Imunohistochémia (IHC) je metóda na zistenie presnej lokalizácie konkrétnej bunkovej alebo tkanivovej zložky (antigénu) jej naviazaním na značené protilátky. Na uskutočnenie imunohistochemickej štúdie sa používajú fragmenty nádorového tkaniva odstránené chirurgicky alebo získané ako výsledok biopsie. Štúdia IHC umožňuje určiť typ zle diferencovaného nádoru, jeho histogenetickú príslušnosť, prítomnosť špecifických hormonálnych receptorov a iných signálnych molekúl v nádorovom tkanive. Imunohistochémia je žiadaná v diferenciálnej diagnostike nádorov, určovaní zdroja metastáz s nejasným primárnym zameraním, hodnotení hormonálneho stavu nádoru, imunofenotypizácii nádorov, určovaní prognostických faktorov nádorového procesu a pre adekvátny výber chemoterapeutického režimu. .
Onkoproteín HER2/neu (Human Epidermal growth factor Receptor 2) je transmembránový glykoproteín, ktorý je členom rodiny receptorov epidermálneho rastového faktora (EGFR). U ľudí sa HER2/neu receptor deteguje v normálnych tkanivách, ale jeho nadmerná expresia je charakteristická len pre nádorové bunky. Hlavným mechanizmom na zvýšenie množstva HER2/neu je amplifikácia génu HER2/neu, ktorý ho kóduje. Stanovenie estrogénových receptorov (ER) a progesterónu (PR) v nádorovom tkanive pri rakovine prsníka sa používa na posúdenie citlivosti nádoru na hormonálne lieky a výber terapeutického režimu.
Biomateriál: mikropreparáty (blok + sklo).
Metóda analýzy: imunohistochemický.
Záver. Intenzita zafarbenia bunkových membrán sa hodnotí na stupnici: 0, 1+, 2+, 3+. Pri 0 a 1+ je karcinóm prsníka HER2-negatívny, pri 3+ je HER2-pozitívny. V prípade 2+ je vhodné stanoviť amplifikáciu HER2 génu metódami in situ hybridizácie (CISH) (pozri 220018). Prítomnosť expresie na estrogénových a progesterónových receptoroch je uvedená v bodoch a v súlade so získaným výsledkom je vydaný záver o závažnosti expresie.
Nárokovaná skupina vynálezov sa týka medicíny, menovite onkológie, a môže sa použiť na liečbu rakoviny prsníka, ktorá je negatívna pre tri receptory, ako aj na výrobu kombinácie na jej liečbu. Na tento účel sa podáva katiónový lipozomálny prípravok obsahujúci aspoň jeden katiónový lipid, antimitotické činidlo a aspoň jeden neutrálny a/alebo aniónový lipid v jednom alebo viacerých cykloch v celkovom množstve účinnom na liečbu subjektu. Pri použití týchto vynálezov sa dosiahne účinnejšia liečba rakoviny vďaka synergickému účinku, keď sa paklitaxel podáva v lipozomálnych a nelipozomálnych formách. 2 n. a 16 z.p., 1 chor., 3 pr.
Predchádzajúci čl
[0001] Predložený vynález sa týka použitia lipozomálneho prípravku na výrobu farmaceutickej kompozície a použitia takejto kompozície na liečbu rakoviny prsníka s negatívnym trojitým receptorom.
Systémová liečba karcinómu prsníka v súčasnosti ponúka tri hlavné rôzne metódy terapeutickej intervencie a možnosti ich využitia rôzne možnosti liečba v podstate závisí od stavu receptora pacienta (Bernard-Marty et al., 2004). Endokrinné a biologické terapie vyžadujú prítomnosť vhodných receptorov na rakovinových bunkách, zatiaľ čo cytotoxická chemoterapia nezávisí od týchto špecifických receptorov.
U pacientok s rakovinou prsníka s pozitívnymi hormonálnymi receptormi je zvyčajne preferovanou liečbou endokrinná terapia alebo ich kombinácia (Bernard-Marty et al., 2004; Grandishar, 2004). V prítomnosti estrogénových receptorov (ER) a/alebo progesterónových receptorov (PgR) bola miera odpovede na liečbu vyššia ako 80 %. Vo všeobecnosti majú postmenopauzálne pacientky zvýšenú expresiu ER a PgR v porovnaní s premenopauzálnymi pacientkami.
Zlatým štandardom endokrinnej terapie je selektívny modulátor ER tamoxifén. Inhibuje väzbu estrogénu na estrogénový receptor, čím narúša sériu bunkových mechanizmov, ktoré regulujú bunkovú replikáciu. Napriek dobrej tolerancii vo väčšine prípadov tamoxifén spôsobuje množstvo nežiaducich reakcií. Napriek tomu, že tento liek má celkovo vysokú mieru odozvy, u mnohých pacientov dochádza k recidíve ochorenia a vzniká rezistencia na liek. Rezistencia môže súvisieť so zmenou interakcie medzi tamoxifénom a estrogénovým receptorom.
Na boj proti liekovej rezistencii boli vyvinuté alternatívne endokrinné terapie, ktoré spochybňujú úlohu tamoxifénu (Bernard-Marty et al., 2004; Grandishar, 2004). Inhibítory aromatázy priamo interferujú s biosyntézou estrogénu inhibíciou enzýmu aromatázy, ktorý premieňa androstendión na estradiol. najnovšej generácie Tieto inhibítory zahŕňajú nesteroidné liečivá, ako je letrozol, anastrozol a vostrozol, a steroidné liečivá, ako je exemestan. Vynikajúca bezpečnosť a miera odozvy tejto triedy liekov urobili z inhibítorov aromatázy štandardnú endokrinnú terapiu na liečbu metastatického karcinómu prsníka u žien po menopauze.
Fulvestrant s antiestrogénnou aktivitou sa vyhýba problémom so stabilitou zaznamenaným pri tamoxiféne v dôsledku odlišného mechanizmu účinku. Viaže ER inhibíciou väzby DNA a znižuje koncentráciu ER podporou jeho deštrukcie.
U ER- a PgR-pozitívnych premenopauzálnych žien endokrinné terapie iné ako tamoxifén zahŕňajú chirurgickú ovariálnu abláciu alebo radiačnú terapiu a terapiu analógmi hormónu uvoľňujúceho luteinizačný hormón (LHRH) (Bernard-Marty et al., 2004). U týchto pacientok sú vaječníky hlavným zdrojom syntézy estrogénu a ovariektómia bola počiatočnou liečbou rakoviny prsníka. Aby sa predišlo nežiaducim reakciám počas ovariálnej ablácie operáciou alebo ožarovaním, funkcia vaječníkov môže byť potlačená analógmi LHRH. Analógy LHRH, ako je goserelín, leuprolid a triptorelín, potláčajú produkciu ovariálneho estrogénu inhibíciou uvoľňovania gonadotropínov hypofýzou prostredníctvom ich antagonistických účinkov na receptor GnRH (gonadotropín) (Prowell a Davidson, 2004).
S rastúcim porozumením a intenzívnym výskumom v oblasti biológie rakoviny prsníka v posledných rokoch sa objavilo niekoľko nových cieľov protirakovinovej terapie. Spomedzi nich bol HER-2/neu identifikovaný ako hlavný cieľ. Receptor endotelového rastového faktora typu 2 (HER-2) je zosilnený a/alebo nadmerne exprimovaný v približne 30 % nádorov prsníka (Slamon et al., 1987) a je zameraný na inhibičnú protilátku trastuzumab. Pretože trastuzumab je jedným z niekoľkých činidiel, ktoré preukázateľne zvyšujú celkové prežívanie pri metastázujúcej rakovine prsníka, hodnotenie stavu HER-2 sa stalo nevyhnutným pre optimálne účinnú liečbu(Bernard-Marty a kol., 2004).
Trastuzumab je uznávaný ako liek druhej línie na metastatický karcinóm prsníka u pacientok s HER-2, ktoré dostali jeden alebo viac režimov chemoterapie, alebo ako liek prvej línie v kombinácii s paklitaxelom. Trastuzumab sa zvyčajne používa až do progresie ochorenia. Vo všeobecnosti je dobre tolerovaný, ale najvýznamnejším vedľajším účinkom je kongestívne zlyhanie srdca. Použitie trastuzumabu sa neustále hodnotí rôzne druhy mono a kombinovaná liečba v rôznych populáciách pacientov a liečebných režimoch.
Stav receptora ER, PgR a HER-2 možno určiť štandardnými imunohistochemickými (IHC) alebo enzýmovými testami (Chebil a kol., 2003; Yamashita a kol., 2006; Schaller a kol., 2001). Stav HER-2 môže byť tiež hodnotený génovou amplifikáciou fluorescenčnou in situ hybridizáciou (FISH) (Kallioniemi et al., 1992).
Vo všeobecnosti sa liečba v závislosti od stavu receptora u pacientov ukázala ako veľmi účinná pri liečbe rakoviny prsníka.
Bohužiaľ, asi 15 % karcinómov prsníka je negatívnych na ER, PgR a HER-2. V týchto prípadoch je prognóza extrémne zlá s mierou recidívy 80 % a mediánom prežitia iba 6 mesiacov.
Pre pacientov negatívnych na ER, PgR a HER-2, ako aj pre pacientov s ochorením rezistentným na endokrinnú liečbu je chemoterapia jedinou možnosťou liečby. Chemoterapeutikami bežne používanými pri rakovine prsníka sú trieda antracyklínov, trieda taxánov a v menšom rozsahu antimetabolity, napr. kapecitabín, gemcitabín, alkylačné činidlá a vinca alkaloidy. Tieto lieky sa používajú v súlade s dvoma hlavnými liečebnými režimami. Tieto lieky môžu byť použité ako nezávislými prostriedkami sekvenčne alebo sa môžu použiť v kombinovanej terapii. Samozrejme, tieto dve možnosti liečby možno do určitej miery kombinovať.
Ukázalo sa, že antracyklíny, a najmä doxorubicín a epirubicín, sú účinnými látkami pri liečbe rakoviny prsníka a kombinované antracyklínové režimy sú liečbou prvej línie u pacientov, ktorí nedostávali antracyklíny v adjuvantnej terapii. Jednoduchá kombinovaná liečba pozostáva napríklad z doxorubicínu/epirubicínu plus cyklofosfamidu, doxorubicínu/epirubicínu plus cyklofosfamidu a 5-fluóruracilu alebo kombinácie antracyklínov a kapecitabínu alebo gemcitabínu (O'Shaughnessy, 2005).
Avšak s rutinným používaním antracyklínov v počiatočných štádiách liečby rakoviny prsníka sa zvyšuje pravdepodobnosť vzniku rezistencie na antracyklíny pri rakovine prsníka (Bernard-Marty et al., 2004).
Podávanie taxánov, paklitaxelu a docetaxelu počas liečby, poskytlo ďalšiu príležitosť na kontrolu ochorenia prvej a druhej línie. Paklitaxel má jedinečný mechanizmus účinku a široké spektrum antiproliferatívnej aktivity, pretože sa viaže na mikrotubuly, podporuje polymerizáciu tubulínu a stabilizuje zostavené mikrotubuly. V dôsledku toho paklitaxel blokuje bunkový cyklus v profáze, čo vedie k akumulácii buniek vo fáze G2/M.
Nanešťastie má paklitaxel extrémne nízku rozpustnosť vo vode, čo sťažuje získanie vhodného lieková forma. Paklitaxel je v súčasnosti formulovaný a podávaný vo vehikuloch vrátane Cremophoru EL (polyetoxylovaný Ricínový olej) a etanol v pomere 50:50 (v/v). Tento roztok sa pred podaním pacientovi zriedi v pomere 1:10 vo fyziologickom roztoku. Avšak, rôzne ťažké Nežiaduce reakcie kompozície Cremophor EL, ako sú napríklad reakcie precitlivenosti a hypersenzitivity, nefrotoxicita a neurotoxicita.
