

Slabo fermentuje na kyselinu bez plynu, niektoré sacharidy (glukóza, maltóza, levulóza, manóza), tvoria sírovodík. Mikrób tularémie sa delí na poddruh (ekologicko - geografické rasy):

- Holarktický(nefermentuje glycerín, citrulín, málo virulentný pre králiky a ľudí, bežný v Eurázii a Amerike); mikrób tularemia tohto poddruhu je viac prispôsobený vodným ekosystémom, je schopný sa šíriť vodou, prenáša sa prostredníctvom komárov;

- Nearctic(fermentuje glycerol, nefermentuje citrulín, virulentnejší u králikov a ľudí, bežný v Severnej Amerike);

- Stredná Ázia(fermentuje glycerol a citrulín, málo virulentný). Stredoázijský poddruh zaujíma vlastnosťami medzi prvými dvoma stredoázijský poddruh, ktorý sa približuje pôvodnej rodovej forme patogénu.

Holarktický poddruh zahŕňa tri biovary – 1 (Erys – citlivý na erytromycín), 2 (Eryr – odolný) a japonský (var.japonica). Biovar 2 je známy iba v Eurázii, kde sa zhoduje s rozšírením vodného potkana.

antigénne vlastnosti.

F.tularensis v S (virulentnej) forme má dva hlavné antigénne komplexy - O antigén (podobný O - brucellovým antigénom) a Vi (kapsulárny) antigén. Disociácia S R vedie k strate kapsuly, virulencii a imunogenicite.

Ekologicko - epidemiologické črty.

Na území Ruska 7 hlavných krajinné typy prírodných ohnísk tularémia: niva – močiar, lúka – pole, step, les, úpätie – potok, tundra a tugai (luha – púšť) s ich hlavnými hostiteľmi patogénu a ekologickými a epidemiologickými znakmi. Na mikrób tularémie je človek veľmi citlivý, minimálna infekčná dávka je jedna mikrobiálna bunka. Zvieratá podľa citlivosti na tento mikroorganizmus sú rozdelené do štyroch skupín. Osobitný význam v podmienkach západnej Sibíri majú vodné krysy a ondatry. K infekcii človeka môže dôjsť kontaktom s hlodavcami alebo predmetmi, ktoré sú nimi infikované, alimentárnou cestou (voda a produkty na jedenie), vzduchovo-prachová cesta, prenosná (ixodidové kliešte a iné krviprelievače). N.G. Olsufiev identifikuje dve ekologické formy patogénu – „suchozemský“, charakterizovaný prenosom prostredníctvom kliešťov ixodidov (všetky tri poddruhy) a „vodný“, spojený s polovodnými druhmi hlodavcov a inými organizmami – hydrobiontmi, s prevládajúcim prenosom cez vodu a uštipnutie komármi (holarktický poddruh).

Klinické a patogenetické vlastnosti.

Kapsula, ktorá inhibuje fagocytózu;

Neuraminidáza, ktorá podporuje adhéziu;

Endotoxín (intoxikácia);

Alergénne vlastnosti bunkovej steny;

Schopnosť množiť sa vo fagocytoch a potlačiť ich zabíjačský účinok;

Prítomnosť receptorov pre Fc fragment IgG inhibuje aktivitu komplementových systémov a makrofágov.

Francisella preniká do tela cez kožu a sliznice očí, úst, dýchacích ciest, gastrointestinálneho traktu črevný trakt. G. P. Rudnev (1970) navrhol rozlíšiť nasledujúce štádiá v patogenéze tularémie:

1. Úvod a primárna adaptácia patogénu.

2. Lymfogénny drift.

3. Primárne regionálne - fokálne (tularémia bubo) a celkové reakcie.

4. Hematogénne metastázy a generalizácia.

5. Sekundárne polyfoci.

6. Reaktívne - alergické zmeny.

7. Reverzná metamorfóza a zotavenie.

V niektorých prípadoch môže byť proces obmedzený na prvé tri fázy.

Hlavné klinické formy tularémie sú ulcerózno-bubonická (ulceroglandulárna), okulo-bubonická (okulo-glandulárna), pľúcna, abdominálna, generalizovaná, iné formy (vrátane anginózno-glandulárnej), nešpecifikované ( medzinárodná štatistická klasifikácia chorôb, 10 revízia. WHO, 1995).

Laboratórna diagnostika.