Patenty US 5 648 090, 5 424 073 a 6 146 659 (Rahman a kol.) opisujú paklitaxel zapuzdrený v lipozómoch na spôsob liečby rakoviny u cicavcov. Tieto patenty opisujú spôsob podávania terapeuticky účinného množstva farmaceutickej kompozície lipozómov hostiteľovi, ktorý zahŕňa materiál tvoriaci lipozóm, kardiolipín a činidlo, ako je paclitaxel alebo antineoplastický derivát paclitaxelu, alebo ich zmes, s farmaceuticky prijateľný excipient.
Z patentu US 5 837 283 je známe, že katiónové lipozómy sú prednostne zacielené na angiogénne endotelové bunky v pevných nádoroch. Z WO 2005/0309533 (Teifel a kol.) je známe, že liečba paklitaxelom zapuzdreným v katiónových lipozómoch môže byť účinná pri rôznych typoch rakoviny. Tento dokument opisuje použitie paklitaxelových katiónových lipozómových kompozícií u pacientov trpiacich melanómom, rakovinou prostaty, pankreas, gastrointestinálny trakt hrubého čreva a konečníka a mliečnych žliaz. Opísané je aj použitie kompozícií paklitaxelových katiónových lipozómov v rôznych experimentálnych modeloch rakoviny pankreasu, sarkómu maternice, karcinómu hrubého čreva a spinocelulárneho karcinómu hlavy a krku.
Lipozomálne kompozície pre antracyklínové prípravky sú tiež známe. Doxorubicín bol zapuzdrený v nenabitých pegylovaných alebo nepegylovaných lipozómoch na liečbu rakoviny prsníka. Tieto kompozície boli použité v prvej línii (Chan et al., 2004) a druhej línii (Keller et al., 2004) liečebných režimoch rakoviny prsníka.
V súhrne môžeme povedať, že väčšina možností liečby rakoviny prsníka závisí od stavu receptorov pacientok. Najmä endokrinné typy liečby pacientov s podskupinou negatívnou na tri receptory sú neúčinné. Možnosti chemoterapie sú obmedzené a často sa zaznamenáva rezistencia na existujúce režimy podobné antracyklínom. Preto v oblasti medicíny existuje neuspokojená potreba vyvinúť nové liečebné postupy pre túto indikáciu.
Hlavným cieľom predkladaného vynálezu je teda zlepšiť liečbu rakoviny prsníka, negatívnej pre tri receptory, najmä u pacientov s rezistenciou na liečbu antracyklínmi.
Opis vynálezu
Tento problém je vyriešený novou farmaceutickou kompozíciou na liečbu rakoviny prsníka s negatívnym trojitým receptorom. Kompozícia sa môže použiť v rôznych režimoch alebo ako mono- alebo kombinovaná terapia.
Prvý aspekt tohto vynálezu sa týka použitia katiónového lipozomálneho prípravku obsahujúceho aspoň jeden katiónový lipid, antimitotikum a prípadne aspoň jeden neutrálny a/alebo aniónový lipid, na prípravu farmaceutickej kompozície na liečbu trojitej rakovina prsníka s negatívnym receptorom u ľudí alebo zvierat.
Vo výhodnom uskutočnení katiónový lipozomálny prípravok obsahuje aspoň jeden katiónový lipid v množstve od približne 30 % mol. do približne 99,9 % mol., antimitotické činidlo v množstve aspoň približne 0,1 % mol. a voliteľne aspoň jeden neutrálny a/alebo aniónový lipid v množstve od približne 0 % mol. do približne 70 % mol.
Antimitotické činidlo je výhodne paklitaxel alebo jeho derivát, ako je docetaxel. Ďalšie vhodné antimitotické činidlá sú antracyklíny, výhodne doxorubicín alebo epirubicín, talidomid, vinka alkaloidy ako vinorelbín alebo vinkristín, ďalšie činidlá interagujúce s mikrotubulami, ako je diskodermolid, laulimalid, izolaulimalid, eleterobín, sarkodiktín A a B.
Katiónová lipozomálna formulácia sa môže použiť ako monoterapia alebo v kombinovanej terapii, ako je kombinovaná terapia s terapeuticky účinnou dávkou aspoň jednej ďalšej účinnej látky, ktorá sa môže podávať ako formulácia, ktorá nie je katiónovou lipozomálnou formuláciou, ako napr. - lipozomálny prípravok. Ďalšou účinnou látkou môže byť chemoterapeutická látka, ako je antracyklín a/alebo dodatočne taxán, ako je paklitaxel.
Na liečbu rakoviny prsníka s negatívnym trojitým receptorom prihlasovatelia predpokladajú, že použitie protinádorového činidla, ako je taxán začlenený do lipozómového katiónu, poskytuje zlepšenú rovnováhu medzi klinickou odpoveďou a vedľajšie účinky v porovnaní s použitím antimitotického činidla v inom než lipozomálnom prípravku. Tento účinok nebolo možné predpovedať na základe doterajšieho stavu techniky, pretože katiónové lipozómy cielia liečivo na nádorové endotelové bunky, ktoré tvoria len malú časť nádoru.
Okrem toho sa prihlasovatelia domnievajú, že kombinovaná terapia s antimitotickým činidlom v lipozomálnej formulácii a prídavným činidlom, ako je antimitotické činidlo v inej formulácii, než je jej lipozomálna formulácia, má zlepšený pomer klinickú odpoveď a vedľajšie účinky v porovnaní s použitím samotného nelipozomálneho prípravku pri použití v podobných kumulatívnych dávkach. Takýto synergický účinok nebolo možné predpovedať na základe doterajšieho stavu techniky. Ako je uvedené vyššie, rôzne kompozície sú zamerané na liečivá na rôzne miesta v nádore. Nedalo sa predpovedať, že lieky s rovnakým typom účinku, ako sú antimitotiká, budú vykazovať synergický účinok pri pôsobení na rôzne bunky v nádore.
Výhodné príklady použitia farmaceutickej kompozície obsahujúcej paclitaxel v katiónových lipozómoch na liečbu rôznych nádorov u ľudí sú opísané vo WO 2005/0309533 (Teifel et al.).
Osobitnou výhodou tohto vynálezu je nový spôsob liečenia podtypu rakoviny prsníka, pre ktorý existovali len obmedzené možnosti liečby kvôli jeho biologickým vlastnostiam. Malo by sa však poznamenať, že vyššie uvedená kombinovaná terapia sa môže použiť aj na iné lekárske indikácie, napríklad na liečbu hyperproliferatívnych porúch, ako sú angiogénne a/alebo vaskulárne poruchy alebo rakovina všeobecne.
Zvláštnou výhodou kombinovanej terapie je zníženie vedľajších účinkov účinných látok. Preto je veľkou výhodou zvýšiť rozsah dávok používaných chemoterapeutík podávaním kombinácie liekov v lipozomálnej a nelipozomálnej forme bez zvýšenia vedľajších účinkov v porovnaní s tradičným spôsobom liečby pacientov s rakovinou s negatívnymi tromi receptormi alebo inými poruchami. , kombinovaná liečba zvyšuje účinnosť liečby a znižuje vedľajšie účinky.účinky.
a) katiónový lipozómový prípravok obsahujúci aspoň jeden katiónový lipid, antimitotické činidlo a prípadne aspoň jeden neutrálny a/alebo aniónový lipid a
b) nelipozomálny prípravok obsahujúci antimitotické činidlo na súčasné, oddelené a/alebo postupné podávanie človeku alebo zvieraťu.
Ďalší aspekt vynálezu sa týka kombinácie
a) katiónový lipozomálny prípravok, ako je opísaný vyššie, ktorý výhodne obsahuje aspoň jeden katiónový lipid v množstve od približne 30 % mol. do približne 99,9 % mol., antimitotické činidlo, ako je napríklad taxán, v množstve aspoň približne 0,1 % mol. a prípadne aspoň jeden neutrálny a/alebo aniónový lipid v množstve od asi 0 % mol. do asi 70 % mol., a
b) nelipozomálny prípravok obsahujúci antimitotikum,
na súčasné, oddelené a/alebo postupné podávanie do ľudského alebo zvieracieho tela. Uprednostňuje sa liečba rakoviny.
Ďalší aspekt vynálezu sa týka spôsobu liečenia rakoviny prsníka negatívneho na trojitý receptor, ktorý zahŕňa podávanie katiónového lipozómového prípravku obsahujúceho aspoň jeden katiónový lipid, antimitotické činidlo a prípadne aspoň jeden neutrálny a/alebo aniónový lipid, a výhodne obsahujúci aspoň jeden katiónový lipid v množstve od asi 30 % mol. do asi 99,9 % mol., antimitotické činidlo, ako je taxán, v množstve aspoň asi 0,1 % mol. lipidu v množstve od približne 0 % mol. do približne 70 % mol., v terapeuticky účinnej dávke pre jednotlivca.
Ešte ďalší aspekt vynálezu sa týka spôsobu liečenia hyperproliferatívnej poruchy, ktorý zahŕňa podávanie vyššie opísanej kombinácie v terapeuticky účinnej dávke jedincovi.
Zvlášť výhodné uskutočnenia vynálezu týkajúce sa katiónových lipozomálnych formulácií, kombinácií katiónovej lipozomálnej formulácie a nelipozomálnej formulácie na liečbu trireceptorovo negatívnej rakoviny prsníka sú konkrétnejšie opísané v nasledujúcom opise a príkladoch.
„Približne“ v kontexte hodnôt množstva označuje strednú odchýlku najviac ± 20 %, výhodne ± 10 % indikovanej hodnoty. Napríklad množstvo katiónového lipidu približne 30 % mol. znamená 30 % mol. ± 3 % mol. vzhľadom na celkovú molaritu lipidu/amfifilu.
"Aktívna látka" sa týka látky, ktorá je terapeuticky účinná.
"Nosič" znamená riedidlo, adjuvans, excipient alebo excipient, ktorý je vhodný na podávanie diagnostického alebo terapeutického činidla. Tento výraz sa tiež týka farmaceuticky prijateľnej zložky (zložiek), ktorá obsahuje, tvorí komplexy s látkou alebo je s ňou inak spojená, aby sa uľahčila preprava takejto látky na jej zamýšľané cieľové miesto. Nosiče zahŕňajú tie, ktoré sú v odbore známe, ako sú lipozómy, polyméry, lipidové komplexy, sérový albumín, protilátky, cyklodextríny a dextrány alebo iné supramolekulárne agregáty.
"Kombinácia" alebo "spoločné podávanie" sa týka režimu, ktorý je synchrónny, sériový, prekrývajúci sa, striedajúci sa, súbežný alebo akýkoľvek iný liečebný režim, v ktorom sa rôzne lieky alebo terapeutické činidlá podávajú ako súčasť rovnakého liečebného režimu, kurzu alebo alebo v ktorých sa časové obdobia, počas ktorých sa podávané rôzne liečivá alebo terapeutické činidlá nejakým iným spôsobom prekrývajú.
Termín "derivát" sa týka zlúčeniny odvodenej od inej zlúčeniny, pričom si zachováva svoje všeobecné štruktúrne znaky. Deriváty možno získať napríklad chemickou funkcionalizáciou alebo derivatizáciou.
Výrazy „lipozóm" a „lipozómový prípravok" sa v tejto špecifikácii používajú ako synonymá. "Lipozóm" sa týka mikroskopického guľovitého vezikula viazaného na membránu (približne 50-2000 nm v priemere). Termín "lipozóm" zahŕňa akýkoľvek kompartment uzavretý v lipidovej dvojvrstve. Lipozómy sa tiež nazývajú lipidové vezikuly. Na vytvorenie lipozómu zahŕňajú lipidové molekuly predĺžené nepolárne (hydrofóbne) časti a polárne (hydrofilné) časti. Hydrofóbne a hydrofilné časti molekuly sú výhodne umiestnené na dvoch koncoch predĺženej molekulovej štruktúry. Keď sú takéto lipidy rozptýlené vo vode, spontánne vytvárajú dvojvrstvové membrány nazývané lamely. Laminály pozostávajú z dvoch jednovrstvových vrstiev lipidových molekúl, ktorých nepolárne (hydrofóbne) povrchy smerujú k sebe a polárne (hydrofilné) povrchy smerujú k vodnému prostrediu. Membrány tvorené lipidmi obsahujú časť vodnej fázy podobným spôsobom ako bunková membrána, obsahujúci obsah bunky.