Bakteriologické metódy na diagnostikovanie tularémie pre ľudí majú ďalší význam a nie sú vždy účinné, čo je určené biologickými charakteristikami patogénu a charakteristikami infekcie u ľudí (nízka koncentrácia patogénu v orgánoch a tkanivách).

biotest je oveľa efektívnejšia metóda diagnostiky. Materiál od pacienta (bubo bodkovaný, spojivkový výtok, film z krčných mandlí, spútum a pod.) sa používa na infikovanie laboratórnych zvierat (zvyčajne bielych myší), z orgánov uhynutých zvierat sa robia očkovania na živné pôdy, kultivácia identifikuje sa kombináciou nasledujúcich znakov:

a) morfológia buniek a gram-negatívne farbenie;

b) rast na žĺtkovom médiu a špeciálnych médiách a žiadny rast na jednoduchom mäsovo-peptónovom médiu;

c) špecifická luminiscencia v imunofluorescenčnej reakcii (MFA);

d) aglutinácia kultúry s tularemickým sérom;

e) schopnosť spôsobiť smrť bielych myší a morčatá s charakteristickými patologickými zmenami v orgánoch a izoláciou čistej kultúry.

Bakteriologické metódy a biotesty môžu vykonávať len špecializované laboratóriá, ktoré majú povolenie na prácu s pôvodcom tularémie (2. skupina patogenity). Ako metódu na detekciu mikróbov tularémie možno použiť MFA, protilátkovú neutralizačnú reakciu - RNAT, ako doplnkovú - PCR.

Najdôležitejšie v laboratórnej diagnostike tularémie sú sérologické metódy- RA, RPGA. Vyžaduje sa štúdia párových krvných sér. Ďalšie sérologické metódy sú ELISA, RNIF.

Diagnostika alergií(test s tularínom - alergénom tularémie) sa častejšie používa na posúdenie prírodné a vakcinačné imunita. HRT sa vyvinie v prvom týždni choroby, ako aj po očkovaní a pretrváva niekoľko rokov. U pacientov sa neodporúčajú kožné a intradermálne tularínové testy pre možnosť zhoršenia stavu pacienta. Môžu sa použiť in vitro diagnostické metódy alergie - leukocytolýza, RTML atď.

špecifická profylaxia.

V územiach nepriaznivých pre tularémiu sa používa živá vakcína proti tularémii. Imunita je dlhodobá, testovaná pomocou testu s tularínom. Pomocou tejto vzorky sa vyberú kontingenty na očkovanie a preočkovanie.

Rod Yersinia .

Rod zahŕňa 11 druhov. Y. pestis spôsobuje mor Y. pseudotuberkulóza- pseudotuberkulóza, Y. enterokolitída- (črevná) yersinióza, mnohé druhy nie sú patogénne alebo podmienečne patogénne pre ľudí.

Morfológia.

Častejšie majú vajcovitý (koko-bacilárny) tvar, farbia sa bipolárne a sú náchylné na polymorfizmus. Väčšina druhov je pohyblivá pri teplotách pod +30 stupňov Celzia (má peritrichózne bičíky), gramnegatívne, majú kapsulárnu substanciu. Y.pestis sú nepohyblivé, majú kapsulu.

Kultúrne a biochemické vlastnosti.

fakultatívne anaeróby. Teplotné optimum je od +25 do + 28 stupňov Celzia, pH je blízke neutrálnemu. Dobre pestované na jednoduchých živných pôdach. Väčšina sacharidov je fermentovaná bez tvorby plynov. Yersinia je schopná meniť svoj metabolizmus v závislosti od teploty a množiť sa pri nízkych teplotách ( psychrofilné vlastnosti). Virulentné kmene tvoria hrubé (R) kolónie, prechodné (RS) a sivasté slizké hladké (S) formy.

Pri štúdiu kolónií morového mikróbu sa rozlišujú dva typy kolónií - mladé a zrelé. Mladé mikrokolónie so zubatými okrajmi (štádium „ rozbité sklo“) neskôr splývajú a vytvárajú jemné ploché útvary s vrúbkovanými okrajmi (štádium „čipkových vreckoviek“). Zrelé kolónie sú veľké, s hnedým zrnitým stredom a zubatými okrajmi („sedmokrásky“). Mnohé kmene sú schopné obnoviť farbivá so zmenou farby média (metylénová modrá, indigo atď.). Na šikmom agare sa po dvoch dňoch pri +28 C vytvorí sivobiely povlak, ktorý prerastie do média, na bujóne - jemný povrchový film a zrazenina podobná bavlne. Teplota +37C - selektívna pre tvorbu kapsuly v Y.pestis.

Kultúry Y.pseudotuberculosis a Y.enterocolitica nemajú štádium „rozbitého skla“, najskôr sú malé, lesklé, vypuklé, potom možno pozorovať splývavý rast s tvorbou konvexných hrboľatých kolónií podobných Y.pestis. . Pestujte na univerzálnych živných pôdach (Endo médium, Mac Conkey agar, Serov médium atď.) v kombinácii s akumulačnými metódami v chladných podmienkach.