Lipozómová dvojvrstva má teda podobnosť s bunkovou membránou bez proteínových zložiek prítomných v bunkovej membráne. Pojem "lipozóm", ako sa používa v predloženom vynáleze, zahŕňa multilamelárne lipozómy, ktoré majú všeobecne priemer v rozsahu približne 1 až 10 mikrónov a sú zložené z približne 200 koncentrických lipidových dvojvrstvových štruktúr rozptýlených vrstvami vodnej fázy, a tiež Zahrňuje jednolamelárne vezikuly, ktoré pozostávajú z jedinej lipidovej vrstvy a vo všeobecnosti majú priemer v rozmedzí od asi 20 do asi 400 nanometrov (nm), od asi 50 do asi 300 nm, od asi 300 do asi 400 nm, od asi 100 do asi 400 nm 200 nm a bubliny možno získať vystavením multilamelárnych lipozómov ultrazvuku, extrúziou pod tlakom cez membrány s pórmi určitej veľkosti alebo homogenizáciou za vysoký tlak. Výhodné lipozómy by boli jednolamelárne vezikuly, ktoré majú jednu lipidovú vrstvu a priemer v rozsahu približne 25-400 nm.
Výraz "taxán", ako sa tu používa, sa týka triedy antineoplastických činidiel, ktoré majú mikrotubulový mechanizmus účinku a majú štruktúru, ktorá zahŕňa neobvyklú taxánovú kruhovú štruktúru a stereoskopický bočný reťazec, ktorý je potrebný pre cytostatickú aktivitu. Výraz "taxán" tiež zahŕňa rôzne známe deriváty, vrátane hydrofilných derivátov a hydrofóbnych derivátov. Deriváty taxánu zahŕňajú, bez obmedzenia, deriváty galaktózy a manózy opísané v medzinárodnej patentovej prihláške č. WO 99/18113; piperazino a ďalšie deriváty opísané vo WO 99/14209; deriváty taxánu opísané vo WO 99/09021, WO 98/22451 a US patente č. 6-tio deriváty, ako sú opísané vo WO 98/28288; sulfénamidové deriváty opísané v US patente č. 5821263; a deriváty taxolu opísané v US patente č.
"Paclitaxel" (ktorý tu treba chápať zahŕňa analógy, formulácie a deriváty, ako je napríklad docetaxel, taxotere (formulácia docetaxelu), 10-deacetylové analógy paclitaxelu a 3"N-desbenzoyl-3"N-terc- butoxykarbonylové analógy paclitaxelu) možno ľahko pripraviť s použitím techník známych odborníkom v odbore (pozri tiež WO 94/07882, WO 94/07881, WO 94/07880, WO 94/07876, WO 93/23555, WO 93/10076 US Pat. Louis, Mo. (T7402 z Taxus brevifolia; alebo T-1912 z Taxus yannanensis). Malo by byť zrejmé, že paclitaxel označuje nielen konvenčnú chemicky dostupnú formu paclitaxelu, ale aj analógy (napr. taxoter, ako je uvedené vyššie) a konjugáty paclitaxelu (napr. paclitaxel-PEG, paclitaxeldextrán alebo paclitaxel-xylóza).
"Terapeuticky účinná dávka" je dávka aktívneho činidla alebo farmaceutickej kompozície, ktorá je dostatočná na dosiahnutie požadovaného terapeutického výsledku u jednotlivca, ktorý dostáva liečbu.
Pojem "zeta potenciál" sa týka nameraného elektrického potenciálu častice, ako je lipozóm, meraný prístrojom, ako je Zetasizer 3000 s použitím laserovej Dopplerovej mikroelektroforézy za určitých podmienok. Zeta potenciál popisuje potenciál na hranici medzi objemom roztoku a oblasťou hydrodynamického šmyku alebo difúznej vrstvy. Tento výraz je synonymom pre „elektrokinetický potenciál“, pretože ide o potenciál častíc, ktorý pôsobí zvonku a je zodpovedný za elektrokinetické správanie častice.
Vo všetkých prípadoch je jednotka mg / m 2 b.t. alebo jednoducho mg/m2 označuje mg aktívneho činidla, napr. paklitaxelu, na m2 povrchu ľudského tela (tv.).
Výhodné katiónové lipidy lipozomálnej formulácie sú N-N,N,N-trimetylamóniové soli, napr. metylsulfát (DOTAP). Ďalšie užitočné lipidy pre tento vynález môžu zahŕňať: DDAB, dimetyldioktadecylamóniumbromid; 1,2-diacyloxy-3-trimetylamóniumpropány (vrátane, bez obmedzenia: dioleoyl, dimyristoyl, dilauroyl, dipalmitoyl a distearoyl; na glycerolový hlavný reťazec môžu byť pripojené aj 2 rôzne acylové reťazce); N-N,N-trimetylamín (DODAP); 1,2-diacyloxy-3-dimetylamóniumpropány (vrátane, bez obmedzenia: dioleoyl, dimyristoyl, dilauroyl, dipalmitoyl a distearoyl; na glycerolový hlavný reťazec môžu byť pripojené aj 2 rôzne acylové reťazce); N-N,N,N-trimetylamóniumchlorid (DOTMA); 1,2-dialkyloxy-3-dimetylamóniumpropány (vrátane, bez obmedzenia: dioleyl, dimyristyl, dilauryl, dipalmityl a distearyl; tiež 2 rôzne alkylové reťazce môžu byť pripojené ku glycerolovému hlavnému reťazcu); dioktadecylamidoglycylspermín (DOGS); 3p-cholesterol (DC-Chol); 2,3-dioleoyloxy-N-(2-(spermínkarboxamido)etyl)-N,N-dimetyl-1-propánamíniumtrifluóracetát DOSPA); p-alanylcholesterol; cetyltrimetylamónium bromid (CTAB); diC14-amidín; N-terc-butyl-N"-tetradecyl-3-tetradecylaminopropiónamidín; 14Dea2; N-(alfa-trimetylamónioacetyl)didodecyl-D-glutamát chlorid (TMAG); O,O"-ditradekanoyl-N-(trimetylamónioacetyl)dietanolamín chlorid; 1,3-dioleoyloxy-2-(6-karboxyspermyl)propylamid (DOSPER); N,N,N",N"-tetrametyl-N,N"-bis(2-hydroxyetyl)-2,3-dioleoyloxy-1,4-butándiamóniumjodid; 1-2-alkyl(alkenyl)-3-(2 -hydroxyetyl)imidazolíniumchlorid, ako opísal Solodin a kol. (Solodin a kol., 1995), ako je 1-2-(8(Z)-heptadecenyl-3-(2-hydroxyetyl)imidazolíniumchlorid (DOTIM), 1- -2-pentadecyl-3-(2-hydroxyetyl)imidazolíniumchlorid (DPTIM), kvartérne amóniové deriváty 2,3-dialkyloxypropylu obsahujúce hydroxyalkylovú časť na kvartérnom amíne, ako je opísané napríklad Felgnerom a kol., 1994) ako napríklad: 1,2-dioleoyl-3-dimetylhydroxyetylamónium bromid (DORI), 1,2-dioleyloxypropyl-3-dimetylhydroxyetylamónium bromid (DORIE), 1,2-dioleyloxypropyl-3-dimetylhydroxypropylamónium bromid (DORIE-HP), 1, 2-dioleyloxypropyl-3-dimetylhydroxybutylamóniumbromid (DORIE-HB), 1,2-dioleyloxypropyl-3-dimetylhydroxyfenylamóniumbromid (DORIE-Hpe), 1,2-dimyristyloxypropyl-3-dimetylhydroxyetylamóniumbromid (DMRIE), 1,2-dipalmityloxypropyl- 3-dimety lhydroxyetylamóniumbromid (DPRIE), 1,2-disteryloxypropyl-3-dimetylhydroxyetylamóniumbromid (DSRIE), katiónové estery acylkarnitínu podľa Santaniello et al. [US patent č. 5498633]; katiónové triestery fosfatidylcholínu, t.j. 1,2-diacyl-sn-glycerol-3-etylfosfocholíny, kde uhľovodíkové reťazce môžu byť nasýtené alebo nenasýtené a rozvetvené alebo nerozvetvené, s dĺžkou reťazca C12 až C24, pričom oba acylové reťazce sú voliteľne identické.
Vo výhodnom uskutočnení lipozómová formulácia prípadne obsahuje aspoň jeden neutrálny a/alebo aniónový lipid. Neutrálne lipidy sú lipidy, ktoré majú neutrálny čistý náboj. Aniónové lipidy alebo amfifily sú molekuly, ktoré majú záporný celkový náboj. Môžu byť vybrané zo sterolov alebo lipidov, ako je cholesterol, fosfolipidy, lyzolipidy, lyzofosfolipidy, sfingolipidy alebo pegylované lipidy s neutrálnym alebo negatívnym čistým nábojom. Preto užitočné neutrálne a aniónové lipidy zahŕňajú: fosfatidylserín, fosfatidylglycerol, fosfatidylinozitol (nie je obmedzený na konkrétny cukor), mastné kyseliny, steroly obsahujúce skupinu karboxylovej kyseliny, ako je cholesterol, 1,2-diacyl-sn-glycero-3-fosfoetanolamín vrátane bez obmedzení DOPE, 1,2-diacylglycero-3-fosfocholínov a sfingomyelínu. Mastné kyseliny spojené s glycerolovým hlavným reťazcom nie sú obmedzené na konkrétnu dĺžku alebo počet dvojitých väzieb. Fosfolipidy môžu mať aj dve rôzne mastné kyseliny. Výhodne sú tieto ďalšie lipidy v kvapalnom kryštalickom stave pri teplote miestnosti a sú miešateľné (t.j. môže sa vytvoriť homogénna fáza a nedochádza k žiadnej separácii fáz alebo tvorbe domén) s použitým katiónovým lipidom v pomere, v akom sú použité. Vo výhodnom uskutočnení je neutrálnym lipidom DOPC.
V ešte ďalšom výhodnom uskutočnení lipozómová formulácia prípadne obsahuje neutrálne a/alebo aniónové lipidy, výhodne DOPC, v množstve od približne 30 % mol. do približne 70 % mol., výhodne od približne 40 % mol. do približne 60 % mol., a viac. výhodne od asi 45 mol.% do asi 55 mol.%.
Ešte ďalším predmetom tohto vynálezu je schopnosť dehydratovať katiónový lipozomálny prípravok podľa tohto vynálezu, ako aj skladovať dlhší čas v dehydratovanom stave a potom rehydratovať pred použitím bez straty podstatnej časti obsahu počas procesov dehydratácie, skladovania a rehydratácie. Na dosiahnutie tohto cieľa môže byť prítomný jeden alebo viac ochranných činidiel, ako sú kryoprotektanty. Takže katiónový lipozómový prípravok podľa vynálezu výhodne obsahuje kryoprotektant, ktorý je vybraný z cukrov alebo alkoholov alebo ich kombinácií. Výhodne je kryoprotektant vybraný z trehalózy, maltózy, sacharózy, glukózy, laktózy, dextránu, manitolu, sorbitolu alebo ich kombinácií. Vo výhodnom uskutočnení lipozomálny prípravok obsahuje trehalózu v rozsahu od približne 5 % (hmotn./obj.) do približne 15 % (hmotn./obj.) vzhľadom na celkový objem prípravku.
Vo výhodnom uskutočnení tohto vynálezu je taxánom paklitaxel alebo jeho derivát. Katiónový lipozomálny prípravok môže obsahovať paclitaxel v množstve aspoň asi 2 mol % až asi 8 mol %, výhodne aspoň asi 2,5 mol % až asi 3,5 mol %.
Vo zvlášť výhodnom uskutočnení je katiónovou lipozomálnou formuláciou DOTAP, DOPC a paklitaxel v pomere približne 50:47:3. Táto formulácia sa tiež označuje ako MBT-0206 alebo Endo TAG-1. Endo TAG-1 má obsah lipidov 10 mm v 10% hmotn./hmotn. roztoku. dihydrát trehalózy. Príprava takejto formulácie je opísaná vo WO 2004/002468, ktorá je tu celá začlenená formou odkazu.