Antigénna štruktúra.

Všetky typy Yersinia majú O - antigén (endotoxín), podobne ako O - antigény iných gramnegatívnych baktérií a toxické pre ľudí a zvieratá. Komplexy lipopolysacharid-proteín O - Antigény Yersinia sa delia na S (hladký) a R (drsný), posledné sú spoločné pre Y.pestis a Y.pseudotuberculosis. Y.enterocolitica má povrchový antigén spoločný s inými enterobaktériami.

Pôvodca pseudotuberkulózy sa delí na 13 sérovarov podľa O- a H-antigénov, častejšie sú sérovary I, ako aj III a IV, yersinióza - na 34 sérovarov podľa O-antigénu, častejšie sú sérovary O3 a O9. izolované od ľudí. Y.pseudotuberculosis a Y.enterocolitica pri teplotách od +22 do +25C majú bičíkový antigén a sú mobilné, pri +37C strácajú H-antigén a pohyblivosť.

Y. pestis je antigénne homogénnejší, má kapsulárny antigén (frakcia I), antigény T, V - W, proteíny plazmakoagulázy, fibrinolyzín, vonkajšiu membránu atď. Morový mikrób vylučuje bakteriocíny (pesticíny), ktoré majú baktericídny účinok na pseudotuberkulózne mikróby a kmene Escherichia coli.

patogénne vlastnosti.

Pôvodca moru má spomedzi baktérií najväčší patogénny potenciál. Potláča funkcie fagocytárneho systému, pretože potláča oxidačné vzplanutie vo fagocytoch a voľne sa v nich množí. Faktory patogenity sú kontrolované tromi triedami plazmidov. V patogenéze existujú tri hlavné štádiá - lymfogénny drift, bakteriémia, generalizovaná septikémia.

Pôvodcovia pseudotuberkulózy a yersiniózy majú adhezíny a invazíny, proteíny s nízkou molekulovou hmotnosťou (inhibujú baktericídne faktory), enterotoxín. Niektoré faktory sú kontrolované virulentnými plazmidmi.

klinické príznaky.

Mor sa často vyskytuje v bubonickej, pľúcnej a črevnej forme. Najnebezpečnejší sú pacienti s pľúcnym morom, ktorí vylučujú obrovské množstvo patogénu spúta).

Yersinióza a pseudotuberkulóza sú črevné infekcie. Ambulancia je rôznorodá - regionálna lymfadenopatia (simuluje apendicitídu), enterokolitída, reaktívna artritída, ankylozujúca spondylitída, šarlach.

epidemiologické črty.

Mor je klasická prírodná ohnisková zoonóza voľne žijúcich zvierat. Hlavnými prenášačmi v prírode sú svište, sysle, pieskomily, piky, v antropurgických (mestských) podmienkach - potkany (mor prístavných miest). Pri prenose patogénu, najmä v ohniskách, kde dominujú nehibernujúce zvieratá, sa vyskytujú zvieracie blchy, ktoré môžu napadnúť a infikovať človeka. Ťavy sa môžu nakaziť v pieskovcových ohniskách a predstavovať epidemické nebezpečenstvo.

Pseudotuberkulózu a črevnú yersiniózu prirodzene prenášajú hlodavce. Schopný dlho pretrvávať a dokonca sa hromadiť pri nízkych teplotách, napríklad v skladoch zeleniny. Môže spôsobiť ochorenie hospodárskych zvierat. Na človeka sa prenášajú najmä potravinové produkty zo zvierat, ako aj rastlinného pôvodu.

Laboratórna diagnostika.

Bakteriologickú diagnostiku moru môžu vykonávať len špecializované laboratóriá protimorových staníc a ústavov (1. skupina patogenity). Metódy rýchlej detekcie antigénu sú MFA, RPGA s erytrocytárnym diagnostikom senzibilizovaným monoklonálnymi protilátkami proti kapsulárnemu antigénu, ELISA, RNAT. Na sérologickú diagnostiku možno použiť ELISA, RNAG, ELISA.

Pri bakteriologickej diagnostike črevnej yersiniózy a pseudotuberkulózy v dôsledku akumulácie patogénu pri nízkych teplotách (na rozdiel od väčšiny iných mikroorganizmov) sa materiál predbežne odoberie do pufrovaného fyziologického roztoku a skladuje sa v chladničke s periodickým výsevom na médiách Endo, Ploskirev, Serov. Podozrivé kolónie sa subkultivujú, aby sa získali čisté kultúry, ktoré študoval biochemické vlastnosti a identifikované pri RA diagnostickými sérami.

Na sérologickú diagnostiku sa používajú RA a RNHA (pre pseudotuberkulózu - so sérovarom I, pre yersiniózu - so sérovarmi O3 a O9) so štúdiom párových sér odobratých v dynamike infekčného procesu.