Výhodne má lipozómový prípravok zeta potenciál v rozsahu približne 0 mV až približne 100 mV, výhodne v rozsahu približne 20 mV až približne 100 mV, v približne 0,05 mM roztoku KCI pri približne pH 7,5.
Opísané lipozómy sa používajú na prípravu farmaceutickej kompozície na liečbu rakoviny prsníka, endokrinnú terapiu a terapiu súvisiacu s HER-2, ktorá je neúčinná. Výhodne je liečba zameraná na trojitý receptor negatívny karcinóm prsníka. Indikácia rakoviny prsníka s negatívnym trojitým receptorom zahŕňa rakovinu prsníka s negatívnym stavom estrogénového receptora (ER), progesterónového receptora (PgR) a HER-2 receptora (Her-2). Stanovenie stavu receptora je akceptované diagnostický postup rakovina prsníka, dobre známa v odbore. Stav ER, PgR a HER-2 možno určiť štandardnými imunohistochemickými alebo enzýmovými (IHC) testami (Chebil et al., 2003; Yamashita et al., 2006), (Schaller et al., 2001). Stav HER-2 môže byť tiež hodnotený génovou amplifikáciou fluorescenčnou in situ hybridizáciou (FISH) (Kallioniemi et al., 1992).
Farmaceutická kompozícia sa môže použiť ako liek prvej, druhej a tretej línie. Pacienti, ktorí dostávajú liečbu, mohli v minulosti podstúpiť chirurgický zákrok na resekciu nádoru, rádioterapiu a/alebo chemoterapiu. Chemoterapia používaná pri rakovine prsníka je kombinovaný režim na báze antracyklínov. Typicky tieto kombinované režimy zahŕňajú antracyklínové liečivo, ako je doxorubicín alebo epirubicín. Liečba prvej línie môže zahŕňať kombinovanú terapiu s antracyklínom a taxánom. Pacientky môžu byť pred alebo po menopauze. Rakovina zameraná na liečbu môže byť odlišná klinické štádiá podľa veľkosti, distribúcie a rozsahu tvorby metastáz.
Farmaceutická kompozícia sa môže podávať pacientovi v terapeuticky účinnej dávke. Minimálne raz týždenne, ale môže sa podávať aj niekoľkokrát týždenne. Vo výhodnom uskutočnení sa farmaceutická kompozícia podáva raz alebo dvakrát týždenne. Kompozíciu je tiež možné počas liečebného obdobia podávať rôzny počet krát za týždeň.
V priebehu liečby môže byť aplikácia kompozície vynechaná najmenej týždeň. V závislosti od dĺžky liečby a pozorovaných vedľajších účinkov je možné aplikáciu počas liečby aj niekoľkokrát vynechať.
Výhodne sa lipozómový prípravok podáva v jednotlivých dávkach približne 1 mg/m2 až približne 50 mg/m2 na podanie. Vo výhodnom uskutočnení sa liek podáva v dávke od približne 20 mg/m2 do približne 50 mg/m2 na podanie. Vo zvlášť výhodnom uskutočnení sa liečivo podáva v dávke od približne 22 mg/m2 do približne 44 mg/m2 na podanie. V inom obzvlášť výhodnom uskutočnení sa liek podáva dvakrát týždenne v dávke približne 44 mg/m2. V najvýhodnejšom uskutočnení vynálezu sa lipozomálny prípravok podáva v dňoch 1, 5, 8, 11, 15, 18, 22, 25, 29, 32, 36 a 39 liečebného cyklu, po ktorom nasleduje 14-dňový interval bez liečby alebo 1, 4, 6, 11, 15 a 18 dní liečebného cyklu, po ktorom nasleduje 10-dňový interval bez liečby. Ak je to potrebné, liečebné cykly sa môžu opakovať niekoľkokrát, napríklad aspoň 2, 3 alebo 4 krát.
Iné dôležitý aspekt Podstatou vynálezu je možnosť použitia katiónovej lipozomálnej formulácie v simultánnej, oddelenej alebo sekvenčnej kombinovanej terapii. Kombinovaná terapia ďalej zahŕňa podávanie terapeuticky účinnej dávky aspoň jednej ďalšej účinnej látky. V jednom uskutočnení je ďalšou účinnou látkou nelipozomálna formulácia. Kombinovaná terapia môže zahŕňať súčasné, oddelené a/alebo postupné podávanie človeku alebo zvieraťu. Pri súbežnej kombinovanej terapii sa lipozomálny prípravok a iná účinná látka podávajú v ten istý deň.
Lipozomálny prípravok a iná účinná látka sa môžu podávať v rôznych časových bodoch v rovnaký deň alebo v rôzne dni. Vo výhodnom uskutočnení sa lipozomálny prípravok podáva pred ďalšou účinnou látkou, výhodne viac ako jednu hodinu, ale nie viac ako 12 hodín pred aplikáciou ďalšej účinnej látky.
Ďalšie aktívne činidlo môže byť vybrané z cytotoxických alebo cytostatických činidiel, ako je činidlo s protinádorovou aktivitou alebo aktivitou proti endotelovým bunkám, zlúčenina, ktorá znižuje alebo eliminuje hypersenzitívne reakcie, alebo chemosenzibilizátor alebo ich kombinácie.
Vo výhodnom uskutočnení je ďalšie aktívne činidlo vybrané z antineoplastického činidla, najmä antimitotického činidla, ako je taxán, antracyklín, výhodne doxorubicín alebo epirubicín, statín, depsipeptid, talidomid, ďalšie činidlá interagujúce s mikrotubulami, ako je diskodermolid, laulimalid, izolaulimalid, eleterobicín sarkodiktín A a B, alkylačné činidlá, najmä zlúčeniny vrátane platiny, ako je cisplatina, karboplatina, činidlá inhibujúce DNA topoizomerázu, ako je kamptotecín, RNA/DNA antimetabolity, najmä 5-fluóruracil, gemcitabín alebo kapecitabín. V najvýhodnejšom uskutočnení je vybraný z paklitaxelu, docetaxelu, kampotecínu alebo akéhokoľvek ich derivátu.
Zlúčenina, ktorá znižuje alebo eliminuje hypersenzitívne reakcie, môže byť vybraná zo skupiny pozostávajúcej zo steroidov, antihistaminík, antagonistov H2 receptora a ich kombinácií v množstve dostatočnom na prevenciu fatálnych anafylaktických reakcií. Uvedená zlúčenina môže byť tiež vybraná zo skupiny, ktorú tvorí ranitidín, dexametazón, difenhydramín, famotidín, hydrokortizón, klemastín, cimetidín, prednizolón, chlórfeniramín, chlórfenamín, dimetinden maleát a prometazín.
Chemosenzibilizátor môže byť vybraný zo skupiny pozostávajúcej z modulátorov bunkový cyklus látky, ktoré rušia liekovú rezistenciu, ako je verapamil, vazoaktívne látky, ako sú antihypertenzíva, a látky, ktoré modifikujú interakcie katiónových lipozómov so zložkami krvi, ako je protamín.
Výhodným uskutočnením vynálezu je použitie lipozomálnej formulácie v kombinovanej terapii s nelipozomálnym taxánom, ako je paclitaxel alebo jeho derivát. Výhodne je paklitaxel formulovaný v Cremophore EL alebo albumínovom konjugáte. V najvýhodnejšom uskutočnení sa lipozomálny prípravok obsahujúci DOTAP, DOPC a paclitaxel používa v kombinovanej terapii s nelipozomálnym taxánom, ako je paclitaxel alebo jeho derivát.
V ešte ďalšom aspekte sa predložený vynález týka kombinovanej terapie, pričom nelipozomálny taxán môže byť použitý v nižšej týždennej dávke v porovnaní so štandardnou monoterapiou. Vo výhodnom uskutočnení sa lipozomálna formulácia podáva v týždennej dávke približne 20 mg/m2 až 50 mg/m2 a nelipozomálna formulácia taxánu sa podáva v týždennej dávke 25 mg/m2 až 100 mg/m2. m2.
Vo výhodnom uskutočnení sa lipozomálny prípravok a nelipozomálny taxán podávajú raz týždenne.
V súčasných liečebných režimoch sa podáva 80 až 150 mg/m2 nelipozomálneho paklitaxelu raz týždenne. Docetaxel sa podáva v dávke 35 mg/m2 až 40 mg/m2 alebo približne 70 mg/m2 v režime raz týždenne (Eniu et al., 2005).
Vo výhodnom uskutočnení sa lipozomálny prípravok podáva raz týždenne v kombinácii s približne 60 mg/m2 nelipozomálneho paklitaxelu. V ďalšom výhodnom uskutočnení vynálezu sa lipozomálny prípravok podáva raz týždenne v kombinácii s približne 25-35 mg/m2 nelipozomálneho docetaxelu.
V najvýhodnejšom uskutočnení sa lipozomálna formulácia podáva raz týždenne v dávke približne 22 mg/m2 a nelipozomálny paklitaxel alebo derivát sa podáva raz týždenne v dávke približne 60 mg/m2 alebo približne 70 mg/m2, najlepšie v ten istý deň.
V najvýhodnejšom uskutočnení sa kompozícia používa spolu s nelipozomálnou formuláciou v dňoch 1, 8, 15, 22, 29, 36 liečebného cyklu, po ktorých nasleduje 14-dňový interval bez liečby, alebo v dňoch 1, 8, 15 liečebného cyklu, po ktorom nasleduje 13-denný interval bez liečby. Ak je to potrebné, liečebné cykly sa môžu opakovať niekoľkokrát, napríklad aspoň 2, 3 alebo 4 krát.
Lipozomálny prípravok sa môže podávať systémovo, výhodne intravenózne. Lipozomálny prípravok sa môže podávať spolu s fyziologicky prijateľnými nosičmi, ako je pufor.
Typicky sa farmaceutická kompozícia dodáva v dehydrovanej forme. Pred použitím by mala byť kompozícia hydratovaná vo vode alebo fyziologickom roztoku farmaceutickej kvality alebo inej vhodnej kvapaline, výhodne vrátane fyziologicky prijateľných nosičov, ako je pufor.
Popis výkresu
Obr. jeden
Klinická štúdia EndoTAG® pri rakovine prsníka s negatívnym trojitým receptorom.
Schematický diagram režimu porovnávajúceho podávanie Taxolu® s podávaním EndoTAG®-1 samotného alebo v kombinácii s Taxolom® u žien s rakovinou prsníka s tromi receptormi negatívnymi, ktoré dostávali adjuvantnú liečbu až najmenej 6 mesiacov predtým antracyklín. Skupina 1: Taxol® (70 mg/m2) v kombinácii s EndoTAG®-1 (22 mg/m2 lipozomálny paklitaxel) sa podáva v dňoch 1, 8, 15 každého cyklu. Skupina 2: EndoTAG®-1 (44 mg/m2 lipozomálneho paklitaxelu) sa podáva 1., 4., 8., 11., 15., 18. deň každého cyklu. Skupina 3: Taxol® (90 mg/m2) podávaný v dňoch 1, 8, 15 každého cyklu (kontrolná skupina).
Príklady
Príklad 1 Všeobecný protokol na liečbu ľudí
Tento príklad sa týka protokolov na liečbu trireceptorovo negatívnej rakoviny prsníka u ľudí.
Katiónový lipozómový prípravok sa môže podávať ako monoterapia alebo v kombinácii s inou účinnou látkou. Účinná látka lipozómového prípravku a ďalšia účinná látka môžu byť rovnaké alebo rôzne. Prostriedky sa vyberajú podľa viacerých faktorov. Tieto faktory súvisia s presným fyziologický stav pacientov, liečbu, ktorú pacienti predtým podstúpili, liekovú rezistenciu alebo vedľajšie účinky akejkoľvek účinnej látky.
Rôzne prvky vykonávania klinického skúšania, vrátane liečby a monitorovania pacientov, budú odborníkom v odbore známe vo svetle tohto opisu.
Pacienti vybraní na testovanie majú ochorenie objektívne určené fyzikálnym vyšetrením, laboratórne metódy alebo röntgenové postupy. Takíto pacienti výhodne tiež nemajú v anamnéze žiadne klinicky relevantné srdcové alebo ochorenie obličiek a akákoľvek chemoterapia by mala byť prerušená aspoň 2 týždne pred zaradením do štúdie.
Opísané formulácie sa môžu podávať počas krátkeho až stredného času infúzie. Podaná infúzia v akejkoľvek dávke by mala závisieť od toxicity dosiahnutej po každej infúzii. Ak sa teda dosiahne stupeň toxicity II po ktorejkoľvek jednotlivej infúzii alebo po určitom časovom období pri infúzii konštantnou rýchlosťou, ďalšie dávky sa majú vynechať alebo sa má infúzia s konštantnou rýchlosťou prerušiť, kým toxicita neustúpi. Skupinám pacientov sa majú podávať zvyšujúce sa dávky, kým približne 60 % pacientov nevykazuje neprijateľný stupeň toxicity III alebo IV v akejkoľvek kategórii. Dávky, ktoré sú 2/3 tejto hodnoty, by sa mali definovať ako bezpečná dávka.
Samozrejme, pred liečbou a v intervaloch približne 3-4 týždňov je potrebné vykonať fyzikálne vyšetrenie, meranie nádoru a laboratórne testy. Laboratórne testy by mali zahŕňať kompletný krvný obraz, sérový kreatinín, kreatínkinázu, elektrolyty, močovinu, dusík, SGOT (sérový glutamát oxaloacetát aminotransferáza), bilirubín, albumín a celkový sérový proteín.
Klinické odpovede možno určiť prijateľným meraním alebo zmenou laboratórnych hodnôt, ako sú nádorové markery. Napríklad úplná odpoveď môže byť definovaná ako vymiznutie všetkých detegovateľných príznakov ochorenia počas najmenej jedného mesiaca, zatiaľ čo čiastočná odpoveď môže byť definovaná ako zníženie o 50 % alebo viac.
Určité variácie v dávkovaní sa určite vyskytnú v závislosti od stavu liečeného jedinca. Osoba zodpovedná za podávanie v každom prípade určí vhodnú dávku pre jednotlivého subjektu. Okrem toho na podávanie ľuďom musia prípravky spĺňať normy sterility, nepyrogenicity, všeobecnej bezpečnosti a čistoty, ako to vyžaduje Úrad pre biologické štandardy FDA. produkty na jedenie a americké drogy).
Pred použitím sa môže prípravok rekonštituovať rozpustením vo vodnom roztoku v prípade, že bol prípravok lyofilizovaný. Ako bolo zdôraznené vyššie, požadované množstvo aplikácie sa vypočíta z telesnej hmotnosti pacienta a dávkovacieho režimu. Spôsob podávania výhodne zahŕňa intraperitoneálne alebo parenterálne podávanie. Zvyčajne sa zavedenie uskutočňuje intravenóznou cestou.
Na použitie v predloženom vynáleze sa "terapeuticky účinná dávka" kompozície alebo účinnej látky podávanej subjektu bude meniť v závislosti od širokého rozsahu faktorov. Množstvo bude závisieť od veľkosti, veku, pohlavia, hmotnosti a stavu pacienta, ako aj od aktivity podávanej látky. Po uvedení, že existuje značná variabilita, pokiaľ ide o dávkovanie, sa prihlasovatelia domnievajú, že odborníci v odbore môžu pomocou tohto opisu ľahko určiť vhodnú dávku najprv podaním extrémne malých množstiev a postupným zvyšovaním dávky, kým sa nedosiahne požadovaný výsledok. .
Príklad 2 Štúdia fázy II hodnotiaca účinnosť EndoTAG®-1 u troch pacientok s rakovinou prsníka s negatívnym receptorom
2.1. Popis štúdie
V súčasnosti existuje len málo možností liečby pre ženy s „troma receptormi negatívnymi“ rakovinami prsníka pre estrogénové receptory (ER), progesterónové receptory (PgR) a HER-2/neu (HER-2). Trojnásobne negatívny stav nádoru je spojený so zlou prognózou u pacientok s rakovinou prsníka v počiatočnom štádiu. Termín „triple-negatívny nádor“ sa v súčasnosti používa ako klinická náhrada pre „bazálny“ karcinóm prsníka: 80 % trireceptorovo-negatívnych karcinómov je „bazálnych“. "Bazálne" rakoviny sú špecifickým podtypom rakoviny prsníka definovaným profilovaním génovej expresie (Brenton a kol., 2005; Sotiriou a kol., 2003; Sorlie a kol., 2001).
2.2. Štruktúra štúdie
Celkovo 135 pacientok s trojitým receptorom negatívnym karcinómom prsníka, ktorí splnili kritériá vhodnosti, bolo náhodne zaradených do jednej z nasledujúcich liečebných skupín:
Skupina 1: Taxol® (70 mg/m2) v kombinácii s Endo TAG®-1 (22 mg/m2 lipozomálny paklitaxel) v dňoch 1, 8, 15 každého cyklu, po ktorých nasleduje 13-dňový interval bez liečby.
Skupina 2: Monoterapia Endo TAG®-1 (44 mg/m2 lipozomálny paklitaxel) v dňoch 1, 4, 8, 11, 15, 18 každého cyklu, po ktorých nasleduje 10-dňový interval bez liečby.
Skupina 3: Monoterapia Taxolom® (70 mg/m2) v dňoch 1, 8, 15 každého cyklu, po ktorých nasleduje 13-dňový interval bez liečby (kontrolná skupina).
Randomizácia sa uskutočňuje na dosiahnutie pomeru 2:2:1 medzi liečebnými skupinami a stratifikuje sa adjuvantnou liečbou samotným antracyklínom alebo antracyklínom + Taxol®.
Každý liečebný cyklus zahŕňa 3 týždne liečby, po ktorých nasleduje 1 týždeň prestávky, t.j. len 4 týždne.
Pacienti budú na začiatku dostávať liečbu minimálne 4 cykly. Po vyhodnotení odpovede majú nádory, ktoré bezpečne reagujú na liečbu (t.j. CR, PR a SD), možnosť pokračovať v liečbe, kým sa neobjaví PD alebo neprijateľná toxicita.
Všetci pacienti sú liečení až do progresie ochorenia alebo toxicity a monitorovaní, aby sa určilo prežitie.
2.3. Ciele
primárny cieľ: zhodnotiť účinnosť Endo TAG®-1 + Taxol® (kombinovaná terapia) a Endo TAG®-1 (monoterapia) ako núdzovej terapie u pacientok trpiacich na tri receptor-negatívne antracyklíny ± Taxol® rezistentnú rakovinu prsníka.
sekundárny cieľ: zhodnotiť bezpečnosť a znášanlivosť Endo TAG®-1 + Taxol® (kombinovaná liečba) a Endo TAG®-1 (monoterapia) u tejto populácie pacientov.
2.4. výsledky
Primárne výsledky účinnosti:
Miera 4-mesačného prežívania bez prežitia (PFS) vypočítaná ako miera u randomizovaných pacientov, ktorí nevykazujú progresiu ochorenia a sú nažive 16 týždňov po prvej infúzii študovaného lieku.
Sekundárne výsledky účinnosti:
Stredný čas PFS.
Nádorová odpoveď (CR/PR/SD/PD) v 8., 16. a 24. týždni
Počet pacientov reagujúcich na liečbu, t.j. objektívna odpoveď (OR = celková odpoveď (CR) + čiastočná odpoveď (PR)).
Počet pacientov so stabilným ochorením (SD).
Medián trvania objektívnej odpovede a stabilného ochorenia.
4-mesačná miera prežitia vypočítaná z randomizovaných pacientov žijúcich 16 týždňov po prvej infúzii študovaného lieku.
Medián celkového času prežitia(OS)
Skóre bolesti (VAS)
Percento pacientov so zlepšením aspoň o 10 mm oproti východiskovej hodnote počas liečby študovaným liekom.
Percento pacientov, u ktorých došlo počas liečby študovaným liekom k zhoršeniu aspoň o 10 mm od základnej línie.
Hodnotenie klinického prínosu na stupnici kvality života (QoL).(Dotazník EORTC-QoL-C30)
Priemerná zmena za týždeň oproti východiskovej hodnote na konci liečby študovaným liekom.
Percento pacientov so zlepšením aspoň o 10 bodov oproti východiskovej hodnote počas liečby študovaným liekom.
Percento pacientov, ktorí sa zhoršili aspoň o 10 bodov oproti východiskovej hodnote počas liečby študovaným liekom.
Výsledky zabezpečenia:
Vedľajšie účinky: frekvenciu a percento pacientov s vedľajšími účinkami vyplývajúcimi z liečby.
Laboratórne hodnoty: počet klinicky významných laboratórnych hodnôt.
Zmena dávky: percento pacientov s vysoký pokles dávka, oneskorenie alebo prerušenie podávania študovaného lieku.
2.5. Počet subjektov/pacientov
135 žien s lokálne recidivujúcou a/alebo metastatickou chorobou, predtým liečených antracyklínom ± Taxol® chemoterapiou na trojitý receptor-negatívny karcinóm prsníka, je randomizovaných v pomere 2:2:1 (54 pacientok s kombinovanou terapiou Endo TAG®-1 + Taxol®, 54 pacientov s monoterapiou Endo TAG®-1 a 27 pacientov s monoterapiou Taxolom®).
2.6. Kritériá pre zaradenie
1. Histologicky dokázaný nádorovou biopsiou karcinóm prsníka, negatívny na tri receptory.
2. Hormonálny stav negatívny na estrogén (ER), progesterón (PR) a HER2.
3. Vek ≥18 rokov.
4. Nádorové lézie podľa kritérií RCIT.
5. Nedostatok laktácie alebo tehotenstva u pacientov.
6. Stav vykonania 0-2 ECOG.
7. Najmenej 6 mesiacov po predchádzajúcej systémovej chemoterapii antracyklínmi v adjuvantnom režime samostatne alebo v kombinácii s chemoterapiou.
8. Normálna srdcová funkcia (LVEF MUGA skóre podľa skenovania alebo echokardiografie nad dolnou hranicou normálu inštitúcie).
9. Primeraná funkcia orgánov (podľa stanovenia neutrofilov ≥1,5×10 9 /l, trombocyty ≥100×10 9 /l, hemoglobín ≥10 g/dl, celkový bilirubín ≤1,5 UNL, ASAT (SGOT) a ALAT (SGPT ) ≤ 2,5 UNL, alkalická fosfatáza ≤ 2,5 UNL, kreatinín ≤ 150 µmol/l (1,5 mg/dl).
10. Žiadna ďalšia ďalšia vážna choroba alebo zdravotný stav: a) edematózne srdcové zlyhanie alebo nestabilná angina pectoris, predchádzajúci infarkt myokardu do 1 roka od zaradenia do štúdie, nekontrolovaná hypertenzia alebo vysoké riziko nekontrolovaných arytmií; b) aktívna alebo významná história neurologická porucha a/alebo psychiatrická porucha, ktorá by zasahovala do porozumenia a poskytovania informovaného súhlasu, ako aj do klinickej a rádiologické hodnotenie centrálny nervový systém počas testu; c) aktívna nekontrolovaná infekcia; d) aktívny peptický vred, nestabilný diabetes mellitus.
11. Absencia minulej alebo súčasnej anamnézy iného novotvaru, okrem vyliečených: a) bazocelulárneho karcinómu kože, b) karcinómu krčka maternice in situ.
12. Neprítomnosť simultánna liečba iné experimentálne lieky. Účasť na inom klinickom skúšaní s akýmkoľvek neoznačeným skúšaným liekom do 30 dní od zaradenia do štúdie.
13. Písomný informovaný súhlas.
2.7. Zavedenie lieku
Endo TAG®-1 + Taxol sa musí podávať intravenózne.
Endo TAG®-1 sa má podávať na začiatku v dávke 0,5 ml/min. Po 15 minútach sa má rýchlosť infúzie zvýšiť na 1,0 ml/min a po ďalších 15 minútach sa rýchlosť infúzie nastaví na 1,5 ml/min.
2.8. Primárny výsledok účinnosti
Primárnym výsledkom je miera PFS v 16. týždni v ramene kombinovanej liečby Endo TAG®-1 + Taxol®.