špecifická profylaxia.

Používa sa v centrách moru. Používa sa živá atenuovaná EV vakcína. Na perorálne podanie je dostupná suchá tabletová vakcína. Na posúdenie imunity voči moru (prirodzená postinfekcia a vakcína) sa vykoná intradermálny alergický test s tĺčik.

Obsah článku

Názov je daný na počesť A. Yersena. Rod Yersinia zahŕňa niekoľko druhov, z ktorých Y. pestis, Y. enterocolitica a Y. pseudotuberculosis sú pre človeka patogénne. Sú to gramnegatívne tyčinky netvoriace spóry. Vyznačujú sa biochemickými, antigénnymi a inými charakteristikami.

Mor Yersinia

Pôvodcu moru Y. pestis objavil v roku 1894 A. Yersen.

Morfológia a fyziológia

Krátke palice súdkovitého tvaru so zaoblenými koncami. Zafarbené metylénovou modrou bipolárnou. Netvoria spóry, nemajú bičíky. Vytvárajú kapsulu (obr. 20.16 na karte farieb, 20.17). Y. pestis sú heterotrofné baktérie, nenáročné na živné pôdy. Rastie v širokom rozmedzí teplôt (5°-37°C). Na agarových pôdach vytvára ploché kolónie s nerovnými okrajmi, ktoré pripomínajú čipkovanú vreckovku. Na tekutom médiu sa tvoria vločky a sypká zrazenina. Fermentuje za tvorby kyslého radu cukrov (tabuľka 20.10.). Morový patogén produkuje hyaluronidázu, fibrinolyzín, koagulázu, proteínkinázu.

Antigény

Y. pestis má niekoľko antigénov. Antigén F1 je hlavnou proteínovou zložkou povrchovej štruktúry bakteriálnych buniek. V-antigén je tiež proteín, W-antigén je lipoproteínový komplex. Tieto antigény sú spojené s bunkovou stenou. Y. pestis má skrížené antigény s inými Yersiniami a enterobaktériami (E. coli, Salmonella), ako aj s ľudskými erytrocytmi skupiny O.

Patogenita a patogenéza

Virulencia patogénu moru je spojená predovšetkým s jeho adhéziou na epitelové bunky rôznych orgánov a tkanív v závislosti od vstupnej brány infekcie. Na adhézii sa podieľa kapsula a povrchové štruktúry bunkovej steny. Pri invázii sa podieľa agresivita (potlačenie fagocytárnej aktivity makrofágov). rôzne enzýmy a toxíny produkované týmito baktériami. Významnú úlohu v patogenite Y. pestis má „myší“ toxín, ktorý blokuje funkcie bunkových mitochondrií pečene a srdca a spôsobuje aj tvorbu krvných zrazenín. "Myšací" toxín označuje proteínové toxíny, pevne spojené s bakteriálnou bunkou, ktorých syntéza je riadená plazmidom. Rovnako ako ostatné proteínové toxíny pozostáva z dvoch podjednotiek, z ktorých jedna je zodpovedná za pripojenie toxínu k hostiteľskej bunke, druhá za toxické vlastnosti. Spolu s ním je toxicita a alergizácia organizmu spojená s LPS (endotoxínom) a ďalšími zložkami bunkovej steny. Určitú úlohu vo virulencii baktérií moru zohrávajú také enzýmy ako plazmakoaguláza a fibrinolyzín, lokalizované v vonkajšia membrána bakteriálna bunka. V tomto prípade dochádza k narušeniu aktivácie komplementu a výskytu krvácania a nekrózy v lymfatických uzlinách. Faktory patogenity sú kódované v chromozóme a plazmidoch.

Patogenéza a klinické formy

Patogenéza a klinické formy moru závisia od vstupnej brány infekcie. Existujú kožné, bubonické, pľúcne a iné klinické formy moru. Pri zníženej odolnosti organizmu voči veľkej dávke patogénu sa môže vyskytnúť primárna septická forma ochorenia. Sekundárna sepsa sa vyskytuje pri akejkoľvek klinickej forme moru. V tomto prípade pacienti vylučujú patogén močom, spútom, výkalmi. Primárna pľúcna forma moru vzniká pri infikovaní aerosólom, sekundárna - hematogénne ako komplikácia. Pred príchodom antibiotík bola úmrtnosť na mor veľmi vysoká.

Imunita

Postinfekčná imunita je charakterizovaná vysokým napätím spojeným s humorálnymi (protilátky) a bunkovými (fagocytóza) faktormi.