Hypotéza Ho: p ≤ 30 % verzus H 1 : p ≥ 50 % testovaná v skupine s kombinovanou liečbou s použitím jednostupňového dizajnu na hladine významnosti a=0,05.
Ak je skutočná odpoveď nádoru 50 % pri liečbe Taxol® + Endo TAG®-1, potom bude mať test skóre 1-β=0,90.
Rovnaká hypotéza bude testovaná pre Endo TAG®-1 monoterapiu.
Príklad 3 Použitie Endo TAG-1 v kombinácii s Taxotere®
3.1. Zdôvodnenie liečby
Ženy trpiace trireceptorovo negatívnym, lokálne rekurentným a/alebo metastatickým karcinómom prsníka, ktoré boli predtým liečené antracyklínom ± Taxotere® chemoterapiou, sú liečené týždennou kombinovanou terapiou Endo TAG-1 v kombinácii s Taxotere®. Taxotere® zahŕňa liečivo docetaxel ako aktívnu farmaceutickú zložku.
3.2. Kritériá definujúce minimálne požiadavky na zaradenie do štúdie
Histologicky dokázaná rakovina prsníka biopsiou nádoru.
Negatívny hormonálny stav estrogénu (ER), progesterónu (PR) a HER2 podľa IHC, enzýmovej analýzy alebo FISH.
Neprítomnosť dojčiacich alebo tehotných pacientov.
Najmenej 6 mesiacov po predchádzajúcej adjuvantnej systémovej antracyklínovej chemoterapii.
Normálna funkcia srdca (skóre LVEF MUGA skenovaním alebo echokardiografiou nad dolnou hranicou normy inštitúcie).
Primeraná funkcia orgánov (podľa stanovenia neutrofilov 1,5×10 9 /l, trombocyty 100×10 9 /l, hemoglobín 10 g/dl, celkový bilirubín ≤1,5 UNL, ASAT (SGOT) a ALAT (SGPT) 2, 5 UNL alkalická fosfatáza 2,5 UNL, kreatinín 150 µmol/l (1,5 mg/dl).
3.3. Liečebný režim
Endo TAG®-1 sa podáva v dávke 22 mg/m2 lipozomálneho paklitaxelu v dňoch 1, 8, 15, 22, 29, 36 každého cyklu, po ktorých nasleduje 14-dňový interval bez liečby.
Taxotere® sa podáva v dávke 30 mg/m2 docetaxelu v dňoch 1, 8, 15, 22, 29, 36 každého cyklu, po ktorých nasleduje 14-dňový interval bez liečby.
Obidve lieky sa podávajú intravenózne.
Pacienti sú liečení až do progresie ochorenia alebo toxicity.
Všetky kompozície a spôsoby opísané a nárokované v tomto dokumente môžu byť vyrobené a uskutočnené bez zbytočného experimentovania vo svetle tohto opisu. Zatiaľ čo kompozície a spôsoby podľa tohto vynálezu boli opísané v termínoch výhodných uskutočnení, odborníkom v odbore bude zrejmé, že v kompozíciách, metódach a krokoch alebo postupnosti krokov tu opísanej metódy je možné vykonať zmeny. bez odchýlenia sa od koncepcie, ducha a rozsahu vynálezu. Konkrétnejšie bude zrejmé, že niektoré činidlá, ktoré sú chemicky aj fyziologicky príbuzné, môžu byť nahradené tými, ktoré sú tu opísané, hoci možno dosiahnuť rovnaké alebo podobné výsledky. Všetky takéto podobné substitúcie a modifikácie zrejmé odborníkom v odbore sú myslené tak, že spadajú do ducha, rozsahu a koncepcie vynálezu, ako je definovaný v pripojených nárokoch.
Bernard-Marty, C., Cardoso, F., a Piccart, M.J. (2004). Fakty a kontroverzie v systémovej liečbe metastatického karcinómu prsníka. Onkológ 9, 617-632.
Brenton, J.D., Carey, L.A., Ahmed, A.A. a Caldas, C. (2005). Molekulárna klasifikácia a molekulárna prognóza rakoviny prsníka: pripravené na klinickú aplikáciu? J Clin Oncol 23, 7350-7360.
Chan, S., Davidson, N., Juozaityte, E., Erdkamp, F., Pluzanska, A., Azarnia, N. a Lee, L.W. (2004). Štúdia fázy III s lipozomálnym doxorubicínom a cyklofosfamidom v porovnaní s epirubicínom a cyklofosfamidom ako prvolíniovou liečbou metastatického karcinómu prsníka. Ann Oncol 15, 1527-1534.
Chebil, G., Bendahl, P.O., Idvall, I. a Ferno, M. (2003). Porovnanie imunohistochemických a biochemických testov steroidných receptorov v primárnych asociáciách rakoviny prsníka a klinickej praxe a dôvody nezrovnalostí. Acta Oncol 42, 719-725.
Eniu, A., Palmieri. F.M. a Perez, E.A. (2005). Týždenné podávanie docetaxelu a paklitaxelu pri metastatickom alebo pokročilom karcinóme prsníka. Onkológ 10, 665-685.
Felgner, J. H., Kumar, R., Sridhar, C. N., Wheeler, C. J., Tsai, Y. J., Border, R., Ramsey, P., Martin, M. a Felgner, P. L. (1994). Zlepšené dodávanie génov a štúdie mechanizmu s novou sériou katiónových lipidových formulácií. J Biol Chem. 269, 2550-2561.
Gradishar, W.J. (2004). Tamoxifen - čo ďalej? Onkológ 9, 378-384.
Kallioniemi, O.P., Kallioniemi, A., Kurisu, W., Thor, A., Chen, L.C., Smith, H.S., Waldman, F.M., Pinkel, D. a Gray, J.W. (1992). Amplifikácia ERBB2 pri rakovine prsníka analyzovaná fluorescenčnou in situ hybridizáciou. Proc Natl Acad Sci USA 89, 5321-5325.
Keller, A.M., Mennel, R.G., Georgoulias, V.A., Nabholtz, J.M., Erazo, A., Lluch, A., Vogel, C.L., Kaufmann, M., von Minckwitz, G., Henderson, I.C., a kol. (2004). Randomizovaná štúdia fázy III pegylovaného lipozomálneho doxorubicínu verzus vinorelbín alebo mitomycín C plus vinblastín u žien s pokročilým karcinómom prsníka refraktérnym na taxány. J Clin Oncol 22, 3893-3901.
O "Shaughnessy, J. (2005). Predĺženie prežitia chemoterapiou u metastatického karcinómu prsníka. Onkológ 10 Suppl 3, 20-29.
Prowell, T.M. a Davidson, N.E. (2004). Aká je dnes úloha ovariálnej ablácie v manažmente primárneho a metastatického karcinómu prsníka? Onkológ 9, 507-517.
Schaller, G., Evers, K., Papadopoulos, S., Ebert, A., and Buhler, H. (2001). Súčasné používanie testov HER2. Ann Oncol 12 Suppl 1, S97-100.
Slamon, D.J., Clark, G.M., Wong, S.G., Levin, W.J., Ullrich, A., and McGuire, W.L. (1987). Ľudský karcinóm prsníka: korelácia relapsu a prežitia s amplifikáciou HER-2/neu onkogénu. Science 235, 177-182.
Solodin, I., Brown, C.S., Bruno, M.S., Chow, C.Y., Jang, E.H., Debs, R.J., and Heath, T.D. (1995). Nová séria amfifilných imidazolíniových zlúčenín na dodávanie génov in vitro a in vivo. Biochemistry 34, 13537-13544.
Sorlie, T., Perou, C. M., Tibshirani, R., Aas, T., Geisler, S., Johnsen, H., Hastie, T., Eisen, M. B., van de Rijn, M., Jeffrey, S. S., et al. (2001). Vzory génovej expresie karcinómov prsníka rozlišujú podtriedy nádorov s klinickými dôsledkami. Proc Natl Acad Sci USA 98, 10869-10874.
Sotiriou, C., Neo, S.Y., McShane, L.M., Korn, E.L., Long, P.M., Jazaeri, A., Martiat, P., Fox, S.B., Harris, A.L. a Liu, E.T. (2003). Klasifikácia a prognóza rakoviny prsníka na základe profilov génovej expresie z populačnej štúdie. Proc Natl Acad Sci USA 100, 10393-10398.
Yamashita, H., Yando, Y., Nishio, M., Zhang, Z., Hamaguchi, M., Mita, K., Kobayashi, S., Fujii, Y., and Iwase, H. (2006). Imunohistochemické hodnotenie stavu hormonálneho receptora na predpovedanie odpovede na endokrinnú terapiu pri metastatickom karcinóme prsníka. Rakovina prsníka 73, 74-83.
1. Použitie katiónového lipozomálneho prípravku obsahujúceho aspoň jeden katiónový lipid, antimitotické činidlo a prípadne aspoň jeden neutrálny a/alebo aniónový lipid na prípravu farmaceutickej kompozície na liečbu estrogénového receptora negatívneho (ER) prsníka. rakovina), progesterónový receptor (PgR) a receptor endotelového rastového faktora typu 2 (HER-2) u ľudí alebo zvierat.
2. Použitie podľa nároku 1, kde špecifikovaný katiónový lipozomálny prípravok obsahuje aspoň jeden katiónový lipid v množstve od asi 30 mol. % do asi 99,9 mol. %, antimitotické činidlo v množstve aspoň asi 0,1 mol. a prípadne aspoň jeden neutrálny a/alebo aniónový lipid v množstve od asi 0 % mol. do asi 70 % mol.
3. Použitie podľa nároku 1, kde uvedeným antimitotickým činidlom je taxán, výhodne paklitaxel alebo jeho derivát.
4. Použitie podľa nároku 1 alebo 2, kde uvedený katiónový lipozómový prípravok obsahuje DOTAP (N-N,N,N-trimetylamóniové soli, napr. metylsulfát), DOPC (1,2-dioleoyl-fosfatidylcholín alebo 1,2-dioleoyl - sp-glycero-3-fosfatidylcholín) a paklitaxel.
5. Použitie podľa nároku 1 na podávanie terapeuticky účinnej dávky aspoň raz týždenne.
6. Použitie podľa nároku 1 na podávanie terapeuticky účinnej dávky raz alebo dvakrát týždenne.
7. Použitie podľa nároku 1 na podanie jednej dávky 1 mg/m2 až 50 mg/m2 na podanie.
8. Použitie podľa nároku 1 na podanie jednej dávky 20 mg/m2 až 50 mg/m2 na podanie, výhodne 22 mg/m2 alebo 44 mg/m2.
9. Použitie podľa nároku 1 na podanie jednej dávky 44 mg/m2 dvakrát týždenne.
10. Použitie podľa nároku 1, kde kompozícia je určená na súčasnú, oddelenú alebo sekvenčnú kombinovanú terapiu s účinnou dávkou aspoň jednej ďalšej účinnej látky a/alebo tepla a/alebo žiarenia.
11. Použitie podľa nároku 10, kde iná účinná látka je zahrnutá v kompozícii ako nelipozomálna formulácia.
12. Použitie podľa nároku 11, kde uvedenou ďalšou účinnou látkou je cytotoxická alebo cytostatická látka, ako je látka s protinádorovou aktivitou alebo aktivitou proti endotelovým bunkám, chemoterapeutická látka, imunologicky aktívna látka, zlúčenina, ktorá znižuje alebo odstraňuje hypersenzitívne reakcie. alebo chemosenzibilizátor.
13. Použitie podľa nároku 11, kde uvedené ďalšie aktívne činidlo je vybrané z antineoplastických činidiel, najmä antimitotických činidiel podobných taxánu, ako je paclitaxel alebo jeho deriváty, alkylačných činidiel, najmä zlúčenín obsahujúcich platinu, ako je cisplatina alebo karboplatina, činidiel DNA topoizomerázy. inhibítory, ako je kamptotecín, antracyklíny, ako je doxorubicín, antimetabolity RNA/DNA, najmä 5-fluóruracil, gemcitabín alebo kapecitabín.