Ekológia a epidemiológia

Mor sa vzťahuje na zoonotické infekcie s prírodnými ohniskami. Rezervoárom infekcie sú hlodavce (sysle, tarabagany, svište, pieskomily a pod.). Nosičmi sú blchy. Prepuknutiu ľudského moru zvyčajne predchádza epizootika hlodavcov. Z človeka na človeka sa mor prenáša vzdušnými kvapôčkami len od pacientov s pľúcnym morom.

Mor

Mor - akútny, zoonotický obzvlášť nebezpečný, karanténa infekčná choroba s kožnými léziami lymfatické uzliny, pľúca, hemoragická septikémia a intoxikácia. Pôvodca moru, Yersiniapestis, patrí do rodu Yersinia z čeľade Enterobacteriaceae. Tento rod zahŕňa ďalšie dva druhy Yersinia patogénne pre ľudí: Y. pseudotuberculosis, Y. enterocolitica. Okrem troch hlavných patogénov yersinioziv je izolovaných ešte 8 druhov, v infekčnej patológii u ľudí nehrajú rolu, niektoré však môžu občas spôsobiť oportúnne infekcie Zdrojom moru v prírode je rôzne druhy Prenášačmi sú divé a domáce zvieratá, hlodavce a ich blchy. Preniknutím do ľudského spoločenstva sa z morovej infekcie môže stať antroponóza, ktorá sa šíri vo forme epidémií a pandémií.Pôvodca moru má viacero antigénov, z ktorých najviac D-, F1-, T-, V-, W jeho sérologická typizácia však ešte nie je dostatočne vyvinutá a nepoužíva sa v bežnej laboratórnej praxi. Uskutočňuje sa mikrobiologická štúdia s cieľom diagnostikovať ochorenie, identifikovať infekciu zvierat a nosičov v endemických ložiskách a stanoviť kontamináciu rôznych environmentálnych objektov Yersiniami . V tomto prípade sa používajú bakterioskopické, bakteriologické, biologické a sérologické metódy, ako aj alergický test s paličkou na retrospektívnu diagnostiku. Prvý prípad moru u ľudí musí byť potvrdený izoláciou patogénu.

Odber materiálu

Odber materiálu na výskum, ako aj všetky štádiá izolácie patogénov a práca s hlodavcami alebo laboratórnymi zvieratami sa uskutočňuje v protimorových oblekoch prvého typu. V laboratóriu je potrebné vytvárať prísne protiepidemické a dezinfekčné režimy, ktoré sú regulované špeciálne pokyny. Záležiac ​​na klinická forma moru sa pacientovi odoberajú tieto materiály: výtok z vredu alebo karbunky ( kožná forma); punctate z bubo (bubonická forma), krv (vo všetkých formách), výkaly a cerebrospinálnej tekutiny(pre ochorenie čriev resp mozgových blán). Pred začatím antibiotickej terapie je dôležité odobrať materiál. Pri odosielaní rezného materiálu sa odoberá krv, Kostná dreň, kúsky parenchýmových orgánov. Okrem toho sa do laboratória dodávajú živé a mŕtve hlodavce, blchy, potraviny a voda. V niektorých prípadoch sa skúma vzduch, výplachy z povrchu predmetov.Odobratý materiál sa vloží do sklenených nádob so zabrúsenými zátkami, obalí sa voskovým papierom, z vonkajšej strany sa utrie 5% roztokom lyzolu, nalepí sa štítok, ktorý označuje dátum, miesto, povaha materiálu, meno pacienta, diagnóza . Banky sú pevne zabalené v zapečatených obaloch, sú označené ako „top“ a úradným transportom s dôveryhodnou osobou odoslané do najbližšieho protimorového ústavu alebo laboratória na špeciálnu diagnostiku. nebezpečné infekcie. Personál, ktorý vykonal odber vzoriek materiálu, podlieha kompletnej sanitácii.

Bakterioskopia

Z testovaného materiálu sa v laboratóriu urobí 5-6 náterov, ktoré sa fixujú etanolom alebo zmesou alkoholu a éteru počas 15-20 minút. Jeden náter je zafarbený podľa Grama, druhý - metylénovou modrou, tretí - označeným luminiscenčným sérom proti Y. pestis (priame RIF), 2-3 nátery sú ponechané v rezerve. Detekcia charakteristických, bipolárne sfarbených, vajcovitých, gramnegatívnych baktérií v náteroch, ktoré tiež poskytujú špecifickú luminiscenčnú žiaru vo forme jasne zelenkavého halo okolo buniek s charakteristickou klinické príznaky a s prihliadnutím na epidemiologickú situáciu dáva právo stanoviť predbežnú diagnózu moru.