14. Použitie podľa nároku 10 na podávanie kompozície v týždennej dávke 20 mg/m2 až 50 mg/m2 a na podávanie nelipozomálneho taxánu v týždennej dávke 20 mg/m2 až 100 mg/m2. 2.
15. Použitie podľa nároku 10 na podávanie kompozície a ďalšieho prídavného činidla raz týždenne.
16. Použitie podľa nároku 10 na podávanie kompozície raz týždenne v dávke približne 22 mg/m2 a na podávanie nelipozomálneho paclitaxelu alebo jeho derivátu raz týždenne v dávke približne 70 mg/m2.
17. Kombinácia
(a) katiónový lipozómový prípravok obsahujúci aspoň jeden katiónový lipid v množstve od približne 30 % mol. do približne 99,9 % mol., taxán v množstve aspoň približne 0,1 % mol. a aspoň jeden neutrálny a/alebo aniónový lipid v množstve od asi 0 % mol. do asi 70 % mol., a
(b) nelipozomálny prípravok obsahujúci antimitotické činidlo na súčasné, oddelené a/alebo postupné podávanie človeku alebo zvieraťu na liečenie rakoviny.
[0001] Vynález sa týka zlúčenín predstavovaných všeobecným vzorcom (I): a ich farmaceuticky prijateľných solí, kde Ar je fenylová skupina substituovaná piperazínom alebo benzo[d]tiazolom, s fenylovou skupinou pripojenou k B, navyše piperazínom alebo benzoskupinou. [d] tiazol môže byť nesubstituovaný alebo substituovaný substituentmi vybranými z alkylu alebo acetylu; B je -0-; R1 je vodík; R2 je S(0)2R4 alebo C(0)(CH2)n-C(0)OR5; R3 je halogén; R4 je aryl, ktorý môže byť nesubstituovaný alebo substituovaný substituentmi vybranými zo skupiny, ktorú tvorí halogén, alkyl, fluóralkyl, alkoxy a trifluórmetoxy; R5 je vodík; n je celé číslo od 1 do 3.
[0001] Vynález sa týka liekov a týka sa kombinácie navrhnutej na inhibíciu rastu nádorových buniek, vrátane cytotoxickej zlúčeniny vybranej zo zlúčenín kamptotecínu; antimetabolity; vinca alkaloidy; taxány; zlúčeniny platiny; inhibítory topoizomerázy 2; a kombinácie dvoch alebo viacerých z týchto tried alebo inhibítor prenosu signálu vybraný z protilátok, ktoré sa zameriavajú na receptor EGPR; inhibítory EGFR tyrozínkinázy; protilátky, ktoré sa zameriavajú na VEGF/VEGF receptorový systém; PDGFR inhibítory; Inhibítory Raf a inhibítory prenosu RKB v účinnom množstve a zlúčenina vzorca (IV).
Liečba rakoviny prsníka s negatívnym trojitým receptorom
Štandardizovaná imunohistochemická štúdia: stav receptora pri rakovine prsníka (PR, ER, ki67, Her2 neu). Vykonáva sa len vtedy, ak je na podložnom sklíčku hotový mikropreparát a vzorka tkaniva v parafínovom bloku.
Ruské synonymá
IHC štúdia (RE, RP, Her2/neu, Ki-67), imunohistochemická analýza stavu receptorov rakoviny prsníka.
Anglické synonymá
IHC (ImmunoHistoChemistry) test na stav receptora rakoviny prsníka (ER, PR, HER2, Ki67), nadmernú expresiu HER2 prostredníctvom IHC, estrogénové receptory, progesterónové receptory, stav ER a PR, stav estrogénového a progesterónového receptora.
Metóda výskumu
Imunohistochemická metóda.
Aký biomateriál možno použiť na výskum?
Parafínový blok s biopsiou tvorby prsníka. Textilné primárny nádor možno získať jadrovou biopsiou, ako aj incíznou a excíznou chirurgické zákroky. Tkanivo z hrudnej steny, regionálnych lymfatických uzlín alebo vzdialených orgánov sa môže odobrať na biopsiu na detekciu metastáz.
Všeobecné informácie o štúdiu
Moderné princípy a stratégie liečby rakoviny prsníka sú založené okrem iného na výsledkoch hodnotenia receptorového stavu a proliferačného potenciálu nádorových buniek. Nádorové bunky majú schopnosť produkovať a umiestňovať na svojom povrchu špeciálne proteíny – receptory, ktorých stimulácia vedie k spusteniu bunkového delenia a rastu nádoru. Takéto receptory sú schopné viazať sa na látky, ktoré sú normálne prítomné v tele a spočiatku nie sú spojené s vývojom malígneho novotvaru. Podľa súčasných klinických odporúčaní je pre rakovinu prsníka dôležitá prítomnosť nasledujúcich receptorov na nádorových bunkách, ktorých rôzne kombinácie sa nazývajú stav receptorov:
Receptory pre hormóny estrogén a progesterón ehm,PR). Značná časť nádorov prsníka je hormonálne závislá, to znamená, že ich rast je podporovaný a stimulovaný estrogénmi a progesterónom. Nádory s pozitívnym stavom hormonálnych receptorov dobre reagujú na terapiu hormonálnymi analógmi (tamoxifén), ktoré blokujú príslušné receptory – viažu sa na ne, ale nespôsobujú aktiváciu vnútrobunkových procesov a bránia následnej väzbe receptora na hormón. Štúdium produkcie nádorov ER a PR teda umožňuje určiť jeho citlivosť na tieto lieky.
Receptor typu 2 pre ľudský receptor epidermálneho rastového faktora 2 HER2/neu). V bunkách niektorých nádorov prsníka dochádza k zvýšenej produkcii tohto receptorového proteínu, ktorý v spojení s prirodzeným rastovým faktorom naštartuje v nádorovej bunke proces delenia. Celkový počet pacientok s HER2-pozitívnym karcinómom prsníka sa pohybuje od 15 % do 20 %. Stanovenie HER2/neu má nielen prognostický význam (takéto nádory zvyčajne progredujú rýchlejšie a majú agresívnejší klinický vývoj), ale umožňuje zhodnotiť aj možnosť použitia cielených liekov – monoklonálnych protilátok proti HER2 receptoru – trastuzumab (Herceptin ), lapatinib, pertuzumab. Okrem toho sú HER2-pozitívne nádory rezistentné na tamoxifén.
Proliferatívna aktivita je indikátorom schopnosti nádorových buniek sa neobmedzene deliť, čo je hlavný faktor biologickej agresivity nádoru. Proces delenia je sprevádzaný objavením sa určitých proteínov v bunke, z ktorých jeden je Ki-67. V pokojových bunkách sa nevytvára, čo umožňuje jeho použitie ako markera proliferačnej aktivity nádoru. Stanovenie hladiny Ki-67 má dôležitú prognostickú hodnotu, pretože nádory z najmenej zrelých a diferencovaných buniek majú najvyššiu proliferatívnu aktivitu.
Všetky vyššie uvedené markery možno zistiť imunohistochemickým vyšetrením biopsie alebo chirurgického materiálu nádoru. Na analýzu sa z hotového parafínového bloku pomocou špeciálneho mikronoža vyrežú najtenšie rezy, ktoré sa potom pripevnia na podložné sklíčka a zafarbia sa bežnými farbivami tak, aby bolo možné rozlíšiť bunky od seba a od medzibunkovej hmoty. Potom sa rezy na sklíčkach zafarbia roztokmi protilátok označených fluorescenčnými značkami špecifickými pre jeden zo študovaných receptorov. Ak je požadovaný receptor prítomný v nádorovej bunke, protilátky sa naň naviažu a pri pohľade na sklo pod špeciálnym mikroskopom je možné vidieť fluorescenciu, ktorá bude indikovať pozitívny výsledok testu. Navyše, pri prezeraní rezu bude morfológ schopný vidieť, že zafarbený marker sa nachádza v jadre, bunkovej substancii alebo na membráne nádorových buniek. Počet použitých roztokov protilátok zodpovedá počtu markerov, ktoré sa skúmajú vo vzorke. Stupeň fluorescencie a percento buniek, v ktorých je prítomná, sú základom interpretácie výsledkov imunohistochemickej analýzy a sú podrobnejšie opísané v príslušnej časti.
Na čo slúži výskum?
- Na stanovenie stavu hormonálnych receptorov a stupňa proliferačnej aktivity rakoviny prsníka na posúdenie prognózy a individualizácie liečby vrátane určenia indikácií na vymenovanie cielenej terapie.
- Na základe výsledkov detekcie hormonálnych receptorov sa určí účelnosť použitia antiestrogénu a receptor HER2 sa stanoví cielenými anti-HER2 liekmi. Odhalená absencia týchto markerov umožňuje vyhnúť sa predpisovaniu zjavne neúčinnej terapie. Vysoký index proliferačnej aktivity, ako aj väčšinou negatívny stav receptorov, sú indikáciou na pridanie cytostatík do liečby.
Kedy je naplánované štúdium?
- V prítomnosti histologicky verifikovaného karcinómu prsníka – novodiagnostikované, recidivujúce a metastatické nádory.
Čo znamenajú výsledky?
Pri interpretácii výsledkov imunohistochemického stanovenia stav receptorov steroidných hormónov(estrogény a progesterón) pri nádoroch prsníka je potrebné hodnotiť nielen percento buniek zafarbených protilátkami, ale aj intenzitu zafarbenia. Oba tieto parametre sa berú do úvahy v Allredovej škále, kde sa percento pozitívnych buniek odhaduje od 0 do 5 bodov a intenzita zafarbenia je od 0 do 3. Súčet dvoch ukazovateľov je výsledné skóre, ktoré určuje pozitivita nádoru podľa stavu receptorov: 0-2 negatívne, 3-8 pozitívne. Celkové skóre 3 na tejto stupnici zodpovedá 1-10 % zafarbených buniek a je minimálnym pozitívnym výsledkom, kedy môže byť hormonálna liečba účinná.
Niekedy je stav receptora určený výlučne percentom buniek so zafarbenými jadrami. V takýchto prípadoch NCCN odporúča, aby sa všetky nádory s viac ako 1 % pozitívnych buniek považovali za pozitívne.
Pri interpretácii farby na receptorHER2/neu berie sa do úvahy iba farbenie membrány (zafarbenie bunkovej membrány), ktoré sa hodnotí na stupnici od 0 do +3:
výsledok 0 a +1 sa považuje za HER2-negatívny;
2 - hraničný výsledok, pri ktorom podľa imunohistochemickej štúdie nemožno posúdiť prítomnosť receptora HER2-neu na povrchu bunky, je potrebná štúdia FISH alebo CISH;
3 – pozitívny výsledok– bude účinná cielená liečba liekmi proti HER2.
Podľa klasifikácie sv. Gallenský konsenzus (2009) sa považuje za nízky index proliferačnej aktivity úroveň Ki-67 menej ako 15 %, stredné – 16 – 30 % a vysoké – viac ako 30 %.
Čo môže ovplyvniť výsledok?
- Kvalita poskytovaných parafínových blokov, skúsenosti a kvalifikácia patológa, keďže imunohistochemická metóda nie je úplne štandardizovaná a hodnotenie jej výsledkov je do istej miery subjektívne.
- Interpretáciu výsledkov štúdie by mal vykonávať výlučne lekár príslušnej špecializácie, údaje o účinnosti a účelnosti predpisovania určitých liekov v závislosti od výsledkov štúdie majú čisto poradný charakter a môžu byť revidované berúc do úvahy individuálne charakteristiky pacienta.
Dôležité poznámky
- V prípade neurčitého stavu HER2/neu-receptora (výsledok imunohistochemickej štúdie je 2+) sa odporúča vykonať štúdiu FISH alebo CISH, ktorá odhalí hyperaktiváciu génu kódujúceho tento receptor. Ak tieto štúdie nie sú k dispozícii, je povolená druhá imunohistochemická štúdia, ale na inej vzorke nádorového tkaniva.
- Existuje niekoľko škál na hodnotenie receptorového stavu rakoviny prsníka, laboratórna správa by mala uviesť, ktorá z nich bola použitá na hodnotenie pozitivity nádoru v táto štúdia, ako aj popisná charakteristika počtu pozitívnych buniek, znaky farbenia bunkových štruktúr a morfologické znaky bunky.