Bakteriologický výskum

Napriek charakteristike klinický obraz choroby, vo všetkých prípadoch sa musí vykonať bakteriologická diagnostika. Pre plodiny sa používajú vysoko výživné médiá s prídavkom rastových stimulantov, hoci morové tyčinky sú nenáročné na živné médiá. Testované materiály nekontaminované cudzorodou mikroflórou (krv, bodkovité mumlanie, mozgovomiechový mok) sa naočkujú do fľaštičiek obsahujúcich 50 až 100 ml MPB a paralelne sa naočkujú do platní s MPA alebo Hotingerovým agarom. Materiál kontaminovaný sprievodnou flórou sa vysieva na MPA so siričitanom sodným, Tumanského médium (MPA s 1% hemolyzovanej krvi a genciánovej violeti v koncentrácii 1:100 000-1:400 000) alebo boxuje (0,15% polotekutý agar s 0,3% hemolyz. krv a genciánová violeť 1:200 000). Na inaktiváciu morového fága sa na povrch hustého média nanesie 0,1 ml antifágového séra a rovnomerne sa rozdelí. Plodiny sa pestujú pri 28 ° C a 37 ° C. Po 18-20 hodinách v tekutom médiu sa objaví film s vláknitými útvarmi klesajúcimi nadol, podobnými stalaktitom, na dne sa vytvorí voľný sediment. Vývoj kolónií na pevnom médiu prechádza tromi štádiami. Po 10-12 hodinách pod mikroskopom rast pripomína nahromadenie bezfarebných platní (štádium „rozbitého skla“). Neskôr (18-20 hodín) sa vytvoria kolónie s konvexným zakaleným bielym stredom obklopeným vrúbkovanými okrajmi (štádium "čipková vreckovka"). Po 40-48 hodinách začína fáza „dospelých kolónií" s hnedastým stredom a zubatou periférnou zónou. Stery sa pripravia z typických kolónií, zafarbených Gramovou a metylénovou modrou, znovu naočkovaných na šikmý agar (alebo bujón), aby sa izolovala čistá kultúra. Na druhý deň, keď sa ubezpečia, že kultúra je čistá, začnú ju identifikovať. Na tento účel sa vykoná aglutinačná a precipitačná reakcia s diagnostickými antisérami proti somatickým a kapsulárnym antigénom, na diagnostiku matky sa použije RNHA s lyofilizovanými protilátkami proti erytrocytom, test na lýzu morovým bakteriofágom a infikovanie čistou kultúrou Guinea ošípané. Citlivosť na antibiotiká určite určíte diskovou difúznou metódou na agare alebo metódou sériových riedení v bujóne Čistá kultúra sa naočkuje do Giss média, aby sa určili enzymatické vlastnosti. Pôvodca moru rozkladá glukózu, manitol, galaktózu, levulózu, xylózu na kyselinu, niektoré kmene fermentujú arabinózu a glycerol. Y je potrebné rozlišovať. pestis z iných Yersinia. Počiatočné znaky pri identifikácii pôvodcu moru sú aglutinácia antisérovej kultúry, lýza morovým bakteriofágom a pozitívny biologický test.

biologický výskum

Je potrebný biologický výskum v diagnostike moru. Biologická vzorka sa umiestni s primárnym materiálom aj s izolovanou čistou kultúrou. Morčatá sa používajú na infekciu, menej často - biele myši. Ak materiál nie je kontaminovaný sprievodnou mikroflórou (krv, bubo bodkovaný), podáva sa subkutánne alebo intraperitoneálne. Ak je materiál kontaminovaný cudzou flórou, infekcia sa vykonáva vtieraním emulgovaného materiálu do depilovanej a skarifikovanej kože brucha morčiat. Pri pozitívnom biologickom teste zvieratá uhynú za 2 až 3 dni, keď sú infikované brušná dutina, alebo po 5-7 dňoch - pri aplikácii materiálu na pokožku. Mŕtve ošípané sa otvoria, študujú sa patoanatomické zmeny: vaskulárna hyperémia, zväčšenie pečene, sleziny, lymfatických uzlín, prítomnosť nekrotických oblastí na ich povrchu a na reze. Z krvi a parenchymatóznych orgánov sa vyrábajú šmuhy a odtlačky, výsev sa vykonáva na živných pôdach. V náteroch sa nachádza obrovské množstvo bipolárne zafarbených gramnegatívnych vajcovitých tyčiniek. Čisté kultúry izolované zo zvierat sa identifikujú rovnakým spôsobom ako kultúry po bakteriologickom vyšetrení. Mŕtvoly morčiat, ako študovaných divých hlodavcov, sa ponoria do 5% roztoku lyzolu a potom sa spália.

Sérologická diagnostika

Sérologickú diagnózu moru nedostali široké uplatnenie. IN V poslednej dobe RNGA sa vykonáva z erytrocytových diagnostik, na ktorých sa uskutočňuje adsorbovaný kapsulárny antigén Y pestis. Za diagnostický titer sa považuje riedenie séra 1:40. Vo všeobecnosti sa sérologické reakcie zvyčajne vykonávajú na retrospektívnu diagnostiku a počas hromadných epizootických vyšetrení hlodavcov v endemických ložiskách moru.

Zrýchlené diagnostické metódy

Navrhnuté expresné metódy na detekciu patogénu moru pomocou fluorescenčných protilátok, v RNGA pomocou diagnostických erytrocytov protilátok. Umožňujú detekovať Y. pestis v testovanom materiáli už po 2 hodinách.K zrýchleným diagnostickým metódam patrí aj precipitačná reakcia na štandardných agarových platniach so sérom proti moru a metóda rýchleho rastu patogénu moru na elektívnych médiách pomocou bakteriofága . Na tento účel sa 0,2 až 0,3 ml materiálu vysije do 4 skúmaviek s médiom v krabici a 0,1 ml agaru do Petriho misky. Do jednej zo skúmaviek sa pridá 0,2 až 0,3 ml morového fágu. Plodiny sa inkubujú pri teplote 28 °C počas troch hodín. Zo skúmaviek, v ktorých je viditeľný rast, sa pripravia 2 nátery zafarbené Gramovou a metylénovou modrou. O pozitívny výsledok nátery ukazujú reťazce gramnegatívnych vajcovitých tyčiniek sfarbených bipolárne. V skúmavke s fágom nie je žiadny rast. Zo skúmaviek s rastom 0,4 ml sa materiál vstrekne do brušnej dutiny niekoľkých myší. Po 8-10 hodinách sa skúmajú agarové platne, aby sa zistil rast patogénu moru.Po 10-12 hodinách sa myši porazia, exsudát a materiál z parenchýmových orgánov sa z nich vysejú do skúmaviek s polotekutým agarom a vyšetrí sa v rovnakým spôsobom, ako je opísané vyššie. Predbežný výsledok sa teda získa po 4 hodinách a konečný po 18-20 hodinách.Na retrospektívnu diagnostiku moru sa používa alergický test s pestínom.

Prevencia a liečba

Špecifická profylaxia sa uskutočňuje očkovaním živou alebo chemickou vakcínou. Prvý sa pripravuje z kmeňa EV. V Ruskej federácii sa uplatňuje živá vakcína. Po jednej injekcii trvanie imunity dosiahne 6 mesiacov. Na liečbu sa používa streptomycín a iné antibiotiká.
  1. Klasifikácia: FAN palice, s. Enterobacteriaceae, p. Yersinia, c. Y. enterocolitica.
  2. Morfológia: Gr-, tyčinky, má peritrichiu a pili, mikrokapsula, spórotvorná, pohyblivá, sfarbená bipolárna
  3. Druh potravy: chemoorganotrofy
  4. Biologické vlastnosti: a) dobre rastú na jednoduchých živných pôdach b) fermentujú hl, sacharózu, vykazujú aktivitu pektinázy
  5. AG štruktúra: O-AG, N-AG.
  6. Faktory patogenézy a patogenéza:

A) adhezíny (pili - spájajú sa s fibronektínom, proteínmi vonkajšej membrány)

B) invazíny – uľahčujú interakciu s črevným epitelom

C) fosfatáza a proteínkináza – narúšajú funkciu makrofágov

D) enterotoxín a endotoxín (LPS)

Prienik do distálnej sliznice tenké črevo→ rozmnožovanie v Peyerových plátoch → prienik do mezenterického l. r. (mezenterická lymfadenitída) → bakteriémia (generalizácia infekcie) → prienik do orgánov a tkanív (pečeň, slezina, lymfatické uzliny). V prípade neúplnej fagocytózy je možná predĺžená perzistencia MB. V dôsledku toho sa môže vyvinúť sekundárna ohnisková forma s poškodením akéhokoľvek orgánu (srdce, pečeň, kĺby, pľúca) alebo výskytom exacerbácií a relapsov. Veľký význam majú alergickú zložku a autoimunitné procesy.

  1. Klinické prejavy:
  2. Inkubačná doba je asi 3 dni. Choroba začína akútne. Príznaky všeobecnej intoxikácie. Subfebril telesnej teploty. Často sa do popredia dostávajú príznaky poškodenia tráviaceho traktu (bolesti brucha, nevoľnosť, vracanie, hnačka). Niekedy sa na koži objaví vyrážka. Objavujú sa príznaky sekundárneho poškodenia orgánov.
  3. Imunita: nedostatočne preštudovaná, na začiatku ochorenia prevládajú GMO.
  4. Epidemiológia. Zdrojom sú chorí ľudia a zvieratá, nosiči. OPP - alimentárne. Odolné voči nízkym teplotám (násobne aj v chladničke). Umierajú pri sušení, vystavení slnečnému žiareniu a rôznym chemických látok(chlóramín, alkohol), varom.
  5. Prevencia: špecifická nie je vyvinutá.
  6. Liečba: AB široký rozsah akcie.
  7. Diagnostika:

Metóda: bakteriologická.