Histologické vyšetrenie bioptického materiálu tvorby mliečnej žľazy
Cytologické vyšetrenie punkcií prsníka
Stanovenie stavu nádoru HER2 pomocou FISH
Stanovenie stavu nádoru HER2 pomocou CISH
Kto objednáva štúdium?
Onkológ, mamológ, onkogynekológ.
Literatúra
Dana Carmen Zaha. Význam imunohistochémie pri rakovine prsníka. World Journal of Clinical Oncology, 2014; 5(3): 382-392.
Pokyny pre klinickú prax NCCN v onkológii: Rakovina prsníka. Verzia 3.2017 – 10. novembra 2017. Dostupné na www.nccn.org.
Klinická laboratórna diagnostika: národné smernice: v 2 zväzkoch - T. I / Ed. V. V. Dolgová, V. V. Menšikov. - M.: GEOTAR-Media, 2012. S. 658-660.
V. F. Semiglazov, R. M. Paltuev, V. V. Semiglazov, G. A. Dashyan, T. Yu. Semiglazova, P. V. Krivorotko, K. S. Nikolaev. Všeobecné odporúčania na liečbu včasnej rakoviny prsníka Galle-2015, upravená odborníkmi Ruskej spoločnosti mamárnych onkológov. Nádory ženského reprodukčného systému, 2015; 3:43-60.
Imunohistochemická diagnostika receptorového stavu rakoviny prsníka (PR, ER, ki67, Her2 neu) je štúdium tkanivovej biopsie značenej protilátkami pod mikroskopom. Test sa vykonáva na určenie stavu receptora rakoviny prsníka.
Štúdie IHC sa uskutočňujú po vykonaní histologického vyšetrenia.
Imunohistochemické štúdie
Imunohistochemické štúdie sú typom morfologickej štúdie tkanív získaných počas biopsie a označených špecifickými protilátkami. Metóda je založená na princípe interakcie antigén-protilátka. Tkanina, v ktorej patologický proces exprimuje antigény. Keď sa protilátky aplikujú na vzorku tkaniva, vytvorí sa komplex antigén-protilátka. Vďaka štítkom sa stáva dostupným pre vizualizáciu. Patológ skúma počet buniek zafarbených markerom. Určuje lokalizáciu buniek, hormónov a ich receptorov, enzýmov, imunoglobulínov, bunkových zložiek a jednotlivých génov v skúmanom tkanive.
Imunohistochemická štúdia určuje povahu imunologických porúch. Analýza identifikuje pacientky s autoimunitným zápalom a autoimunitnou odpoveďou v endometriu, čo určuje taktiku ich liečby.
Rakovina prsníka (BC) - zhubný nádoržľazové prsné tkanivo. RZhM zaujíma prvé miesto medzi všetkými malígnymi ochoreniami u žien.
V závislosti od prítomnosti nádorových biologických markerov – expresia hormonálnych receptorov (estrogén a/alebo progesterón), sa izoluje expresia HER2 – hormonálne receptorovo-pozitívny, HER2-pozitívny a triple negatívny karcinóm prsníka.
- HER2/neu-pozitívne (HER2+) typy rakoviny prsníka sú charakterizované vysokou expresiou HER2/neu proteínu;
- HER2/neu-negatívne (HER2-) typy rakoviny prsníka sú charakterizované nízkou expresiou alebo absenciou HER2/neu/proteínu
HER2- receptor ľudského epidermálneho rastového faktora typu 2, ktorý je prítomný v tkanivách a normálne, podieľa sa na regulácii bunkového delenia a diferenciácie. Jeho nadbytok na povrchu nádorových buniek (hyperexpresia) podmieňuje rýchly nekontrolovaný rast novotvaru, vysoké riziko metastáz a nízku účinnosť niektorých typov liečby. HER2-pozitívny karcinóm prsníka je obzvlášť agresívna forma túto chorobu, preto presná definícia Stav HER2 má kľúčový význam pre výber taktiky liečby.
Estrogénové receptory (ER) a progesterónové receptory (PR)
Estrogén a progesterón sú hlavné ženské pohlavné hormóny. Produkujú ich vaječníky a sú hlavnými regulátormi ženského reprodukčného systému.
Receptory sú prítomné v rôznych tkanivách, vrátane mliečnych žliaz a maternice.
Estrogénové receptory (ER) a progesterónové receptory (PR) sú látky proteínovej povahy, ktoré sú lokalizované na povrchu nádorovej bunky. Pod vplyvom ženských pohlavných hormónov tvoria receptory komplex, ktorý stimuluje vznik nových nádorových buniek. Zničenie tohto mechanizmu je základom hormonálnej terapie.
Imunohistochemické stanovenie ER a PR je schopné vykonať diferenciálnu diagnostiku povahy nádoru, odhaliť citlivosť nádoru na hormóny. Analýza vám umožňuje upraviť a spresniť liečbu, ako aj vyhodnotiť účinnosť.
Nádory s vysokým obsahom estrogénových a progesterónových receptorov sú vysoko diferencované. Majú nízku proliferatívnu aktivitu a vyznačujú sa neagresívnym priebehom. Nádory s takýmito parametrami dobre reagujú na hormonálnu liečbu a majú dobrú prognózu. Účinnosť hormonálnej terapie je asi 50 % pre nádory exprimujúce estrogénové receptory a 75 % pre nádory exprimujúce receptory pre oba hormóny.
Ak majú nádorové bunky nízky počet estrogénových receptorov, hormonálna terapia zvyčajne neúčinné. Výnimkou je prípad, keď nádorové bunky exprimujú receptory len pre progesterón. Pri tejto možnosti je hormonálna terapia účinná u 10 % týchto pacientov.
Ki-67
Ki-67 je marker proliferačnej aktivity. Antigén je exprimovaný iba počas delenia buniek, počas jeho pokojového obdobia marker chýba.
Indikátor vám umožňuje pochopiť, či je choroba v aktívnej fáze alebo remisii.
Indikácie pre štúdiu IHC
- rakovina prsníka;
Prípravu určuje ošetrujúci lekár.
Diagnostická kyretáž sliznice maternice sa odporúča vykonať v strednej a neskorej fáze proliferácie - na 7-10 deň menštruačného cyklu.
Materiálom pre štúdiu je parafínový blok a sklenené podložné sklíčka. Ak je materiálom vzorka tkaniva vo formalínovom roztoku, musí sa vykonať dodatočná služba výroby skla.
Pri vykonávaní histologického vyšetrenia v laboratóriu tretej strany je potrebné poskytnúť protokol o histologickom vyšetrení.
Interpretácia výsledkov
Odpoveď je uvedená vo forme popisu mikroprípravku, použitých farbív a záveru. Záver môže interpretovať iba lekár, ktorý štúdiu poslal.
Cieľom štúdie bolo študovať prognostickú hodnotu receptorového stavu nádorov v skorá rakovina mliečna žľaza (I štádium). Materiály a metódy. Retrospektívna analýza anamnézy 1036 pacientok s včasným karcinómom prsníka (štádium T1N0M0), ktoré dostávali liečbu v N.N. N.N. Blokhin z Ruskej akadémie lekárskych vied a kliniky RMAPO od roku 1985 do roku 2009. Študovala sa prognostická hodnota estrogénových receptorov (ER), progesterónu (PR) a HER2, ako aj prognostická hodnota nadmernej expresie HER2 pri včasnom karcinóme prsníka, a to samostatne aj v kombinácii s receptormi steroidných hormónov. Výsledky. Na základe kombinácie receptorov boli identifikované imunohistochemické podtypy rakoviny prsníka: luminálna A a B, trojnásobne negatívna rakovina a rakovina s nadmernou expresiou HER2. Zistilo sa, že prítomnosť alebo neprítomnosť receptorov steroidných hormónov ER a PR v nádore pri včasnom karcinóme prsníka nemá žiadnu nezávislú prognostickú hodnotu. Nadmerná expresia HER2 nie je prognostickým znakom v analýze celkového prežívania, ale je nepriaznivým faktorom pre prežitie bez recidívy, a to ako samotná, tak aj v kombinácii s receptormi steroidných hormónov.
kolapsRakovina prsníka, stav nádorového receptora er pr her2, imunohistochemické podtypy rakoviny prsníka
Krátka adresa: https://website/14316692
IDR: 14316692
Bibliografia Prognostická hodnota stavu nádorových receptorov pri včasnom karcinóme prsníka
- Alan S. Coates, Marco Colleoni, Aron Goldhirsch. Je adjuvantná chemoterapia užitočná pre ženy s luminálnou rakovinou prsníka? Journal of Clinical Oncology 2012; 30:1-4.
- Islam T., Matsuo K., Ito H., Hosono S., Watanabe M., Iwata H., Tajima K., Tanaka H. Reprodukčné a hormonálne rizikové faktory pre luminálnu, HER2-nadmernú expresiu a trojnásobne negatívnu rakovinu prsníka v japončine ženy. Ann Oncol september 2012; 23(9): 2435-2441.
- Kwon M.J., Park S., Choi J.Y., Oh E., Kim Y.J., Park Y.H., Cho E.Y., Kwon M.J., Nam S.J., Im Y.H., Shin Y.K., Choi Y.L. Klinický význam nadmernej expresie CD151 v podtypoch invazívnej rakoviny prsníka. Br J Cancer 2012 28. februára; 106(5): 923-930.
- Xie W., Yang J., Cao Y., Peng C., Ning H., Zhang F., You J. Expresia proteínu viažuceho Y-Box 1 u čínskych pacientov s rakovinou prsníka. Tumor Biol 2012 Feb; 33(1): 63-71.
- Oliveira-Costa J.P., Zanetti J.S., Silveira G.G., Soave D.F., Oliveira L.R., Zorgetto V.A., Soares F.A., Zucoloto S., Ribeiro-Silva A. Diferenciálna expresia HIF-1a v CD44+CD24-/nízke prsné dukty. Diagn Pathol 2011 8. augusta; 6:73.
- Kim S.R., Paik S. Genomika adjuvantnej terapie rakoviny prsníka. Rakovina J 2011 november-december; 17(6): 500-504.
- Lu M., Li B., Li Y., Mao X., Yao F., Jin F. Prediktívna úloha molekulárnych podtypov v reakcii na neoadjuvantnú chemoterapiu u pacientov s rakovinou prsníka v severovýchodnej Číne. Asian Pac J Cancer Prev 2011; 12(9): 2411-2417.
- Cheang M.C., Chia S.K., Voduc D., Gao D., Leung S., Snider J., Watson M., Davies S., Bernard P.S., Parker J.S., Perou C.M., Ellis M.J., Nielsen T.O. Index Ki67, stav HER2 a prognóza pacientov s luminálnym B karcinómom prsníka. J Natl Cancer Inst 20. mája 2009; 101(10): 736-750.
- Pazaiti A., Fentiman I.S. Bazálny fenotyp rakoviny prsníka: dôsledky pre liečbu a prognózu. Womens Health (Lond Engl) 2011 Mar; 7(2): 181-202.
- Tran B., Bedard P.L. Luminal-B rakovina prsníka a nové terapeutické ciele. Breast Cancer Res 2011 30. novembra; 13(6): 221.
- Arnes J.B., Bgin L.R., Stefansson I., Brunet J.S., Nielsen T.O., Foulkes W.D., Akslen L.A. Expresia receptora epidermálneho rastového faktora vo vzťahu k stavu BRCA1, bazálnym markerom a prognóze pri rakovine prsníka. J Clin Pathol 2009 feb; 62(2): 139-144.
- Gucalp A., Traina T.A. Triple-negatívna rakovina prsníka: možnosti adjuvantnej liečby. Chemother Res Pract 2011; R. 696208.
- Collins L.C., Martyniak A., Kandel M.J., Stadler Z.K., Masciari S., Miron A., Richardson A.L., Schnitt S.J., Garber J.E. Bazálny cytokeratín a expresia receptora epidermálneho rastového faktora nepredpovedajú stav mutácie BRCA1 u žien s trojnásobne negatívnymi rakovinami prsníka. Am J Surg Pathol 2009 Júl; 33(7): 1093-1097.