Materiál na výskum: v črevnej forme je patogén izolovaný z výkalov; s appendicular - z mezenterických lymfatických uzlín a krvi; so septikom - z výkalov a krvi.

Fáza 1: materiál sa naočkuje slučkou alebo tampónom na jedno z hustých voliteľných médií (Endo, Ploskireva, bizmut-sulfitagar). Plodiny sa inkubujú 24 hodín pri 37 °C a potom ďalších 24 hodín pri 20-22 °C.

Súčasne sa výkaly naočkujú do jedného z akumulačných médií (MPB alebo peptónová voda). Krv sa naočkuje v pomere 1:10 len do akumulačného média. Inokulácie sa umiestnia pri 4-5 °C a inkubujú sa až 30 dní, pričom sa periodicky vysievajú každých 3-5 dní na husté elektívne médiá. Y. enterocolitica pri nízkych teplotách sa v týchto prostrediach množia, zatiaľ čo Salmonella, Shigella, coli, protey sa nerozmnožujú.

2. fáza: plodiny sa skúmajú na hustých médiách a vyberú sa podozrivé kolónie (guľaté, sivasté na Endo a Ploskirev a hnedé na bizmut-sulfitagare), z kolónií sa vyrobia Gramove stery a v prítomnosti gramových tyčiniek, sú skrínované na Resselovom médiu.

3. fáza: keď sa farba stĺpca na Resselovom médiu zmení v dôsledku rastu, urobí sa na ňom Gramov náter na čistotu kultúry a študujú sa nasledujúce testy:

4. fáza: zohľadnenie výsledkov a vydanie konečnej odpovede. Pri sérologickej metóde výskumu sa krv odoberá na konci prvého a začiatku tretieho týždňa. Rozsiahla aglutinačná reakcia je nastavená pomocou autostrainov a párových sér pacienta. Pri pozitívnom výsledku sa zaznamená významné zvýšenie titra protilátok.

5. Yersinia

Rod Yersinia obsahuje sedem druhov, z ktorých Y. pestis (pôvodca moru), Y. pseudotuberculesis (pôvodca pseudotuberkulózy), Y. enterocolitica, pôvodca akútnych črevných infekcií, črevnej yersiniózy, sú pre človeka patogénne .

Y. enterocolitica sú gramnegatívne pohyblivé tyčinky, ktoré netvoria spóry ani kapsuly. Pestuje sa na jednoduchých živných pôdach pri teplote 20–26 °C.

Biochemické vlastnosti:

1) fermentovať sorbózu, inozitol s tvorbou kyseliny;

2) tvorí ureázu.

Podľa špecifickosti sú O-antigény rozdelené do 30 sérovarov. Ochorenie najčastejšie spôsobujú sérovary O3 a O9.

Yersinia je odolná a schopná rozmnožovania vonkajšie prostredie, vydržať nízke teploty. Schopný množiť sa v mlieku, zelenine, ovocí, zmrzline pri nízkych teplotách. V otvorených vodách prežívajú a rozmnožujú sa.

Yersinióza je zoonotické ochorenie. Zásobník – rôzne hlodavce, ktoré vylučujú baktérie výkalmi a močom. Cesta infekcie je alimentárna. Choroby sa zaznamenávajú vo forme ohnísk alebo sporadických prípadov.

Infekcia sa môže realizovať rôznymi spôsobmi: od asymptomatického nosičstva a ľahkých foriem až po ťažké a generalizované, septické (častejšie u starších ľudí trpiacich chronickými ochoreniami).

V patogenéze existujú štyri fázy.

1. Implementácia. Yersinia má tropizmus pre epitelové bunky tenké črevo prenikajú do lymfatického aparátu.

2. Enterálne. Reprodukcia je sprevádzaná smrťou mikroorganizmov, uvoľňovaním endotoxínu. Klinicky sa prejavuje fenoménmi enterokolitídy a lymfadenitídy. V tejto fáze môže proces skončiť, potom typický črevná infekcia. Ak dôjde k prerazeniu lymfatickej bariéry, nasleduje tretia fáza.

3. Bakteriémia: vzniká sepsa a šarlach.

4. Sekundárne ohniskové a alergické prejavy. Hepatitída, artritída, žihľavka sú registrované. Postihnutý môže byť akýkoľvek orgán.